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嗜酸性氧化亚铁硫杆菌IV型纤毛基因及分子马达基因pilT的克隆、表达和功能分析

缩略词第6-7页
中文摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌的能量代谢和运动的研究进展第11-23页
    1. 嗜酸氧化亚铁硫杆菌的能量代谢和运动的研究第11-21页
        1.1 嗜酸氧化亚铁硫杆菌的结构与生理特性第11页
        1.2 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌能量的代谢和电子传递第11-13页
            1.2.1 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌呼吸链的组成元件第11-12页
            1.2.2 嗜酸氧化亚铁硫杆菌的铁氧化供能第12-13页
        1.3 有机物对氧化亚铁硫杆菌生长的抑制作用第13-14页
        1.4 嗜酸性氧化亚铁硫杆菌趋化性运动和吸附的研究情况第14-15页
        1.5 革兰氏阴性菌依靠Tfp的运动和吸附第15-20页
            1.5.1 Tfp的组成研究第15-16页
            1.5.2 PilV的研究第16-17页
            1.5.3 PilW的研究第17页
            1.5.4 PilT的研究第17-19页
            1.5.5 PilU的研究第19-20页
        1.6 Tfp的电子传递研究第20-21页
    2. 研究目的与意义第21-23页
        2.1 研究目的第21页
        2.2 研究意义第21-23页
第二章 四型纤毛(TFP)的克隆、表达和功能分析第23-51页
    1. 材料和方法第24-26页
        1.1 Tfp的pilV和pilW基因的克隆第24-25页
        1.2 Tfp的pilV和pilW基因序列分析及功能预测第25页
            1.2.1 根据测序结果推导氨基酸序列第25页
            1.2.2 构建氨基酸序列的同源树和系统进化树第25页
            1.2.3 蛋白质空间结构预测以及蛋白质特征分析第25页
        1.3 pilV和pilW基因的转录分析第25页
        1.4 Tfp相关功能分析第25-26页
            1.4.1 A.ferrooxidans的滑动(Sliding motility)第25页
            1.4.2 A.ferrooxidans的颤动(Twitching motility)第25-26页
            1.4.3 透射电子显微镜观察A.ferrooxidans(TEM)第26页
            1.4.4 扫描电子显微镜观察矿物表面的A.ferrooxidans(SEM)第26页
            1.4.5 电导探针原子力显微镜(CP-AFM)分析Pili的导电性能第26页
    2. 结果与讨论第26-49页
        2.1 pilV基因的克隆、序列分析及功能预测第26-34页
            2.1.1 pilV基因的克隆第27页
            2.1.2 pilV基因序列分析及功能预测第27-34页
                2.1.2.1 根据测序结果推导氨基酸序列第27-28页
                2.1.2.2 pilV编码蛋白的组成和特性第28-29页
                2.1.2.3 PilV蛋白的二级结构的预测第29-30页
                2.1.2.4 PilV氨基酸序列系统进化树第30-34页
        2.2 pilW基因的克隆、序列分析及功能预测第34-42页
            2.2.1 pilW基因的克隆第34页
            2.2.2 pilW基因序列分析及功能预测第34-42页
                2.2.2.1 根据测序结果推导氨基酸序列第34-35页
                2.2.2.2 PilW蛋白的组成和特性第35-37页
                2.2.2.3 PilW蛋白的二级结构的预测第37-38页
                2.2.2.4 构建PilW氨基酸序列的同源树和系统进化树第38-42页
        2.3 pilV和pilW基因的转录分析第42-43页
        2.4 Tfp相关功能分析第43-49页
            2.4.1 Sliding motility第43-44页
            2.4.2 Twitching motility第44页
            2.4.3 TEM第44页
            2.4.4 SEM第44-47页
            2.4.5 电导探针原子力显微镜(CP-AFM)分析Tfp的导电性第47-49页
    3. 小结第49-51页
第三章 PILT和PILU基因的克隆、表达和功能分析第51-76页
    1. 材料和方法第52-56页
        1.1 pilT和pilU基因的克隆和表达第52-55页
            1.1.1 pilT和pilU基因的克隆第52-53页
            1.1.2 目的基因片段(PCR产物)的回收第53页
            1.1.3 回收片段与载体的连接第53页
            1.1.4 感受态细胞的制备及转化第53页
            1.1.5 平板筛选第53-54页
            1.1.6 阳性菌的PCR鉴定及克隆基因的测序第54页
            1.1.7 质粒双酶切第54页
            1.1.8 酶切质粒的连接第54-55页
            1.1.9 pilT和pilU基因的表达和纯化第55页
        1.2 pilT和pilU基因序列分析及功能预测第55页
        1.3 pilT和pilU基因的转录分析第55-56页
        1.4 ATPase assay第56页
    2. 结果和讨论第56-74页
        2.1 pilT基因的表达、基因序列分析及功能预测第56-64页
            2.1.1 pilT基因的克隆第56-57页
            2.1.2 pilT基因序列分析及功能预测第57-63页
                2.1.2.1 根据pilT测序结果推导氨基酸序列第57-58页
                2.1.2.2 PilT蛋白的组成和特性第58-59页
                2.1.2.3 PilT蛋白的二级结构的预测第59-60页
                2.1.2.4 构建PilT氨基酸序列的同源树和系统进化树第60-63页
            2.1.3 pilT基因的表达和纯化第63-64页
        2.2 pilU基因的表达、基因序列分析及功能预测第64-73页
            2.2.1 pilU基因的克隆第64-65页
            2.2.2 pilU基因序列分析及功能预测第65-72页
                2.2.2.1 根据pilU测序结果推导氨基酸序列第65页
                2.2.2.2 pilU编码蛋白的组成和特性第65-67页
                2.2.2.3 PilU蛋白的二级结构的预测第67-68页
                2.2.2.4 构建pilU氨基酸序列的同源树和系统进化树第68-72页
            2.2.3 pilU基因的表达和纯化第72-73页
        2.3 pilT和pilU基因的转录分析第73页
        2.4 PilT和PilU蛋白ATPase活性第73-74页
    3. 小结第74-76页
总结第76-77页
参考文献第77-85页
发表论文目录第85-86页
致谢第86页

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