摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-28页 |
1.1 拟南芥LrgB蛋白的发现与研究进展 | 第11-12页 |
1.2 植物细胞程序性死亡相关蛋白研究进展 | 第12-26页 |
1.2.1 细胞自噬相关蛋白研究进展 | 第13-15页 |
1.2.2 植物细胞凋亡保守蛋白研究进展 | 第15-20页 |
1.2.2.1 BI-1蛋白 | 第15-17页 |
1.2.2.2. Metacaspases蛋白 | 第17-19页 |
1.2.2.3 DAD1保守蛋白 | 第19-20页 |
1.2.3 植物PCD的叶绿体途径蛋白研究进展 | 第20-24页 |
1.2.3.1 SGR蛋白 | 第20-21页 |
1.2.3.2 ACD2蛋白 | 第21-23页 |
1.2.3.3 FtsHs蛋白家族 | 第23-24页 |
1.2.4 LSD1介导的植物抗病信号通路研究 | 第24-26页 |
1.3 有前景的模式植物小立碗藓的研究进展 | 第26-28页 |
第二章 材料和方法 | 第28-38页 |
2.1 实验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 菌株及原始载体 | 第28页 |
2.1.3 试剂和主要仪器 | 第28-29页 |
2.2 入门载体的构建 | 第29-33页 |
2.2.1 引物设计 | 第29-31页 |
2.2.2 PCR及产物回收 | 第31-32页 |
2.2.3 Bsa Ⅰ酶切连接构建Entry载体 | 第32-33页 |
2.2.4 转化及阳性克隆鉴定 | 第33页 |
2.3 表达载体的构建 | 第33-34页 |
2.4 转基因和筛选 | 第34-35页 |
2.4.1 拟南芥的培养 | 第34页 |
2.4.2 电转化 | 第34-35页 |
2.4.3 转基因 | 第35页 |
2.4.4 筛选 | 第35页 |
2.5 种子萌发和表型观察 | 第35页 |
2.6 表型分析 | 第35-36页 |
2.6.1 共聚焦显微镜观察 | 第35-36页 |
2.6.2 PI染色分析 | 第36页 |
2.7 小立碗藓原丝体培养 | 第36页 |
2.8 小立碗藓原生质体制备及PEG介导法转化 | 第36-38页 |
第三章 结果和分析 | 第38-52页 |
3.1 植物PCD相关蛋白载体构建 | 第38-41页 |
3.1.1 自噬相关蛋白亚细胞定位载体构建 | 第38-39页 |
3.1.2 凋亡保守蛋白亚细胞定位载体构建 | 第39-40页 |
3.1.3 PCD的叶绿体途径相关蛋白亚细胞定位载体构建 | 第40-41页 |
3.1.4 植物逆境相关信号通路蛋白载体构建 | 第41页 |
3.2 有关LrgB同源基因的载体构建 | 第41-46页 |
3.2.1 拟南芥AtLrgB系列 | 第41-42页 |
3.2.2 细菌LrgAB/CidAB系列 | 第42-45页 |
3.2.2.1 细菌LrgAB/CidAB荧光亚细胞定位系列 | 第43-44页 |
3.2.2.2 细菌LrgAB/CidAB过表达系列 | 第44-45页 |
3.2.3 海洋绿藻(Ostreococcus tauri)OtLrgB系列 | 第45页 |
3.2.4 水稻(Oryza sativa Japonica Group)OsLrgB-2亚细胞定位 | 第45-46页 |
3.3 共聚焦显微镜观察结果 | 第46-50页 |
3.3.1 AtLrgB基因的T-DNA插入突变体的共聚焦表型分析 | 第46页 |
3.3.2 AtLrgB的亚细胞定位分析 | 第46-47页 |
3.3.3 NOCTP-AtLrgB的亚细胞定位分析 | 第47页 |
3.3.4 MTP-AtLrgB的亚细胞定位分析 | 第47-48页 |
3.3.5 水稻OsLrgB-2的亚细胞定位分析 | 第48页 |
3.3.6 小立碗藓PpLrgB-1的亚细胞定位分析 | 第48-49页 |
3.3.7 绿藻OtLrgB的亚细胞定位分析 | 第49页 |
3.3.8 细菌CTP-LrgAB的亚细胞定位分析 | 第49-50页 |
3.4 小立碗藓原生质体转化结果 | 第50-52页 |
第四章 讨论 | 第52-56页 |
参考文献 | 第56-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
附录 | 第69-73页 |