摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
前言 | 第8-10页 |
第一部分 CIK诱导培养过程中的细胞凋亡 | 第10-18页 |
引言 | 第10页 |
1 材料 | 第10-11页 |
1.1 样本 | 第10页 |
1.2 试剂 | 第10-11页 |
1.3 仪器 | 第11页 |
2 方法 | 第11-13页 |
2.1 PBMC分离与CIK诱导培养 | 第11-12页 |
2.2 流式细胞术分析CIK细胞亚群 | 第12页 |
2.3 细胞凋亡分析 | 第12-13页 |
3 结果 | 第13-16页 |
3.1 CIK诱导培养初期细胞数减少 | 第13页 |
3.2 CIK诱导培养初期部分细胞凋亡 | 第13-14页 |
3.3 IFN-γ使T细胞群(CD3+)比例降低 | 第14-15页 |
3.4 IFN-γ对CD4+T细胞的抑制作用 | 第15-16页 |
4 小结 | 第16-18页 |
第二部分 CIK诱导培养过程中Treg细胞受到抑制 | 第18-27页 |
引言 | 第18页 |
1 材料 | 第18-19页 |
1.1 样本 | 第18页 |
1.2 试剂 | 第18页 |
1.3 仪器 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-22页 |
2.1 PBMC分离 | 第19-20页 |
2.2 细胞的诱导培养 | 第20页 |
2.3 流式细胞术分析CD4+CD25+细胞比例 | 第20页 |
2.4 CIK细胞总RNA提取 | 第20-21页 |
2.5 反转录合成cDNA第一股链 | 第21-22页 |
2.6 荧光定量PCR与分析FoxP3 基因表达 | 第22页 |
3 结果 | 第22-25页 |
3.1 IFN-γ 提高CIK细胞群中CD3+CD56+细胞的比例 | 第22-23页 |
3.2 IFN-γ 降低CIK细胞群中CD4+CD25+细胞的比例 | 第23-24页 |
3.3 Fox P3 基因转录水平的差异 | 第24-25页 |
3.4 CIK胞毒活性 | 第25页 |
4 小结 | 第25-27页 |
第三部分 CIK对T细胞平衡的调节 | 第27-34页 |
引言 | 第27页 |
1 材料 | 第27-28页 |
1.1 样本 | 第27页 |
1.2 试剂 | 第27页 |
1.3 仪器 | 第27-28页 |
2 方法 | 第28-31页 |
2.1 流式细胞分析与细胞分选 | 第28页 |
2.2 CD3+CD56+细胞分化比例分析 | 第28-29页 |
2.3 K562 靶细胞杀伤实验 | 第29页 |
2.5 总RNA提取 | 第29-30页 |
2.6 TCRBV亚家族RT-PCR | 第30页 |
2.7 TCRBV亚家族表达分析 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-33页 |
3.1 PBMC与CIK细胞TCRBV基因亚家族表达差异 | 第31-33页 |
4 小结 | 第33-34页 |
讨论 | 第34-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |