摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第8-12页 |
前言 | 第12-16页 |
第一章 C57BL/6小鼠颈动脉导丝损伤内膜增生模型建立及评估 | 第16-23页 |
1.1 实验仪器与试剂 | 第16-18页 |
1.1.1 实验仪器 | 第16-17页 |
1.1.2 实验试剂 | 第17页 |
1.1.3 主要试剂的配置 | 第17-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-19页 |
1.2.1 小鼠颈动脉导丝损伤及颈动脉结扎模型 | 第18-19页 |
1.2.2 小鼠颈动脉内膜增生评估 | 第19页 |
1.2.3 内皮化程度评估 | 第19页 |
1.3 实验结果 | 第19-21页 |
1.3.1 导丝损伤+颈总动脉结扎可稳定建立C57BL/6小鼠颈动脉内膜增生模型 | 第19-20页 |
1.3.2 颈动脉内皮修复标准曲线 | 第20-21页 |
1.4 实验小结 | 第21-23页 |
第二章 Saquinavir抑制了颈动脉内膜增生的发展 | 第23-30页 |
2.1 实验仪器与试剂 | 第23-24页 |
2.1.1 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.2 实验试剂 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-26页 |
2.2.1 颈动脉损伤及颈总动脉结扎模型建立及评估如上所述 | 第25页 |
2.2.2 免疫荧光检测 | 第25-26页 |
2.3 实验结果 | 第26-27页 |
2.3.1 SQV和RTV联合作用减轻内膜增生 | 第26页 |
2.3.2 SQV/RTV作用减轻了手术后颈动脉平滑肌细胞含量 | 第26-27页 |
2.3.3 SQV/RTV联合作用减少了新生内膜中巨噬细胞浸润,以及CCR2表达 | 第27页 |
2.3.4 统计学分析 | 第27页 |
2.4 实验小结 | 第27-30页 |
第3章 SQV/RTV抑制了颈动脉损伤后早期炎症反应反应 | 第30-34页 |
3.1 实验仪器与试剂 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-32页 |
3.3 实验结果 | 第32-33页 |
3.3.1 SQV抑制了血管损伤早期炎症因子活化 | 第32-33页 |
3.3.2 统计学分析 | 第33页 |
3.4 实验小结 | 第33-34页 |
第4章 损伤后Cathepsin L表达和活性变化及Saquinavir治疗对其影响 | 第34-43页 |
4.1 实验器械和试剂 | 第34-35页 |
4.2 实验方法 | 第35-38页 |
4.2.1 Cathepsin L活性检测 | 第36页 |
4.2.2 腺病毒包裹转染Cathepsin L shRNA | 第36-37页 |
4.2.3 Western blot | 第37-38页 |
4.2.4 免疫荧光法检测Cathepsin L表达 | 第38页 |
4.3 实验结果 | 第38-39页 |
4.3.1 血管损伤可显著上调Cathepsin表达及活性 | 第39页 |
4.3.2 Cathepsin L基因敲除部分抑制内膜增生 | 第39页 |
4.3.3 局部低表达Cath印sin L部分抑制内膜增生 | 第39页 |
4.3.4 SQV可显著抑制小鼠颈动脉损伤后Cathepsin L活性升高 | 第39页 |
4.4 实验小结 | 第39-43页 |
第5章 Saquinavir对主要细胞行为影响 | 第43-58页 |
5.1 实验仪器和试剂 | 第43-45页 |
5.2 实验方法 | 第45-50页 |
5.2.1 细胞培养 | 第45-47页 |
5.2.2 蛋白印记检测(Western blot) | 第47-48页 |
5.2.3 TNF-α Elisa检测 | 第48页 |
5.2.4 MTS检测细胞活力与增殖 | 第48-49页 |
5.2.5 划痕法测细胞迁移 | 第49页 |
5.2.6 THP-1细胞粘附实验 | 第49页 |
5.2.7 小RNA干扰技术抑制目的蛋白 | 第49-50页 |
5.2.8 统计学分析 | 第50页 |
5.3 实验结果 | 第50-57页 |
5.3.1 不同浓度SQV对体外细胞活性影响 | 第50-51页 |
5.3.2 SQV抑制HMGB1引起的平滑肌迁移 | 第51-52页 |
5.3.3 SQV抑制单核-内皮细胞粘附 | 第52-53页 |
5.3.4 SQV抑制骨髓来源巨噬细胞TNF-α的释放 | 第53-54页 |
5.3.5 SQV抑制内皮及平滑肌细胞MCP-1表达 | 第54-56页 |
5.3.6 Cathepsin V沉默可抑制平滑肌迁移 | 第56-57页 |
5.4 小结 | 第57-58页 |
讨论 | 第58-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
文献综述 | 第64-86页 |
参考文献 | 第78-86页 |
致谢 | 第86-87页 |