主要缩略词英文索引 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
前言 | 第8-15页 |
第一部分 高效表达目的基因的 293T细胞的建立 | 第15-29页 |
1.1 材料 | 第15-16页 |
1.2 方法 | 第16-23页 |
1.2.1 ccr5、vif、pol 基因的合成 | 第16-17页 |
1.2.2 pEGFP-C1-ccr5、pEGFP-C1-vif、pEGFP-C1-pol 表达载体的构建 | 第17-19页 |
1.2.3 293T 细胞抗生素最佳筛选剂量实验 | 第19页 |
1.2.4 质粒转染及转染细胞的筛选 | 第19-20页 |
1.2.5 qPCR 法检测目的基因表达 | 第20-23页 |
1.3 结果 | 第23-29页 |
1.3.1 重组 T 载体和 pEGFP 载体鉴定 | 第23-25页 |
1.3.2 重组质粒鉴定 | 第25-27页 |
1.3.3 抗生素最佳剂量的确定 | 第27页 |
1.3.4 转染细胞的筛选 | 第27-28页 |
1.3.5 目的基因在 293T 细胞的表达 | 第28-29页 |
第二部分 靶向目的基因的人工 miRNA 的构建及干扰评价 | 第29-43页 |
2.1 材料 | 第29-30页 |
2.2 方法 | 第30-42页 |
2.2.1 干扰载体的构建 | 第30-34页 |
2.2.2 干扰载体在高表达细胞株中的干扰评价 | 第34-42页 |
2.3 结果 | 第42-43页 |
2.3.1 干扰载体测序结果 | 第42页 |
2.3.2 干扰载体对于靶基因的沉默效果 | 第42-43页 |
讨论 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
发表文章 | 第52-61页 |
附录 | 第61-64页 |
致谢 | 第64页 |