| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-15页 |
| 1.1 骨肉瘤的特点与现状 | 第11-13页 |
| 1.1.1 骨肉瘤的特征 | 第11页 |
| 1.1.2 骨肉瘤的临床特点及预后 | 第11-12页 |
| 1.1.3 骨肉瘤的临床治疗现状 | 第12-13页 |
| 1.2 RIPK4基因的功能 | 第13-15页 |
| 1.2.1 RIPK4基因概述 | 第13页 |
| 1.2.2 RIPK4基因在正常组织中的生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 RIPK4与肿瘤之间的关系 | 第14页 |
| 1.2.4 RIPK4与细胞通路的关系 | 第14-15页 |
| 第二章 下调RIPK4基因表达增强TNF-α诱导细胞凋亡的敏感性 | 第15-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 细胞系来源 | 第15页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 配制相关实验溶液 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.2.1 细胞培养及传代 | 第18页 |
| 2.2.2 冻存和复苏细胞 | 第18-19页 |
| 2.2.3 细胞的siRNA转染 | 第19-20页 |
| 2.2.4 蛋白质印迹法检测MG-63细胞中RIPK4蛋白的表达情况 | 第20-21页 |
| 2.2.5 Hoechst33258染色法观察细胞凋亡 | 第21页 |
| 2.2.6 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)法检测MG-63细胞增殖 | 第21页 |
| 2.2.7 蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达 | 第21-22页 |
| 2.2.8 统计学方法 | 第22页 |
| 2.3 实验结果 | 第22-26页 |
| 2.3.1 RIPK4-siRNA下调MG-63细胞中RIPK4蛋白的表达 | 第22页 |
| 2.3.2 沉默RIPK4基因表达可抑制MG-63细胞增殖 | 第22-24页 |
| 2.3.3 沉默RIPK4基因表达以及联合TNF-α对MG-63细胞凋亡的影响 | 第24页 |
| 2.3.4 沉默RIPK4基因表达以及联合TNF-α对MG-63细胞中Bax、Bcl-xL及caspase-3蛋白表达的影响 | 第24-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-29页 |
| 第三章 RIPK4可能通过抑制AKT/mTOR/GSK3/NF-κB信号通路调控骨肉瘤MG-63细胞的增值和凋亡 | 第29-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 3.1.1 细胞系来源 | 第29页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 细胞复苏、培养与传代 | 第31页 |
| 3.2.2 细胞siRNA转染 | 第31-32页 |
| 3.2.3 免疫荧光染色法初步观察下调RIPK4基因后骨肉瘤细胞中PI3K、AKT、mTOR及NF-κB蛋白的表达情况 | 第32页 |
| 3.2.4 蛋白质印迹法检测细胞中PI3K、AKT、mTOR、GSK3β及NF-κB蛋白的表达情况 | 第32-33页 |
| 3.2.5 蛋白质印迹法检测细胞周期调控蛋白p21、p53和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bad的表达 | 第33页 |
| 3.2.6 统计学方法 | 第33页 |
| 3.3 结果 | 第33-36页 |
| 3.3.1 RIPK4-siRNA下调MG-63细胞中AKT、mTOR蛋白的表达并上调NF-κB蛋白在细胞核中的表达 | 第33-34页 |
| 3.3.2 RIPK4-siRNA影响AKT/mTOR/GSK3β/NF-κB信号通路相关蛋白的表达 | 第34-35页 |
| 3.3.3 RIPK4-siRNA可能通过AKT/mTOR/GSK3β/NF-κB信号通路调控骨肉瘤MG-63细胞的增值和凋亡 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-39页 |
| 第四章 结论 | 第39-40页 |
| 4.1 主要结论 | 第39页 |
| 4.2 研究展望 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 英文缩略词 | 第45-47页 |
| 在学期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
