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hiPSC来源神经诱导模型的建立及其神经生物学参数分析

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 前言第9-17页
    1.1 干细胞的出现及多能干细胞的研究进展第9-10页
        1.1.1 干细胞的出现以及在神经发育疾病中的研究第9-10页
        1.1.2 诱导多能干细胞的出现以及在神经发育疾病中的研究第10页
    1.2 当前神经发育疾病研究模型的研究进展第10-13页
        1.2.1 在神经发育疾病研究中以动物来源细胞以及动物为模型的研究进展第11-13页
        1.2.2 神经发育疾病研究对研究模型的要求第13页
    1.3 现行iPSC来源的神经发育模型诱导方法及其应用第13-17页
        1.3.1 现行iPSC来源的神经发育模型诱导方法第13-15页
        1.3.2 现行iPSC来源的神经发育模型诱导方法在神经发育疾病中的应用第15-17页
第二章 材料与方法第17-37页
    2.1 主要的实验器材和试剂第17-20页
    2.2 iPSC的培养第20-22页
        2.2.1 所需液体的配制第20-21页
        2.2.2 iPSC的复苏第21页
        2.2.3 iPSC的维持第21-22页
        2.2.4 iPSC的传代第22页
        2.2.5 hiPSC的冻存第22页
    2.3 星形胶质细胞饲养层分离培养第22-24页
        2.3.1 星形胶质细胞培养液的配制第22-23页
        2.3.2 星形胶质细胞的提取第23页
        2.3.3 星形胶质细胞传代、扩增第23-24页
    2.4 iPSC的神经诱导及终末神经元分化第24-27页
        2.4.1 所需液体的配制第24-25页
        2.4.2 iPSC神经诱导第25-26页
        2.4.3 神经前体细胞的传代第26页
        2.4.4 培养皿的包被方法第26页
        2.4.5 终末神经元分化第26-27页
    2.5 免疫染色鉴定第27-29页
        2.5.1 工作液的配制第27-28页
        2.5.2 免疫染色实验第28页
        2.5.3 hiPSC鉴定第28页
        2.5.4 神经前体细胞的鉴定第28-29页
        2.5.5 神经元亚类鉴定分析第29页
    2.6 神经元形态分析第29-30页
        2.6.1 神经前体细胞病毒感染以终末分化第29页
        2.6.2 神经元形态重构以及分析第29-30页
    2.7 电生理实验以及分析第30-32页
        2.7.1 溶液的配制第30-31页
        2.7.2 电生理实验第31-32页
    2.8 神经元转录组测序及分析第32-34页
        2.8.1 RNA提取第32-33页
        2.8.2 Illumina转录组文库的构建与RNA测序第33页
        2.8.3 RNA测序分析第33-34页
    2.9 qRT-PCR验证测序结果第34-36页
        2.9.1 RNA逆转录实验第34-35页
        2.9.2 qRT-PCR实验第35-36页
    2.10 数据分析第36-37页
第三章 结果第37-56页
    3.1 成功构建了hiPSC体外诱导神经发育模型第37-47页
        3.1.1 hiPSC在体外神经发育模型流程第37-38页
        3.1.2 hiPSC-NPC诱导过程中hiPSC干性定向标志物的消失,神经干性定向标志物的出现以及神经花环的形成第38-39页
        3.1.3 hiPSC、神经前体细胞、神经细胞的鉴定第39-40页
        3.1.4 神经元发育过程中神经元轴突和树突发育第40-42页
        3.1.5 神经元发育过程中神经元功能发育结构基础的形成第42-43页
        3.1.6 在神经元发育过程中神经元功能发育电生理参数第43-46页
        3.1.7 在神经发育过程中对wnt相关基因进行分析第46-47页
    3.2 神经元的鉴定以及不同种类神经元的形态发育分析第47-54页
        3.2.1 神经元种类鉴定第47-48页
        3.2.2 三类神经元突起长度发育以及树突发育的复杂度分析第48-54页
    3.3 不同包被条件对神经分化效率以及对神经元命运的影响第54-56页
        3.3.1 不同包被条件对神经分化效率有影响第54-55页
        3.3.2 不同包被条件不影响神经元终末分化命运第55-56页
第四章 讨论第56-62页
    4.1 hiPSC诱导神经模型的建立及其诱导方法第56-58页
    4.2 不同种类神经元形态发育第58-59页
    4.3 不同包被条件对神经分化效率以及神经元命运的影响第59-62页
第五章 结论第62-63页
参考文献第63-70页
英文缩略词表第70-71页
在学期间发表论文清单第71-72页
致谢第72页

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