中文摘要 | 第4-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
目录 | 第12-13页 |
中英文对照及縮略词表 | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-29页 |
2.1 实验材料 | 第18-22页 |
2.1.1 临床标本 | 第18页 |
2.1.2 细胞株、质粒及菌种 | 第18页 |
2.1.3 克隆引物、实时定量引物和siRNA干扰片段 | 第18-19页 |
2.1.4 主要实验试剂及耗材 | 第19-21页 |
2.1.5 主要实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.6 生物信息学工具网站及数据库 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第22页 |
2.2.2 基因芯片样本准备及送测 | 第22-23页 |
2.2.3 实时定量PCR | 第23页 |
2.2.4 H19慢病毒表达载体构建 | 第23-24页 |
2.2.5 质粒、siRNA及miRNA抑制物的转染 | 第24页 |
2.2.6 慢病毒包装 | 第24页 |
2.2.7 慢病毒感染细胞 | 第24页 |
2.2.8 蛋白质免疫印记实验 | 第24-25页 |
2.2.9 细胞活性检测实验(MTS实验) | 第25页 |
2.2.10 miRNA实时定量PCR | 第25-26页 |
2.2.11 Transwell实验 | 第26页 |
2.2.12 染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第26-28页 |
2.2.13 统计分析 | 第28-29页 |
第三章 实验结果 | 第29-40页 |
3.1 长非编码RNA H19在敏感与耐药的乳腺癌细胞系之间存在显著的表达差异 | 第29-31页 |
3.2 H19的表达在乳腺癌组织中显著下调 | 第31-32页 |
3.3 H19的表达水平可以影响乳腺癌细胞的耐药性 | 第32-34页 |
3.4 H19的表达水平影响乳腺癌细胞的EMT表型 | 第34-36页 |
3.5 H19通过激活miRNA200c表达维持乳腺癌细胞药物敏感性并抑制EMT过程 | 第36-38页 |
3.6 H19在调控miRNA200c表达的分子机制 | 第38-40页 |
第四章 讨论 | 第40-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
综述 | 第50-62页 |
参考文献 | 第57-62页 |
硕士期间发表学术论文 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |