中文摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
中英文缩略词表 | 第16-18页 |
引言 | 第18-23页 |
参考文献 | 第20-23页 |
第一部分 补阳还五汤对大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠血管内皮细胞功能相关指标的影响 | 第23-56页 |
1 材料与方法 | 第24-35页 |
1.1 实验材料 | 第24-25页 |
1.1.1 实验动物 | 第24页 |
1.1.2 实验药物 | 第24页 |
1.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
1.1.4 主要仪器、设备 | 第25页 |
1.2 实验方法 | 第25-35页 |
1.2.1 大鼠MCAO模型的制备 | 第25-26页 |
1.2.2 动物分组及给药 | 第26页 |
1.2.3 神经功能缺失体征评分方法 | 第26页 |
1.2.4 标本采集及处理 | 第26页 |
1.2.5 指标检测及方法 | 第26-35页 |
1.2.5.1 脑组织形态学的观察 | 第26-27页 |
1.2.5.2 脑梗死范围检测 | 第27-28页 |
1.2.5.3 细胞凋亡原位检测 | 第28-29页 |
1.2.5.4 ELISA法检测血浆中PAI-1、tPA、vWF、6-keto-PGF1α含量 | 第29页 |
1.2.5.5 硝酸还原酶法检测NO含量 | 第29-30页 |
1.2.5.6 RT-PCR方法检测脑组织ICAM-1mRNA、VCAM-1mRNA | 第30-33页 |
1.2.5.7 Western blot方法测定脑组织ICAM-1、VCAM-1蛋白的含量 | 第33-35页 |
1.3 统计学方法 | 第35页 |
2 结果 | 第35-50页 |
2.1 补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠神经症状积分变化的影响 | 第35页 |
2.2 脑组织病理学 | 第35-37页 |
2.3 脑梗死范围检测 | 第37页 |
2.4 脑组织细胞凋亡检测 | 第37-38页 |
2.5 补阳还五汤对MCAO大鼠血浆NO的影响 | 第38-39页 |
2.6 补阳还五汤对MCAO大鼠血浆vWF的影响 | 第39-40页 |
2.7 补阳还五汤对MCAO大鼠血浆6-keto-PGF1 α的影响 | 第40-41页 |
2.8 不同组别不同时间点MCAO大鼠血浆PAI-1的含量 | 第41-42页 |
2.9 不同组别不同时间点MCAO大鼠血浆tPA的含量 | 第42-43页 |
2.10 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织ICAM-1 mRNA的表达 | 第43-46页 |
2.10.1 RNA纯度检测结果 | 第43-44页 |
2.10.2 各指标的扩增及溶解曲线 | 第44-46页 |
2.11 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织VCAM-1 mRNA的表达 | 第46-47页 |
2.12 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织ICAM-1蛋白的表达 | 第47-48页 |
2.13 不同组别不同时间点MCAO大鼠脑组织VCAM-1蛋白的含量 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
第二部分 补阳还五汤DCP和DCS对大鼠BMECs缺氧损伤的作用 | 第56-78页 |
1 材料与方法 | 第56-62页 |
1.1 实验材料 | 第56-58页 |
1.1.1 细胞系 | 第56页 |
1.1.2 细胞培养专用试剂 | 第56页 |
1.1.3 主要试剂 | 第56-57页 |
1.1.4 主要仪器、设备 | 第57-58页 |
1.1.5 实验动物 | 第58页 |
1.1.6 实验药物 | 第58页 |
1.2 实验方法 | 第58-59页 |
1.2.1 含药血浆和空白对照血浆的制备 | 第58-59页 |
1.2.2 大鼠BMECs的培养 | 第59页 |
1.2.3 实验分组与缺氧造模 | 第59页 |
1.3 观察指标和检测方法 | 第59-61页 |
1.3.1 BMECs的鉴定 | 第59-60页 |
1.3.2 细胞活力检测(MTT法) | 第60-61页 |
1.3.3 ELISA法检测PAI-1、tPA、vWF、6-keto-PGF1α含量 | 第61页 |
