摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
1 引言 | 第15-31页 |
1.1 向日葵概况 | 第15页 |
1.2 植物耐盐调控机制 | 第15-23页 |
1.2.1 植物耐盐调控的生理生化机制 | 第16-17页 |
1.2.2 植物耐盐调控的分子机制 | 第17-23页 |
1.3 非损伤微测技术在植物生理学应用研究进展 | 第23-25页 |
1.3.1 非损伤微测技术在植物生理学上应用的优势 | 第23页 |
1.3.2 非损伤微测技术在盐胁迫下植物细胞离子流变化研究进展 | 第23-25页 |
1.4 高通量测序在基因挖掘上的应用 | 第25-27页 |
1.4.1 测序技术的发展 | 第25-26页 |
1.4.2 基于转录组测序的基因克隆的研究进展 | 第26-27页 |
1.5 向日葵耐盐相关研究进展 | 第27-28页 |
1.6 本研究的内容与目的意义 | 第28-31页 |
1.6.1 本研究的内容 | 第28-29页 |
1.6.2 本研究的目的意义 | 第29-30页 |
1.6.3 本研究总体技术路线 | 第30-31页 |
2 油葵杂交种苗期耐盐性鉴定及对盐胁迫的生理响应 | 第31-43页 |
2.1 试验材料 | 第31-32页 |
2.1.1 植物材料 | 第31页 |
2.1.2 主要试剂 | 第31页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第31页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第31-32页 |
2.2 试验方法 | 第32-33页 |
2.2.1 材料培养 | 第32页 |
2.2.2 土培NaCl胁迫处理 | 第32页 |
2.2.3 水培NaCl胁迫处理 | 第32页 |
2.2.4 杂交种耐盐性鉴定 | 第32-33页 |
2.2.5 生理生化指标测定 | 第33页 |
2.2.6 统计分析 | 第33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-40页 |
2.3.1 土培NaCl胁迫处理油葵杂交种耐盐性比较 | 第34页 |
2.3.2 水培NaCl胁迫处理油葵杂交种耐盐性比较 | 第34-35页 |
2.3.3 油葵杂交种NaCl胁迫方法与浓度效应比较 | 第35页 |
2.3.4 油葵杂交种苗期耐盐性鉴定 | 第35页 |
2.3.5 不同浓度NaCl胁迫处理对向日葵苗期耐盐性生理生化指标的影响.. | 第35-39页 |
2.3.6 不同浓度 NaCl 胁迫处理 P50 和 P29 各项生理指标间的差异显著性分析 | 第39-40页 |
2.4 结论与讨论 | 第40-42页 |
2.4.1 耐盐性鉴定评价方法的选择 | 第40页 |
2.4.2 向日葵耐盐性鉴定生理生化指标的选择 | 第40-41页 |
2.4.3 向日葵品种苗期耐盐性差异 | 第41-42页 |
2.5 小结 | 第42-43页 |
3 向日葵离子转运的耐盐性生理机制 | 第43-51页 |
3.1 试验材料 | 第43页 |
3.1.1 植物材料 | 第43页 |
3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第43页 |
3.2 试验方法 | 第43-45页 |
3.2.1 试验材料处理 | 第44页 |
3.2.2 离子流测定 | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-46页 |
3.3.1 盐胁迫条件下向日葵根尖Na~+流的变化 | 第45页 |
3.3.2 盐胁迫条件下向日葵根尖K~+流的变化 | 第45-46页 |
3.3.3 盐胁迫条件下向日葵根尖H~+流的变化 | 第46页 |
3.4 结论与讨论 | 第46-50页 |
3.4.1 非损伤微测技术测定离子流根尖部位和测定时间的选择 | 第46-47页 |
3.4.2 盐胁迫对向日葵幼苗根系Na~+和K~+吸收的影响 | 第47-49页 |
3.4.3 盐胁迫对向日葵幼苗根系Na~+和H~+吸收的影响 | 第49-50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
4 向日葵响应盐胁迫差异表达基因的筛选 | 第51-68页 |
4.1 试验材料 | 第52-53页 |
4.1.1 表达谱测序数据及样品 | 第52页 |
4.1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第53页 |
4.2 试验方法 | 第53-57页 |
4.2.1 DEGs的筛选与分析 | 第53页 |
4.2.2 向日葵响应盐胁迫关键DEGs的筛选 | 第53-54页 |
4.2.3 向日葵响应盐胁迫关键基因的GO功能注释和KEGG通路分析 | 第54页 |
4.2.4 盐胁迫向日葵DGE测序数据的qPCR验证 | 第54-57页 |
4.3 结果与分析 | 第57-65页 |
4.3.1 差异表达基因的筛选 | 第57-58页 |
4.3.2 向日葵响应盐胁迫关键基因的筛选 | 第58-61页 |
