| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 肝癌 | 第12-13页 |
| 1.2 MSCs | 第13-14页 |
| 1.3 凋亡素 | 第14-20页 |
| 1.3.1 凋亡素的结构 | 第14-15页 |
| 1.3.2 凋亡素诱导肿瘤细胞凋亡的机制 | 第15-17页 |
| 1.3.3 凋亡素的表达载体及其在肿瘤治疗中的应用 | 第17-20页 |
| 1.3.3.1 凋亡素的表达载体及其应用 | 第18页 |
| 1.3.3.2 其它载体及其应用 | 第18-20页 |
| 1.3.4 蛋白转导结构域 | 第20页 |
| 1.4 腺病毒包装系统 | 第20-21页 |
| 2 实验材料 | 第21-27页 |
| 2.1 细胞株和细胞培养用培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒和菌株 | 第21-22页 |
| 2.1.3 细胞培养用培养基 | 第22页 |
| 2.2 实验用主要试剂和试剂盒 | 第22页 |
| 2.3 耗材 | 第22页 |
| 2.4 实验用主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.5 主要溶液的配置方法 | 第23-27页 |
| 3 实验方法 | 第27-40页 |
| 3.1 迁移实验 | 第27-28页 |
| 3.2 重组腺病毒的构建与鉴定 | 第28-38页 |
| 3.2.1 SP-TAT-vp3融合基因的获得 | 第28页 |
| 3.2.2 重组穿梭载体pAdTrack-CMV-vp3的构建 | 第28-29页 |
| 3.2.3 连接产物转化E.coli DH5α感受态细胞 | 第29页 |
| 3.2.4 提取和鉴定重组质粒pAdTrack-CMV-vp3 | 第29-31页 |
| 3.2.5 含有vp3基因的重组腺病毒质粒的获得 | 第31-32页 |
| 3.2.6 重组腺病毒Ad-vp3的构建 | 第32-33页 |
| 3.2.7 重组腺病毒Ad-vp3的鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2.8 测定重组病毒的滴度 | 第34-35页 |
| 3.2.9 重组腺病毒Ad-vp3感染细胞和鉴定 | 第35-38页 |
| 3.3 含有凋亡素的条件培养基对正常细胞和癌细胞的影响 | 第38页 |
| 3.4 MSCs-A条件培养基对HepG_2的抑制效应分析 | 第38-39页 |
| 3.5 MSCs-A和HepG_2共培养对HepG_2的抑制效应分析 | 第39-40页 |
| 4 结果 | 第40-51页 |
| 4.1 迁移实验 | 第40-41页 |
| 4.2 重组腺病毒Ad-vp3的构建及鉴定 | 第41-48页 |
| 4.2.1 重组腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-vp3的构建 | 第41-43页 |
| 4.2.2 连接产物转化以及重组腺病毒鉴定 | 第43-44页 |
| 4.2.3 重组腺病毒Ad-vp3感染293细胞及滴度测定 | 第44-46页 |
| 4.2.4 高滴度的病毒颗粒感染MSCs | 第46-48页 |
| 4.3 Western Blot检测apoptin蛋白的表达 | 第48-49页 |
| 4.4 MSCs-A条件培养基对正常细胞和癌细胞的影响 | 第49页 |
| 4.5 MSCs-A条件培养基对HepG_2的抑制效应分析 | 第49-50页 |
| 4.6 MSCs-A和HepG_2共培养对HepG_2的抑制效应分析 | 第50-51页 |
| 5 讨论 | 第51-53页 |
| 6 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 作者简历 | 第61-63页 |
| 学位论文数据集 | 第63页 |