1.3.4 硝酸还原酶法检测NO含量 | 第61页 |
1.3.5 RT-PCR法检测ICAM-1mRNA、VCAM-1 mRNA | 第61页 |
1.3.6 Western-Blot法检测ICAM-1、VCAM-1蛋白 | 第61页 |
1.3.7 ICAM-1、VCAM-1引物的设计 | 第61页 |
1.4 统计学分析 | 第61-62页 |
2 结果 | 第62-72页 |
2.1 大鼠BMECs的形态学观察 | 第62-63页 |
2.2 Ⅶ因子、CD31相关抗原免疫细胞化学染色鉴定 | 第63-64页 |
2.3 各组细胞活力变化 | 第64-65页 |
2.4 各组细胞NO的含量 | 第65页 |
2.5 各组细胞vWF、6-keto-PGF1α的含量 | 第65-67页 |
2.6 各组细胞PAI-1、tPA的含量 | 第67-68页 |
2.7 各组细胞ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达 | 第68-70页 |
2.8 各组细胞ICAM-1 mRNA、VCAM-1 mRNA的表达 | 第70-72页 |
3 讨论 | 第72-75页 |
3.1 NO、6-keto-PGF1α、vWF变化 | 第72-73页 |
3.2 tPA、PAI-1、黏附分子变化 | 第73-74页 |
3.3 原药组各指标的表达变化 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第三部分 补阳还五汤DCP和DCS对缺氧损伤的大鼠BMECs相关指标的表达及与体内实验的相似度研究 | 第78-93页 |
1 材料与方法 | 第78-80页 |
1.1 实验材料 | 第78-79页 |
1.1.1 主要试剂 | 第78-79页 |
1.1.2 主要仪器、设备 | 第79页 |
1.1.3 实验动物 | 第79页 |
1.1.4 实验药物 | 第79页 |
1.2 实验方法 | 第79-80页 |
1.2.1 含药血浆、含药血清制备 | 第79页 |
1.2.2 大鼠BMECs的培养 | 第79页 |
1.2.3 实验分组与缺氧造模 | 第79页 |
1.2.4 动物模型制备 | 第79页 |
1.2.5 动物给药及取血 | 第79页 |
1.2.6 ELISA法检测 | 第79页 |
1.2.7 硝酸还原酶法检测 | 第79-80页 |
1.2.8 RT-PCR法检测 | 第80页 |
1.2.9 Western-Blot法检测 | 第80页 |
1.3 统计学分析 | 第80页 |
2 结果 | 第80-88页 |
2.1 各组不同时间点体内实验与细胞实验NO的含量 | 第80-81页 |
2.2 各组不同时间点体内实验与细胞实验vWF的含量 | 第81-82页 |
2.3 各组不同时间点体内实验与细胞实验6-keto-PGF1 α的含量 | 第82-84页 |
2.4 各组不同时间点体内实验与细胞实验PAI-1、tPA的含量 | 第84-85页 |
2.5 各组不同时间点体内试验与细胞实验ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达 | 第85-87页 |
2.6 不同时间点体内试验与细胞实验 ICAM-1 mRNA、VCAM-1 mRNA的表达 | 第87-88页 |
3 讨论 | 第88-91页 |
3.1 补阳还五汤含药血浆和含药血清均能抑制缺氧损伤的大鼠BMECs释放vWF | 第89页 |
3.2 补阳还五汤含药血浆和含药血清均能促进缺氧损伤的大鼠BMECs释放NO、6-keto-PGF1α | 第89页 |
3.3 补阳还五汤含药血浆较含药血清更显著降低缺氧损伤的大鼠BMECsPAI-1、增强tPA水平 | 第89-90页 |
3.4 补阳还五汤含药血浆和含药血清均能降低缺氧损伤的大鼠BMECs黏附分子的表达 | 第90页 |
3.5 补阳还五汤含药血浆组vWF、6-keto-PGF1 α与体内实验相关系数高于含药血清组,含药血浆组NO与体内实验相关系数接近于含药血清组与体内实验相关系数,含药血浆组纤溶和黏附分子表达更接近体内实验真实值 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-93页 |
全文总结 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
攻读学位期间主要科研成果及发表论文 | 第95-99页 |
附录 综述:补阳还五汤治疗缺血性中风的实验研究进展 | 第99-106页 |
参考义献 | 第104-106页 |