4.3.3 向日葵响应盐胁迫关键基因的GO功能注释和KEGG通路分析 | 第61-63页 |
4.3.4 qPCR验证 | 第63-65页 |
4.4 结论与讨论 | 第65-66页 |
4.4.1 利用转录组与表达谱结合筛选差异表达基因 | 第65-66页 |
4.4.2 向日葵响应盐胁迫关键基因的筛选 | 第66页 |
4.5 小结 | 第66-68页 |
5 向日葵V-ATPasea3亚基基因V-ATPasea3的克隆及表达分析 | 第68-87页 |
5.1 试验材料 | 第68-69页 |
5.1.1 植物材料 | 第68页 |
5.1.2 主要试剂 | 第68-69页 |
5.1.3 主要试剂配制 | 第69页 |
5.1.4 主要仪器设备 | 第69页 |
5.2 试验方法 | 第69-76页 |
5.2.1 试验材料处理 | 第69-70页 |
5.2.2 引物设计与合成 | 第70页 |
5.2.3 总RNA的提取及cDNA合成 | 第70页 |
5.2.4 V-ATPasea3的cDNA已知序列验证 | 第70-72页 |
5.2.5 V-ATPasea3的全长cDNA克隆 | 第72-75页 |
5.2.6 V-ATPasea3cDNA开放阅读框克隆 | 第75-76页 |
5.2.7 V-ATPasea3的生物信息学分析 | 第76页 |
5.2.8 V-ATPasea3的表达分析 | 第76页 |
5.3 结果与分析 | 第76-84页 |
5.3.1 V-ATPasea3cDNA已知序列验证 | 第76-77页 |
5.3.2 V-ATPasea3cDNA全长序列的克隆 | 第77-78页 |
5.3.3 V-ATPasea3cDNA的生物信息学分析 | 第78-81页 |
5.3.4 V-ATPasea3的表达分析 | 第81-84页 |
5.4 结论与讨论 | 第84-86页 |
5.4.1 V-ATPasea3扩增模板的选择 | 第84-85页 |
5.4.2 V-ATPase与植物耐盐性 | 第85页 |
5.4.3 V-ATPasea亚基基因在植物抗盐中的作用 | 第85页 |
5.4.4 V-ATPasea3响应非生物胁迫的表达模式 | 第85-86页 |
5.5 小结 | 第86-87页 |
6 向日葵E3泛素连接酶基因HERC2的克隆及亚细胞定位 | 第87-102页 |
6.1 试验材料 | 第87-88页 |
6.1.1 植物材料 | 第87-88页 |
6.1.2 主要试剂 | 第88页 |
6.1.3 主要试剂配制 | 第88页 |
6.1.4 主要仪器设备 | 第88页 |
6.2 试验方法 | 第88-93页 |
6.2.1 试验材料的处理 | 第88页 |
6.2.2 引物设计与合成 | 第88-89页 |
6.2.3 HERC2cDNA和gDNA开放阅读框的克隆 | 第89-90页 |
6.2.4 HERC2亚细胞定位 | 第90-93页 |
6.3 结果与分析 | 第93-99页 |
6.3.1 HERC2cDNA和gDNA开放阅读框克隆 | 第93-94页 |
6.3.2 HERC2cDNA和gDNA序列的生物信息学分析 | 第94-98页 |
6.3.3 HERC2瞬时表达载体载体的构建 | 第98-99页 |
6.3.4 HERC2亚细胞定位观察结果 | 第99页 |
6.4 结论与讨论 | 第99-101页 |
6.4.1 HERC2的克隆依据 | 第100页 |
6.4.2 E3泛素连接酶与向日葵耐盐性 | 第100页 |
6.4.3 融合报告基因的蛋白质亚细胞定位 | 第100-101页 |
6.5 小结 | 第101-102页 |
7 HERC2的表达分析及功能验证 | 第102-117页 |
7.1 试验材料 | 第102-103页 |
7.1.1 植物材料 | 第102页 |
7.1.2 菌株和质粒 | 第102-103页 |
7.1.3 主要试剂和仪器设备 | 第103页 |
7.1.4 主要试剂配制 | 第103页 |
7.2 试验方法 | 第103-107页 |
7.2.1 引物设计与合成 | 第103-104页 |
7.2.2 HERC2的表达分析 | 第104页 |
7.2.3 HERC2植物表达载体构建 | 第104-105页 |
7.2.4 HERC2的功能验证 | 第105-107页 |
7.3 结果与分析 | 第107-114页 |
7.3.1 HERC2的表达分析 | 第107-110页 |
7.3.2 HERC2植物表达载体的构建 | 第110-112页 |
7.3.3 HERC2的功能验证 | 第112-114页 |
7.4 结论与讨论 | 第114-116页 |
7.4.1 向日葵HERC2响应非生物胁迫的表达 | 第115页 |
7.4.2 E3泛素连接酶与植物抗逆性 | 第115-116页 |
7.5 小结 | 第116-117页 |
8 结论与展望 | 第117-121页 |
8.1 结论 | 第117-119页 |
8.2 创新点 | 第119页 |
8.3 工作展望 | 第119-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-137页 |
作者简介 | 第137-138页 |