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长链非编码RNA HOTAIR调节MKL1影响细胞迁移与侵袭能力

摘要第4-5页
Abstract第5页
1.前言第8-10页
2.实验材料与方法第10-34页
    2.1 实验质粒与细胞第10-16页
        2.1.1 细胞培养第10页
        2.1.2 分子生物实验相关试剂第10-13页
        2.1.3 细胞生物相关实验材料及试剂配制第13-14页
        2.1.4 WesternBlot蛋白分析相关材料及试剂配制第14-16页
        2.1.5 质粒转染材料及试剂配制第16页
    2.2 实验仪器与设备第16-17页
    2.3 实验方法第17-34页
        2.3.1 感受态细胞制备第17-18页
        2.3.2 酶切连接反应第18-19页
        2.3.3 质粒转化第19页
        2.3.4 质粒抽提第19-21页
        2.3.5 细胞培养第21页
        2.3.6 质粒转染第21-22页
        2.3.7 基因组PCR扩增第22-24页
        2.3.8 RNA检测第24-26页
        2.3.9 WesternBlotting第26-27页
        2.3.10 荧光素酶报告分析(LuciferaseAssay)第27-28页
        2.3.11 染色质免疫沉淀(ChIP)第28-29页
        2.3.12 伤口愈合实验第29页
        2.3.13 Transwell侵袭实验第29-30页
        2.3.14 HE染色第30-31页
        2.3.15 RNA荧光原位杂交(RNA-FISH)第31页
        2.3.16 CRISPR/Cas9技术第31-34页
3.实验结果第34-42页
    3.1 敲降HOTAIR减少MKL1蛋白表达第34页
    3.2 过表达MKL1促进HeLa细胞的侵袭与迁移第34-35页
    3.3 敲降HOTAIR和MKL1能协同抑制细胞迁移和侵袭第35-37页
    3.4 敲除MKL1降低细胞迁移和侵袭能力第37-38页
    3.5 宫颈癌患者中高水平的HOTAIR与MKL1表达呈正相关第38-40页
    3.6 MKL1/SRF结合HOTAIR启动子区CArGbox激活其转录第40-42页
4.结论第42-43页
5.讨论与展望第43-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-54页
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文第54-55页
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目第55页

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