| 论文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract of Thesis | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 研究内容和技术路线 | 第12-13页 |
| 1.1 研究内容 | 第12-13页 |
| 1.1.1 建立 scinderin 敲降的稳定胃癌细胞表达株 SGC7901 | 第12页 |
| 1.1.2 分析敲降 scinderin 对 SGC7901 细胞迁移能力和细胞 EMT 进程的影响 | 第12页 |
| 1.1.3 分析敲降 scinderin 对 SGC7901 细胞增殖和细胞周期的影响 | 第12-13页 |
| 1.2 技术路线 | 第13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-17页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第13页 |
| 2.1.2 细菌 | 第13-14页 |
| 2.1.3 质粒 | 第14页 |
| 2.1.4 引物 | 第14-15页 |
| 2.1.5 抗体 | 第15页 |
| 2.1.6 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.7 试剂的配制 | 第16页 |
| 2.1.8 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第17-18页 |
| 2.2.2 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第18-19页 |
| 2.2.3 scinderin-shRNA 慢病毒质粒的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.4 感受态细胞的转化 | 第20页 |
| 2.2.5 阳性克隆的 PCR 鉴定 | 第20-21页 |
| 2.2.6 慢病毒包装及滴度测定 | 第21页 |
| 2.2.7 慢病毒感染 SGC7901 细胞 | 第21页 |
| 2.2.8 感染细胞中 scinderin 基因表达水平的检测 | 第21页 |
| 2.2.9 总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.10 RNA 含量测定 | 第22页 |
| 2.2.11 实时定量 RTqPCR 技术检测目的基因的 mRNA 表达水平 | 第22-24页 |
| 2.2.12 蛋白印迹 (Western blot) 技术检测蛋白质表达 | 第24-26页 |
| 2.2.13 Transwell 小室检测细胞的迁移能力 | 第26-27页 |
| 2.2.14 实时细胞分析仪(RTCA)检测细胞增殖能力 | 第27页 |
| 2.2.15 流式细胞术检测细胞周期变化 | 第27页 |
| 2.2.16 统计学分析 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-35页 |
| 3.1 scinderin 沉默的稳定胃癌细胞株 SGC-7901 的建立 | 第28-30页 |
| 3.1.1 scinderin-shRNA 慢病毒质粒的构建 | 第28页 |
| 3.1.2 慢病毒的包装及滴度测定 | 第28页 |
| 3.1.3 慢病毒感染 SGC-7901 细胞 | 第28-30页 |
| 3.1.4 感染细胞的 scinderin 表达水平 | 第30页 |
| 3.2 scinderin 沉默对 SGC7901 细胞迁移能力及其上皮间质转化的影响 | 第30-32页 |
| 3.2.1 scinderin 沉默降低 SGC-7901 细胞的迁移能力 | 第30-31页 |
| 3.2.2 scinderin 沉默导致 SGC-7901 细胞 EMT 标志分子呈现差异表达 | 第31-32页 |
| 3.3 scinderin 沉默对 SGC-7901 细胞增殖能力及其细胞周期的影响 | 第32-35页 |
| 3.3.1 scinderin 沉默降低 SGC-7901 细胞的增殖能力 | 第32-33页 |
| 3.3.2 scinderin 沉默阻滞 SGC-7901 细胞的细胞周期 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 5 全文小结 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 附录A 缩略词 | 第42-43页 |
| 附录B 综述 | 第43-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 在学研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
