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洞庭湖区猪乙型脑炎病毒(JEV)分离、鉴定及流行病学研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第11-25页
    1.1 乙型脑炎病毒第11-19页
        1.1.1 JEV的分类地位第11-12页
        1.1.2 JEV形态、理化及生物特性第12页
        1.1.3 JE流行病学第12-14页
        1.1.4 JEV致病机理第14页
        1.1.5 JE临床症状第14-15页
        1.1.6 JE病理变化第15页
        1.1.7 JE的诊断第15-17页
        1.1.8 JEV疫苗研究第17-19页
        1.1.9 JE的治疗第19页
    1.2 JEV基因组及其编码蛋白的功能第19-21页
        1.2.1 JEV基因组结构第19页
        1.2.2 JEV基因组的非编码区(UTR)的功能第19-20页
        1.2.3 JEV结构蛋白及其功能第20页
        1.2.4 JEV非结构蛋白及其功能第20-21页
    1.3 JEV基因组主要编码蛋白及其ELISA方法研究进展第21-23页
    1.4 研究目的与意义第23-25页
第二章 生猪乙型脑炎抗体消长规律及病毒核酸检测第25-33页
    2.1 材料与方法第25-27页
    2.2 结果第27-31页
        2.2.1 样品采集第27-28页
        2.2.2 24头仔猪跟踪血清JEV抗体结果第28-29页
        2.2.3 临床样品中JEV检测第29-31页
    2.3 分析与讨论第31-32页
    2.4 小结第32-33页
第三章 洞庭湖区乙型脑炎病毒的分离鉴定及E基因序列分析第33-57页
    3.1 材料与方法第33-41页
    3.2 结果第41-54页
        3.2.1 JEV阳性样品选择第41页
        3.2.2 JEV分离结果第41页
        3.2.3 细胞培养物的RT-PCR鉴定第41-42页
        3.2.4 分离株E基因的扩增及其构建的质粒鉴定第42-43页
        3.2.5 新分离株基于prM基因遗传分析结果第43-44页
        3.2.6 新分离株基于E基因遗传分析结果第44-45页
        3.2.7 E基因核苷酸序列差异分析第45-48页
        3.2.8 E基因推导氨基酸差异位点分析第48-50页
        3.2.9 JEVE基因序列编码蛋白一级结构分析第50-52页
        3.2.10 JEV新分离株接种乳鼠结果第52-53页
        3.2.11 间接免疫荧光第53-54页
        3.2.12 TCID50测定结果第54页
        3.2.13 电镜结果第54页
    3.3 分析与讨论第54-56页
    3.4 小结第56-57页
第四章 JEVHNML1株E蛋白结构域Ⅲ原核表达及免疫原性研究第57-69页
    4.1 材料与方法第57-62页
    4.2 结果第62-66页
        4.2.1 JEV-EDⅢ基因的PCR扩增及其重组质粒的鉴定第62-63页
        4.2.2 HNML1株EDIII重组蛋白的诱导表达、纯化、Westernblot分析第63页
        4.2.3 纯化后EDⅢ蛋白浓度测定结果第63-64页
        4.2.4 EDⅢ蛋白免疫小鼠后ELISA检测第64-65页
        4.2.5 IFA方法测鼠抗EDⅢ蛋白血清第65页
        4.2.6 小鼠血清中和试验第65-66页
    4.3 分析与讨论第66-67页
    4.4 小结第67-69页
第五章 基于JEVEDⅢ蛋白IgG与IgM间接ELISA检测方法建立及应用第69-93页
    5.1 材料和方法第69-73页
    5.2 结果第73-88页
        5.2.1 HNML1株EDⅢ重组蛋白第73页
        5.2.2 纯化后EDⅢ蛋白浓度测定结果第73页
        5.2.3 ELISA检测方法的确定第73-79页
        5.2.4 临床试验猪的JEV(IgG)抗体跟踪检测结果第79-84页
        5.2.5 临床试验猪的JEV(IgM)抗体跟踪检测结果第84-88页
    5.3 分析与讨论第88-90页
    5.4 小结第90-93页
全文结论与创新点第93-95页
参考文献第95-109页
附录一:缩略词对照表第109-111页
附录二:2015年跟踪采血记录表第111-113页
附录三:2015年猪场蚊子采集记录表第113-114页
附录四:2015年疑似JE仔猪脑组织样品采集表第114-116页
致谢第116-117页
个人简介第117页

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