中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第9-17页 |
1.1 干细胞的出现及多能干细胞的研究进展 | 第9-10页 |
1.1.1 干细胞的出现以及在神经发育疾病中的研究 | 第9-10页 |
1.1.2 诱导多能干细胞的出现以及在神经发育疾病中的研究 | 第10页 |
1.2 当前神经发育疾病研究模型的研究进展 | 第10-13页 |
1.2.1 在神经发育疾病研究中以动物来源细胞以及动物为模型的研究进展 | 第11-13页 |
1.2.2 神经发育疾病研究对研究模型的要求 | 第13页 |
1.3 现行iPSC来源的神经发育模型诱导方法及其应用 | 第13-17页 |
1.3.1 现行iPSC来源的神经发育模型诱导方法 | 第13-15页 |
1.3.2 现行iPSC来源的神经发育模型诱导方法在神经发育疾病中的应用 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-37页 |
2.1 主要的实验器材和试剂 | 第17-20页 |
2.2 iPSC的培养 | 第20-22页 |
2.2.1 所需液体的配制 | 第20-21页 |
2.2.2 iPSC的复苏 | 第21页 |
2.2.3 iPSC的维持 | 第21-22页 |
2.2.4 iPSC的传代 | 第22页 |
2.2.5 hiPSC的冻存 | 第22页 |
2.3 星形胶质细胞饲养层分离培养 | 第22-24页 |
2.3.1 星形胶质细胞培养液的配制 | 第22-23页 |
2.3.2 星形胶质细胞的提取 | 第23页 |
2.3.3 星形胶质细胞传代、扩增 | 第23-24页 |
2.4 iPSC的神经诱导及终末神经元分化 | 第24-27页 |
2.4.1 所需液体的配制 | 第24-25页 |
2.4.2 iPSC神经诱导 | 第25-26页 |
2.4.3 神经前体细胞的传代 | 第26页 |
2.4.4 培养皿的包被方法 | 第26页 |
2.4.5 终末神经元分化 | 第26-27页 |
2.5 免疫染色鉴定 | 第27-29页 |
2.5.1 工作液的配制 | 第27-28页 |
2.5.2 免疫染色实验 | 第28页 |
2.5.3 hiPSC鉴定 | 第28页 |
2.5.4 神经前体细胞的鉴定 | 第28-29页 |
2.5.5 神经元亚类鉴定分析 | 第29页 |
2.6 神经元形态分析 | 第29-30页 |
2.6.1 神经前体细胞病毒感染以终末分化 | 第29页 |
2.6.2 神经元形态重构以及分析 | 第29-30页 |
2.7 电生理实验以及分析 | 第30-32页 |
2.7.1 溶液的配制 | 第30-31页 |
2.7.2 电生理实验 | 第31-32页 |
2.8 神经元转录组测序及分析 | 第32-34页 |
2.8.1 RNA提取 | 第32-33页 |
2.8.2 Illumina转录组文库的构建与RNA测序 | 第33页 |
2.8.3 RNA测序分析 | 第33-34页 |
2.9 qRT-PCR验证测序结果 | 第34-36页 |
2.9.1 RNA逆转录实验 | 第34-35页 |
2.9.2 qRT-PCR实验 | 第35-36页 |
2.10 数据分析 | 第36-37页 |
第三章 结果 | 第37-56页 |
3.1 成功构建了hiPSC体外诱导神经发育模型 | 第37-47页 |
3.1.1 hiPSC在体外神经发育模型流程 | 第37-38页 |
3.1.2 hiPSC-NPC诱导过程中hiPSC干性定向标志物的消失,神经干性定向标志物的出现以及神经花环的形成 | 第38-39页 |
3.1.3 hiPSC、神经前体细胞、神经细胞的鉴定 | 第39-40页 |
3.1.4 神经元发育过程中神经元轴突和树突发育 | 第40-42页 |
3.1.5 神经元发育过程中神经元功能发育结构基础的形成 | 第42-43页 |
3.1.6 在神经元发育过程中神经元功能发育电生理参数 | 第43-46页 |
3.1.7 在神经发育过程中对wnt相关基因进行分析 | 第46-47页 |
3.2 神经元的鉴定以及不同种类神经元的形态发育分析 | 第47-54页 |
3.2.1 神经元种类鉴定 | 第47-48页 |
3.2.2 三类神经元突起长度发育以及树突发育的复杂度分析 | 第48-54页 |
3.3 不同包被条件对神经分化效率以及对神经元命运的影响 | 第54-56页 |
3.3.1 不同包被条件对神经分化效率有影响 | 第54-55页 |
3.3.2 不同包被条件不影响神经元终末分化命运 | 第55-56页 |
第四章 讨论 | 第56-62页 |
4.1 hiPSC诱导神经模型的建立及其诱导方法 | 第56-58页 |
4.2 不同种类神经元形态发育 | 第58-59页 |
4.3 不同包被条件对神经分化效率以及神经元命运的影响 | 第59-62页 |
第五章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
英文缩略词表 | 第70-71页 |
在学期间发表论文清单 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |