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TGFβ1R-PI3K/AKT信号通路介导高糖诱导系膜细胞来源外泌体对足细胞的损伤及小檗碱的作用

英文缩略词对照表(Abbreviation)第8-10页
摘要第10-15页
Abstract第15-21页
1 前言第22-26页
2 材料与仪器第26-31页
    2.1 实验细胞第26-27页
    2.2 化学药品和试剂第27-29页
    2.3 小檗碱(BBR)的制备第29-30页
    2.4 仪器与设备第30-31页
3 实验方法第31-39页
    3.1 肾小球系膜细胞(GMCs)的培养和分组第31页
    3.2 GMCs的转染第31-32页
    3.3 足细胞的培养和分组第32-33页
    3.4 GMCs与足细胞的共培养第33页
    3.5 外泌体的的分离第33-34页
    3.6 外泌体的鉴定和摄取第34-35页
        3.6.1 外泌体的标志蛋白鉴定第34页
        3.6.2 外泌体的电镜鉴定第34页
        3.6.3 外泌体的粒径鉴定第34-35页
        3.6.4 外泌体的摄取鉴定第35页
    3.7 CCK-8第35-36页
    3.8 细胞凋亡第36页
    3.9 免疫荧光实验第36-37页
    3.10 细胞黏附实验第37页
    3.11 Westernblot检测第37-38页
    3.12 ELISA检测第38页
    3.13 数据分析第38-39页
4 实验结果第39-52页
    4.1 BBR对GMCs增殖的影响第39-40页
    4.2 GMCs来源外泌体的鉴定第40-42页
        4.2.1 WesternBlot法检测外泌体标志蛋白第40页
        4.2.2 透射电镜观察外泌体的形态第40页
        4.2.3 外泌体粒径分析第40页
        4.2.4 外泌体被足细胞摄取第40-42页
    4.3 高糖诱导GMCs来源的外泌体参与足细胞功能的损伤第42-44页
        4.3.1 高糖诱导GMCs来源的外泌体促进足细胞凋亡第42页
        4.3.2 高糖诱导GMCs来源的外泌体降低足细胞黏附能力第42-43页
        4.3.3 高糖诱导GMCs来源的外泌体降低足细胞上nephrin,podocin和WT-1蛋白表达第43-44页
    4.4 BBR改善高糖诱导GMCs来源外泌体对足细胞功能的损伤第44-46页
        4.4.1 BBR作用高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞上nephrin,podocin和WT-1蛋白表达第44页
        4.4.2 BBR作用高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞黏附能力第44-45页
        4.4.3 BBR作用高糖诱导GMCs来源的外泌体下调足细胞凋亡率第45-46页
    4.5 BBR作用于高糖诱导GMCs来源外泌体对足细胞上TGFβ1R表达的影响第46-47页
    4.6 BBR改善高糖诱导GMCs来源外泌体对足细胞的损伤可能与TGFβ1R-PI3K/AKT信号通路相关第47-52页
        4.6.1 siRNA转染对TGFβ1在GMCs中表达水平的影响第47页
        4.6.2 BBR对TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体上TGFβ1水平的影响第47页
        4.6.3 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体下调足细胞凋亡率第47-48页
        4.6.4 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞黏附能力第48页
        4.6.5 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞上nephrin,podocin和WT-1蛋白表达第48页
        4.6.6 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体下调足细胞上PI3K,P-AKT,P-P65,TGFβ1R蛋白表达第48-52页
5 讨论第52-54页
6 结论第54页
参考文献第54-60页
附录第60-62页
致谢第62-64页
综述:尿液来源的外泌体作为糖尿病肾病诊断标志物的研究进展第64-72页
    参考文献第69-72页

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