英文缩略词表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-30页 |
2.1 材料 | 第15-17页 |
2.2 方法 | 第17-29页 |
2.2.1 溶液配制 | 第17-19页 |
2.2.2 肺炎支原体的收集培养 | 第19-20页 |
2.2.3 P116-609基因引物设计与合成 | 第20页 |
2.2.4 P116-609目的基因的扩增 | 第20-21页 |
2.2.5 T-P116-609和pQE80-L-P116-609重组质粒的构建 | 第21页 |
2.2.6 目的蛋白表达及纯化 | 第21-23页 |
2.2.6.1 pQE80-L-rP116-609重组质粒菌的复苏 | 第21页 |
2.2.6.2 复苏好的细菌转种 | 第21-22页 |
2.2.6.3 转化菌的诱导表达 | 第22页 |
2.2.6.4 目的蛋白的表达情况鉴定 | 第22页 |
2.2.6.5 P116-609蛋白的大量表达 | 第22页 |
2.2.6.6 目的蛋白表达形式分析 | 第22-23页 |
2.2.6.7 目的蛋白的纯化 | 第23页 |
2.2.7 蛋白样品纯化情况分析与其含量的检测 | 第23-24页 |
2.2.8 目的蛋白免疫反应性的Westernblot法分析 | 第24-27页 |
2.2.9 酶联免疫吸附法(ELISA)检测可疑MP感染病人血清方法的建立 | 第27-29页 |
2.2.9.1 构建原理 | 第27页 |
2.2.9.2 标本的收集 | 第27页 |
2.2.9.3 操作步骤 | 第27-29页 |
2.2.9.4 ELISA方法的优化 | 第29页 |
2.3 P116-609特异蛋白的多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-35页 |
3.1 MP(FH,ATCC15531)标准菌株和临床菌株的培养 | 第30页 |
3.2 MP阳性培养液的鉴定 | 第30-31页 |
3.3 MP特异蛋白P116-609基因片段的PCR扩增 | 第31-32页 |
3.4 构建的T-P116-609和pQE80-L-P116-609重组质粒的鉴定 | 第32页 |
3.5 P116-609目的蛋白的表达及纯化 | 第32-33页 |
3.6 纯化后的P116-609蛋白的免疫反应性检测 | 第33-34页 |
3.7 酶联免疫吸附法(ELISA)检测收集的血清标本 | 第34页 |
3.8 抗P116-609蛋白多克隆抗体效价测定 | 第34-35页 |
3.9 制备的多克隆抗体与特异抗原的免疫印迹反应 | 第35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
5 结论 | 第38页 |
6 参考文献 | 第38-43页 |
附录 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
综述 | 第45-50页 |
参考文献 | 第48-50页 |