致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词 | 第10-12页 |
目次 | 第12-17页 |
绪论 | 第17-24页 |
1. 第一章 种子细胞ADSCs的分离、培养和鉴定 | 第24-40页 |
1.1. 引言 | 第24-26页 |
1.2. 实验室试剂与仪器 | 第26-28页 |
1.2.1 材料和试剂 | 第26页 |
1.2.2 实验仪器及材料 | 第26-27页 |
1.2.3 相关溶液的配置 | 第27-28页 |
1.3. 实验方法 | 第28-33页 |
1.3.1 大鼠ADSCs的分离和培养 | 第28-29页 |
1.3.2 胞冻存 | 第29页 |
1.3.3 胞复苏 | 第29-30页 |
1.3.4 胞增殖能力检测 | 第30页 |
1.3.5 大鼠ADSCs鉴定 | 第30-32页 |
1.3.6 组织学检测及评价 | 第32-33页 |
1.4. 实验结果 | 第33-36页 |
1.4.1 ADSCs的分离 | 第33-34页 |
1.4.2 ADSCs体外增殖能力 | 第34-35页 |
1.4.3 ADSCs的克隆形成能力鉴定 | 第35页 |
1.4.4 ADSCs的表面标志物鉴定 | 第35-36页 |
1.4.5 ADSCs的三系分化能力鉴定 | 第36页 |
1.5. 讨论 | 第36-40页 |
2. 第二章 丝素蛋白微球的制备和生物安全性评价 | 第40-52页 |
2.1. 引言 | 第40-41页 |
2.2. 实验试剂与仪器 | 第41-42页 |
2.2.1. 材料和试剂 | 第41页 |
2.2.2. 实验仪器及材料 | 第41-42页 |
2.2.3. 相关溶液的配置 | 第42页 |
2.3. 实验方法 | 第42-46页 |
2.3.1. 丝素蛋白微球制备 | 第42-43页 |
2.3.2. 扫描电镜观察丝素蛋白微球形态 | 第43-44页 |
2.3.3. 红外吸收光谱测定 | 第44页 |
2.3.4. 体外检测丝素蛋白微球细胞毒性 | 第44-45页 |
2.3.5. 体内检测丝素蛋白微球降解率 | 第45-46页 |
2.4. 实验结果 | 第46-49页 |
2.4.1. 扫描电子显微镜形态观察 | 第46页 |
2.4.2. 红外吸收光谱(FTIR)分析 | 第46-47页 |
2.4.3. 丝素蛋白微球材料体外细胞毒性检测 | 第47-48页 |
2.4.4. 丝素蛋白微球体内降解实验 | 第48-49页 |
2.5. 讨论 | 第49-52页 |
3. 第三章 尿道组织工程填充剂的体外构建和评价 | 第52-60页 |
3.1. 引言 | 第52-53页 |
3.2. 实验试剂与仪器 | 第53-54页 |
3.2.1. 材料和试剂 | 第53页 |
3.2.2. 实验仪器 | 第53页 |
3.2.3. 相关溶液、试剂的配置 | 第53-54页 |
3.3. 实验方法 | 第54-55页 |
3.3.1. 丝素蛋白微球浸提 | 第54页 |
3.3.2. 丝素蛋白微球与ADSCs共培养 | 第54页 |
3.3.3. 收集可注射的组织工程填充剂 | 第54页 |
3.3.4. 细胞免疫荧光 | 第54-55页 |
3.3.5. 扫描电镜 | 第55页 |
3.3.6. 激光共聚焦显微镜三维重建 | 第55页 |
3.4. 实验结果 | 第55-58页 |
3.4.1. 组织工程填充剂荧光染色 | 第55-56页 |
3.4.2. 组织工程填充剂的扫描电镜图像 | 第56-57页 |
3.4.3. 激光共聚焦显微镜三维重建 | 第57-58页 |
3.5. 讨论 | 第58-60页 |
4. 第四章 大鼠ISD模型的建立和评估 | 第60-68页 |
4.1. 引言 | 第60页 |
4.2. 实验试剂与仪器 | 第60-61页 |
4.2.1. 材料和试剂 | 第60-61页 |
4.2.2. 实验仪器 | 第61页 |
4.2.3. 相关溶液的配置 | 第61页 |
4.2.4. 其余试剂溶剂 | 第61页 |
4.3. 实验方法 | 第61-64页 |
4.3.1. 动物分组 | 第61页 |
4.3.2. 双侧阴部神经截断术(PNT)建立大鼠ISD模型 | 第61-62页 |
4.3.3. 观察指标 | 第62页 |
4.3.4. 术后模型评判 | 第62页 |
4.3.5. 大鼠漏尿点压力(LPP)测定 | 第62-63页 |
4.3.6. 组织学染色 | 第63-64页 |
4.3.7. 尿道管腔面积定量统计 | 第64页 |
4.4. 实验结果 | 第64-66页 |
4.4.1. 尿道内括约肌功能障碍型尿失禁(ISD)动物模型尿流动力学评估 | 第64-65页 |
4.4.2. 尿道内括约肌功能障碍型尿失禁(ISD)动物模型组织学评估 | 第65页 |
4.4.3. 尿道内括约肌功能障碍型尿失禁(ISD)动物模型评估定量 | 第65-66页 |
4.5. 讨论 | 第66-68页 |
5. 第五章尿道组织工程填充剂治疗ISD大鼠的功效和机制研究 | 第68-81页 |
5.1. 引言 | 第68-70页 |
5.2. 实验试剂与仪器 | 第70页 |
5.2.1. 材料和试剂 | 第70页 |
5.2.2. 实验仪器及材料 | 第70页 |
5.2.3. 相关溶液的配置 | 第70页 |
5.2.4. 其余试剂溶剂 | 第70页 |
5.3. 实验方法 | 第70-73页 |
5.3.1. 动物分组 | 第70-71页 |
5.3.2. 组织工程填充材料注射前准备 | 第71页 |
5.3.3. 尿道周围注射填充剂 | 第71页 |
5.3.4. 术后观察指标 | 第71-72页 |
5.3.5. 修复观察指标 | 第72页 |
5.3.6. Dil细胞预染色 | 第72页 |
5.3.7. 免疫组织化学 | 第72-73页 |
5.3.8. 统计学分析 | 第73页 |
5.3.9. 其余方法同第一章 | 第73页 |
5.4. 实验结果 | 第73-78页 |
5.4.1. 尿道组织工程填充剂移植后体内追踪监测 | 第73-74页 |
5.4.2. 尿道组织工程填充剂移植后不同时间点尿道组织学评估 | 第74-75页 |
5.4.3. 尿道组织工程填充刹移植后不同时间点功能学评估及组织学定量比较 | 第75-77页 |
5.4.4. 尿道组织工程填充剂移植后不同时间尿道周围组织再生评估 | 第77-78页 |
5.5. 讨论 | 第78-81页 |
总结 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-92页 |
综述 | 第92-106页 |
参考文献 | 第100-106页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第106-108页 |