| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-35页 |
| 2.1 材料 | 第17-23页 |
| 2.1.1 结直肠癌细胞系 | 第17页 |
| 2.1.2 结直肠癌组织标本 | 第17页 |
| 2.1.3 CTGF 3'UTR报告载体构建 | 第17-18页 |
| 2.1.4 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.5 主要溶液的配制 | 第19-23页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 Real Time PCR | 第23-28页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第28-29页 |
| 2.2.3 Transwell细胞侵袭及迁移实验 | 第29页 |
| 2.2.4 双荧光素酶报告基因实验 | 第29-32页 |
| 2.2.5 细胞免疫荧光实验 | 第32页 |
| 2.2.6 Western Blot检测细胞及组织蛋白表达 | 第32-34页 |
| 2.2.7 结直肠癌组织的免疫组织化学检测 | 第34页 |
| 2.2.8 数据整理与统计学分析 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-55页 |
| 3.1 mir-133b与靶基因CTGF在结直肠癌中的靶点验证 | 第35-43页 |
| 3.1.1 mir-133b的生物信息学分析 | 第35-39页 |
| 3.1.2 瞬时转染mir-133b后对CTGF表达的影响 | 第39-41页 |
| 3.1.3 双荧光素酶报告基因实验验证mir-133b负向调控靶基因CTGF | 第41-43页 |
| 3.2 mir-133b与CTGF在结直肠癌组织标本中的表达及临床病理特征的相关性分析 | 第43-49页 |
| 3.2.1 Real Time PCR检测71对癌组织及癌旁组织样本中mir-133b的表达 | 第43-46页 |
| 3.2.2 CTGF在结直肠癌组织中的表达 | 第46-47页 |
| 3.2.3 CRC临床病理特征的相关性分析 | 第47-49页 |
| 3.3 mir-133b调控结直肠癌EMT过程的分子机制分析 | 第49-55页 |
| 3.3.1 RT-PCR和Western Blot检测mir-133b及CTGF对EMT标志分子的mRNA及蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.2 细胞免疫荧光检测mir-133b及CTGF对EMT标志分子表达影响和细胞形态观察 | 第50-52页 |
| 3.3.3 Transwell实验检测mir-133b和CTGF对细胞侵袭及转移能力的影响 | 第52-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-59页 |
| 4.1 EMT是结直肠癌侵袭转移的关键 | 第55页 |
| 4.2 mir-133b抑制结直肠癌EMT | 第55-56页 |
| 4.3 靶基因CTGF是mir-133b调控结直肠癌EMT的关键靶点 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 综述 | 第65-77页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
