| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1. 前言 | 第15-29页 |
| 1.1 鹅细小病毒病原学 | 第15-17页 |
| 1.1.1 鹅细小病毒的形态结构及分类 | 第15页 |
| 1.1.2 鹅细小病毒的理化特性 | 第15-16页 |
| 1.1.3 鹅细小病毒的培养特性 | 第16页 |
| 1.1.4 鹅细小病毒的分子生物学特征 | 第16-17页 |
| 1.2 鹅细小病毒病的流行病学特征 | 第17-18页 |
| 1.3 临床症状及病理变化 | 第18页 |
| 1.4 鹅细小病毒的诊断方法 | 第18-23页 |
| 1.4.1 鹅细小病毒免疫学诊断方法 | 第19-21页 |
| 1.4.1.1 凝集试验 | 第19页 |
| 1.4.1.2 琼脂扩散试验 | 第19页 |
| 1.4.1.3 酶联免疫吸附试验 | 第19-21页 |
| 1.4.2 鹅细小病毒分子生物学诊断方法 | 第21-23页 |
| 1.4.2.1 核酸探针技术 | 第21页 |
| 1.4.2.2 PCR技术 | 第21-22页 |
| 1.4.2.3 环介导等温扩增(LAMP)技术 | 第22-23页 |
| 1.5 鹅细小病毒病的防制 | 第23页 |
| 1.6 单克隆抗体研究进展 | 第23-25页 |
| 1.6.1 抗鹅细小病毒单克隆抗体发展现状 | 第24页 |
| 1.6.2 单克隆抗体在疾病治疗中的应用 | 第24-25页 |
| 1.7 免疫胶体金技术研究进展 | 第25-27页 |
| 1.7.1 胶体金检测试纸条的基本构造 | 第26页 |
| 1.7.2 胶体金免疫层析技术在禽病检测中的应用 | 第26-27页 |
| 1.7.3 胶体金免疫层析技术的发展趋势 | 第27页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-39页 |
| 2.1 材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 病毒、细胞及及实验动物 | 第29页 |
| 2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第29页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第29-30页 |
| 2.1.4 主要设备及仪器 | 第30页 |
| 2.2 鹅细小病毒单克隆抗体的制备 | 第30-36页 |
| 2.2.1 鹅细小病毒抗原的制备与纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.2 鹅细小病毒抗原对小鼠的免疫 | 第31页 |
| 2.2.3 间接ELISA方法的建立 | 第31-32页 |
| 2.2.3.1 间接ELISA基本步骤 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 抗原和血清最佳稀释度的确定 | 第32页 |
| 2.2.4 杂交瘤细胞株的建立 | 第32-34页 |
| 2.2.4.1 骨髓瘤细胞SP2/0的准备 | 第32页 |
| 2.2.4.2 饲养细胞的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.4.3 脾细胞的制备 | 第33页 |
| 2.2.4.4 细胞融合 | 第33页 |
| 2.2.4.5 单克隆抗体的筛选和杂交瘤细胞的克隆化 | 第33-34页 |
| 2.2.5 腹水诱导制备 | 第34页 |
| 2.2.6 单克隆抗体效价测定 | 第34页 |
| 2.2.7 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.8 间接免疫荧光(IFA)试验 | 第35页 |
| 2.2.9 单克隆抗体的特异性检验 | 第35页 |
| 2.2.10 杂交瘤细胞的稳定性检测 | 第35-36页 |
| 2.2.11 腹水IgG的纯化 | 第36页 |
| 2.3 鹅细小病毒胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立 | 第36-39页 |
| 2.3.1 鹅细小病毒VP3蛋白多克隆抗体的制备 | 第36页 |
| 2.3.2 胶体金的制备 | 第36-37页 |
| 2.3.3 胶体金与单克隆抗体结合的最佳浓度确定 | 第37页 |
| 2.3.4 免疫胶体金的制备 | 第37页 |
| 2.3.5 胶体金试纸条的组装 | 第37页 |
| 2.3.6 试纸条的结果判定方法和试纸条有效性检测 | 第37-38页 |
| 2.3.7 胶体金试纸条性能评价试验 | 第38页 |
| 2.3.7.1 敏感性试验 | 第38页 |
| 2.3.7.2 特异性试验 | 第38页 |
| 2.3.7.3 稳定性试验 | 第38页 |
| 2.3.8 临床样本的检测 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-46页 |
| 3.1 GPV抗原的制备和纯化效果鉴定结果 | 第39页 |
| 3.2 鹅细小病毒单克隆抗体的制备 | 第39-42页 |
| 3.2.1 间接ELISA方法建立结果 | 第39-40页 |
| 3.2.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第40页 |
| 3.2.3 单克隆抗体的亚类鉴定与效价测定结果 | 第40页 |
| 3.2.4 间接免疫荧光试验结果 | 第40-41页 |
| 3.2.5 单抗特异性鉴定结果 | 第41页 |
| 3.2.6 单抗稳定性鉴定结果 | 第41页 |
| 3.2.7 纯化腹水的浓度检测结果 | 第41-42页 |
| 3.3 免疫胶体金的制备 | 第42-43页 |
| 3.3.1 鹅细小病毒VP3蛋白多克隆制备 | 第42页 |
| 3.3.2 胶体金颗粒的制备 | 第42-43页 |
| 3.3.3 单抗与胶体金最佳结合浓度的确定 | 第43页 |
| 3.3.4 胶体金试纸条对标准阳性及阴性样品的检测结果 | 第43页 |
| 3.4 胶体金试纸条性能评价试验结果 | 第43-45页 |
| 3.4.1 试纸条敏感性鉴定结果 | 第44页 |
| 3.4.2 试纸条特异性鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.4.3 试纸条稳定性鉴定结果 | 第45页 |
| 3.5 临床样品的检测结果 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 鹅细小病毒单克隆抗体的制备及鉴定 | 第46-48页 |
| 4.2 鹅细小病毒胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 在读硕士期间取得的主要学术成就 | 第60页 |
