| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 学位论文缩略词表 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-16页 |
| 1.1 引言 | 第12-14页 |
| 1.2 研究背景和意义 | 第14-16页 |
| 第二章 鉴定metformin诱导CMA的功能 | 第16-49页 |
| 2.1 前言 | 第16-17页 |
| 2.2 主要实验材料 | 第17-20页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2.2 主要试剂和实验材料 | 第18-20页 |
| 2.3 基本操作 | 第20-28页 |
| 2.3.1 主要试剂配方 | 第20-22页 |
| 2.3.2 感受态细胞制备 | 第22页 |
| 2.3.3 DNA片段切胶回收 | 第22-23页 |
| 2.3.4 质粒DNA小量制备 | 第23-24页 |
| 2.3.5 聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24-25页 |
| 2.3.6 无内毒素质粒大提 | 第25-28页 |
| 2.4 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.4.1 PCR扩增目的基因序列 | 第28-29页 |
| 2.4.2 PCR产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收 | 第29-30页 |
| 2.4.3 酶切和连接 | 第30-31页 |
| 2.4.4 PCR扩增目的基因序列 | 第31-33页 |
| 2.4.5 重组质粒鉴定 | 第33页 |
| 2.4.6 重组质粒的表达及观察 | 第33-34页 |
| 2.4.7 Western-Blot | 第34页 |
| 2.4.8 HK2单细胞稳转株的构建 | 第34-35页 |
| 2.4.9 候选药物的筛选 | 第35页 |
| 2.5 结果和分析 | 第35-47页 |
| 2.5.1 HK2-EGFP Tet-on筛药模型的构建 | 第35-38页 |
| 2.5.2 CMA诱导剂候选化合物的筛选 | 第38-40页 |
| 2.5.3 Metformin对癌细胞具有杀伤作用 | 第40-42页 |
| 2.5.4 Metformin诱导HK2SSA1中HK2-EGFP蛋白水平降低 | 第42-43页 |
| 2.5.5 Metformin通过溶酶体途径诱导HK2及经典CMA底物蛋白水平的降低 | 第43-45页 |
| 2.5.6 Metformin增强HK2与CMA关键组分HSC70和LAMP2A的蛋白相互作用 | 第45-47页 |
| 2.6 总结和讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 Metformin抑制HBV复制并诱导CMA促进p300降解 | 第49-69页 |
| 3.1 前言 | 第49-50页 |
| 3.2 主要实验材料 | 第50-53页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第50-51页 |
| 3.2.2 主要试剂和实验材料 | 第51-53页 |
| 3.3 基本操作 | 第53-60页 |
| 3.3.1 主要试剂配方 | 第53-55页 |
| 3.3.2 感受态细胞制备 | 第55页 |
| 3.3.3 质粒DNA小量制备 | 第55-56页 |
| 3.3.4 聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第56-57页 |
| 3.3.5 无内毒素质粒大提 | 第57-60页 |
| 3.4 实验方法 | 第60-63页 |
| 3.4.1 Western-Blot | 第60-62页 |
| 3.4.2 乙型肝炎病毒核酸提取 | 第62-63页 |
| 3.4.3 乙型肝炎病毒核酸的荧光PCR检测 | 第63页 |
| 3.5 结果和分析 | 第63-68页 |
| 3.5.1 Metformin抑制HBV的复制 | 第63-66页 |
| 3.5.2 Metformin通过溶酶体诱导p300蛋白水平降低 | 第66-67页 |
| 3.5.3 Metformin增强p300与CMA关键组分HSC70的相互作用 | 第67-68页 |
| 3.6 总结和讨论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 综述 分子伴侣介导的自噬的研究进展 | 第70-82页 |
| 1 引言 | 第71-72页 |
| 2 CMA组分 | 第72-75页 |
| 2.1 KFERQ基序 | 第72-73页 |
| 2.2 分子伴侣 | 第73-74页 |
| 2.3 LAMP2A | 第74-75页 |
| 3 CMA与疾病的关系 | 第75-78页 |
| 3.1 神经退行性疾病 | 第76-77页 |
| 3.2 癌症 | 第77页 |
| 3.3 衰老 | 第77-78页 |
| 4 总结 | 第78-79页 |
| 5 参考文献 | 第79-82页 |
| 作者简历及硕士期间发表或将发表的论文 | 第82页 |
