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中药血浆药理方法学的评价研究--基于补阳还五汤DCP对缺氧大鼠BMECs的作用

中文摘要第4-7页
ABSTRACT第7-10页
中英文缩略词表第16-18页
引言第18-23页
    参考文献第20-23页
第一部分 补阳还五汤对大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠血管内皮细胞功能相关指标的影响第23-56页
    1 材料与方法第24-35页
        1.1 实验材料第24-25页
            1.1.1 实验动物第24页
            1.1.2 实验药物第24页
            1.1.3 主要试剂第24-25页
            1.1.4 主要仪器、设备第25页
        1.2 实验方法第25-35页
            1.2.1 大鼠MCAO模型的制备第25-26页
            1.2.2 动物分组及给药第26页
            1.2.3 神经功能缺失体征评分方法第26页
            1.2.4 标本采集及处理第26页
            1.2.5 指标检测及方法第26-35页
                1.2.5.1 脑组织形态学的观察第26-27页
                1.2.5.2 脑梗死范围检测第27-28页
                1.2.5.3 细胞凋亡原位检测第28-29页
                1.2.5.4 ELISA法检测血浆中PAI-1、tPA、vWF、6-keto-PGF1α含量第29页
                1.2.5.5 硝酸还原酶法检测NO含量第29-30页
                1.2.5.6 RT-PCR方法检测脑组织ICAM-1mRNA、VCAM-1mRNA第30-33页
                1.2.5.7 Western blot方法测定脑组织ICAM-1、VCAM-1蛋白的含量第33-35页
        1.3 统计学方法第35页
    2 结果第35-50页
        2.1 补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经症状积分变化的影响第35页
        2.2 脑组织病理学第35-37页
        2.3 脑梗死范围检测第37页
        2.4 脑组织细胞凋亡检测第37-38页
        2.5 补阳还五汤对MCAO大鼠血浆NO的影响第38-39页
        2.6 补阳还五汤对MCAO大鼠血浆vWF的影响第39-40页
        2.7 补阳还五汤对MCAO大鼠血浆6-keto-PGF1 α的影响第40-41页
        2.8 不同组别不同时间点MCAO大鼠血浆PAI-1的含量第41-42页
        2.9 不同组别不同时间点MCAO大鼠血浆tPA的含量第42-43页
        2.10 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织ICAM-1 mRNA的表达第43-46页
            2.10.1 RNA纯度检测结果第43-44页
            2.10.2 各指标的扩增及溶解曲线第44-46页
        2.11 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织VCAM-1 mRNA的表达第46-47页
        2.12 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织ICAM-1蛋白的表达第47-48页
        2.13 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织VCAM-1蛋白的含量第48-50页
    3 讨论第50-53页
    参考文献第53-56页
第二部分 补阳还五汤DCP和DCS对大鼠BMECs缺氧损伤的作用第56-78页
    1 材料与方法第56-62页
        1.1 实验材料第56-58页
            1.1.1 细胞系第56页
            1.1.2 细胞培养专用试剂第56页
            1.1.3 主要试剂第56-57页
            1.1.4 主要仪器、设备第57-58页
            1.1.5 实验动物第58页
            1.1.6 实验药物第58页
        1.2 实验方法第58-59页
            1.2.1 含药血浆和空白对照血浆的制备第58-59页
            1.2.2 大鼠BMECs的培养第59页
            1.2.3 实验分组与缺氧造模第59页
        1.3 观察指标和检测方法第59-61页
            1.3.1 BMECs的鉴定第59-60页
            1.3.2 细胞活力检测(MTT法)第60-61页
            1.3.3 ELISA法检测PAI-1、tPA、vWF、6-keto-PGF1α含量第61页
            1.3.4 硝酸还原酶法检测NO含量第61页
            1.3.5 RT-PCR法检测ICAM-1mRNA、VCAM-1 mRNA第61页
            1.3.6 Western-Blot法检测ICAM-1、VCAM-1蛋白第61页
            1.3.7 ICAM-1、VCAM-1引物的设计第61页
        1.4 统计学分析第61-62页
    2 结果第62-72页
        2.1 大鼠BMECs的形态学观察第62-63页
        2.2 Ⅶ因子、CD31相关抗原免疫细胞化学染色鉴定第63-64页
        2.3 各组细胞活力变化第64-65页
        2.4 各组细胞NO的含量第65页
        2.5 各组细胞vWF、6-keto-PGF1α的含量第65-67页
        2.6 各组细胞PAI-1、tPA的含量第67-68页
        2.7 各组细胞ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达第68-70页
        2.8 各组细胞ICAM-1 mRNA、VCAM-1 mRNA的表达第70-72页
    3 讨论第72-75页
        3.1 NO、6-keto-PGF1α、vWF变化第72-73页
        3.2 tPA、PAI-1、黏附分子变化第73-74页
        3.3 原药组各指标的表达变化第74-75页
    参考文献第75-78页
第三部分 补阳还五汤DCP和DCS对缺氧损伤的大鼠BMECs相关指标的表达及与体内实验的相似度研究第78-93页
    1 材料与方法第78-80页
        1.1 实验材料第78-79页
            1.1.1 主要试剂第78-79页
            1.1.2 主要仪器、设备第79页
            1.1.3 实验动物第79页
            1.1.4 实验药物第79页
        1.2 实验方法第79-80页
            1.2.1 含药血浆、含药血清制备第79页
            1.2.2 大鼠BMECs的培养第79页
            1.2.3 实验分组与缺氧造模第79页
            1.2.4 动物模型制备第79页
            1.2.5 动物给药及取血第79页
            1.2.6 ELISA法检测第79页
            1.2.7 硝酸还原酶法检测第79-80页
            1.2.8 RT-PCR法检测第80页
            1.2.9 Western-Blot法检测第80页
        1.3 统计学分析第80页
    2 结果第80-88页
        2.1 各组不同时间点体内实验与细胞实验NO的含量第80-81页
        2.2 各组不同时间点体内实验与细胞实验vWF的含量第81-82页
        2.3 各组不同时间点体内实验与细胞实验6-keto-PGF1 α的含量第82-84页
        2.4 各组不同时间点体内实验与细胞实验PAI-1、tPA的含量第84-85页
        2.5 各组不同时间点体内试验与细胞实验ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达第85-87页
        2.6 不同时间点体内试验与细胞实验 ICAM-1 mRNA、VCAM-1 mRNA的表达第87-88页
    3 讨论第88-91页
        3.1 补阳还五汤含药血浆和含药血清均能抑制缺氧损伤的大鼠BMECs释放vWF第89页
        3.2 补阳还五汤含药血浆和含药血清均能促进缺氧损伤的大鼠BMECs释放NO、6-keto-PGF1α第89页
        3.3 补阳还五汤含药血浆较含药血清更显著降低缺氧损伤的大鼠BMECsPAI-1、增强tPA水平第89-90页
        3.4 补阳还五汤含药血浆和含药血清均能降低缺氧损伤的大鼠BMECs黏附分子的表达第90页
        3.5 补阳还五汤含药血浆组vWF、6-keto-PGF1 α与体内实验相关系数高于含药血清组,含药血浆组NO与体内实验相关系数接近于含药血清组与体内实验相关系数,含药血浆组纤溶和黏附分子表达更接近体内实验真实值第90-91页
    参考文献第91-93页
全文总结第93-94页
致谢第94-95页
攻读学位期间主要科研成果及发表论文第95-99页
附录 综述:补阳还五汤治疗缺血性中风的实验研究进展第99-106页
    参考义献第104-106页

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