英文缩略词对照表(Abbreviation) | 第8-10页 |
摘要 | 第10-15页 |
Abstract | 第15-21页 |
1 前言 | 第22-26页 |
2 材料与仪器 | 第26-31页 |
2.1 实验细胞 | 第26-27页 |
2.2 化学药品和试剂 | 第27-29页 |
2.3 小檗碱(BBR)的制备 | 第29-30页 |
2.4 仪器与设备 | 第30-31页 |
3 实验方法 | 第31-39页 |
3.1 肾小球系膜细胞(GMCs)的培养和分组 | 第31页 |
3.2 GMCs的转染 | 第31-32页 |
3.3 足细胞的培养和分组 | 第32-33页 |
3.4 GMCs与足细胞的共培养 | 第33页 |
3.5 外泌体的的分离 | 第33-34页 |
3.6 外泌体的鉴定和摄取 | 第34-35页 |
3.6.1 外泌体的标志蛋白鉴定 | 第34页 |
3.6.2 外泌体的电镜鉴定 | 第34页 |
3.6.3 外泌体的粒径鉴定 | 第34-35页 |
3.6.4 外泌体的摄取鉴定 | 第35页 |
3.7 CCK-8 | 第35-36页 |
3.8 细胞凋亡 | 第36页 |
3.9 免疫荧光实验 | 第36-37页 |
3.10 细胞黏附实验 | 第37页 |
3.11 Westernblot检测 | 第37-38页 |
3.12 ELISA检测 | 第38页 |
3.13 数据分析 | 第38-39页 |
4 实验结果 | 第39-52页 |
4.1 BBR对GMCs增殖的影响 | 第39-40页 |
4.2 GMCs来源外泌体的鉴定 | 第40-42页 |
4.2.1 WesternBlot法检测外泌体标志蛋白 | 第40页 |
4.2.2 透射电镜观察外泌体的形态 | 第40页 |
4.2.3 外泌体粒径分析 | 第40页 |
4.2.4 外泌体被足细胞摄取 | 第40-42页 |
4.3 高糖诱导GMCs来源的外泌体参与足细胞功能的损伤 | 第42-44页 |
4.3.1 高糖诱导GMCs来源的外泌体促进足细胞凋亡 | 第42页 |
4.3.2 高糖诱导GMCs来源的外泌体降低足细胞黏附能力 | 第42-43页 |
4.3.3 高糖诱导GMCs来源的外泌体降低足细胞上nephrin,podocin和WT-1蛋白表达 | 第43-44页 |
4.4 BBR改善高糖诱导GMCs来源外泌体对足细胞功能的损伤 | 第44-46页 |
4.4.1 BBR作用高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞上nephrin,podocin和WT-1蛋白表达 | 第44页 |
4.4.2 BBR作用高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞黏附能力 | 第44-45页 |
4.4.3 BBR作用高糖诱导GMCs来源的外泌体下调足细胞凋亡率 | 第45-46页 |
4.5 BBR作用于高糖诱导GMCs来源外泌体对足细胞上TGFβ1R表达的影响 | 第46-47页 |
4.6 BBR改善高糖诱导GMCs来源外泌体对足细胞的损伤可能与TGFβ1R-PI3K/AKT信号通路相关 | 第47-52页 |
4.6.1 siRNA转染对TGFβ1在GMCs中表达水平的影响 | 第47页 |
4.6.2 BBR对TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体上TGFβ1水平的影响 | 第47页 |
4.6.3 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体下调足细胞凋亡率 | 第47-48页 |
4.6.4 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞黏附能力 | 第48页 |
4.6.5 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体上调足细胞上nephrin,podocin和WT-1蛋白表达 | 第48页 |
4.6.6 TGFβ1siRNA刺激高糖诱导GMCs来源的外泌体下调足细胞上PI3K,P-AKT,P-P65,TGFβ1R蛋白表达 | 第48-52页 |
5 讨论 | 第52-54页 |
6 结论 | 第54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
综述:尿液来源的外泌体作为糖尿病肾病诊断标志物的研究进展 | 第64-72页 |
参考文献 | 第69-72页 |