| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 文献回顾 | 第14-21页 |
| 第一部分devR基因回补菌株的构建 | 第21-42页 |
| 1 材料 | 第21-25页 |
| 1.1 菌株和载体 | 第21-23页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.4 培养基配制 | 第24-25页 |
| 1.5 抗菌药物、试剂，缓冲液配制 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-34页 |
| 2.1 细菌培养 | 第25-26页 |
| 2.2 目的基因devR(Rv3133c)的扩增 | 第26-27页 |
| 2.3 构建Acetamidase启动子启动表达devR(Rv3133c)的重组质粒 | 第27-30页 |
| 2.4 结核分枝杆菌devR(Rv3133c)基因敲除BCG菌株电转化感受态的制备 | 第30-31页 |
| 2.5 重组质粒P2电转化结核分枝杆菌devR基因敲除BCG菌株感受态 | 第31页 |
| 2.6 乙酰胺启动子诱导表达devR基因的回补株鉴定 | 第31-32页 |
| 2.7 结核分枝杆菌devR基因敲除和回补BCG菌株鉴定 | 第32-33页 |
| 2.8 BCG野生菌株，devR敲除菌株和devR回补菌株的生长曲线测定 | 第33页 |
| 2.9 BCG野生菌株、devR敲除菌株和devR回补菌株的耐药发生率检测 | 第33-34页 |
| 2.10 统计 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-41页 |
| 3.1 MTB标准菌株H37Rv培养 | 第34-35页 |
| 3.2 目的基因devR(Rv3133c)扩增 | 第35页 |
| 3.3 Pcherry 3 载体与目的基因devR连接鉴定 | 第35-37页 |
| 3.4 重组质粒P1与PJV53质粒的目的片段Acetamindase连接鉴定 | 第37-38页 |
| 3.5 重组质粒P2电转化devR基因敲除BCG菌株感受态筛选及鉴定 | 第38-39页 |
| 3.6 BCG野生菌株，devR敲除菌株和devR回补菌株的生长曲线测定 | 第39-40页 |
| 3.7 BCG野生菌株，devR敲除菌株和devR回补菌株的耐药发生率检测 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第二部分devR对结核菌细胞毒性的 调控作用 | 第42-55页 |
| 1 材料 | 第42-44页 |
| 1.1 菌株和细胞 | 第42页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 1.3 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.4 试剂配制 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-50页 |
| 2.1 细菌培养 | 第44页 |
| 2.2 细胞培养 | 第44-46页 |
| 2.3 BCG、devR敲除菌株和devR回补菌株分别感染A549细胞和Raw264.7 细胞 | 第46-47页 |
| 2.4 凋亡检测 | 第47页 |
| 2.5 乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase ，LDH)释放检测 | 第47-48页 |
| 2.6 细胞总RNA提取和反转录 | 第48-49页 |
| 2.7 RT-PCR | 第49-50页 |
| 2.8 统计 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-54页 |
| 3.1 BCG野生菌株、devR敲除和devR回补菌株感染实验前的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.2 BCG野生菌株、devR敲除和devR回补菌株致A549、Raw264.7 细胞凋亡的作用 | 第51-52页 |
| 3.3 BCG野生菌株、devR敲除和devR回补菌株致A549、Raw264.7 细胞的坏死效应 | 第52-53页 |
| 3.4 BCG野生菌株、devR敲除和devR回补菌株感染A549、Raw264.7 细胞后细胞凋亡相关基因的表达 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 个人简历和研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
