摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略语对照表 | 第13-15页 |
前言 | 第15-18页 |
第一章 TROP2在肺腺癌中的表达及其临床意义 | 第18-35页 |
1.1 实验材料 | 第18-21页 |
1.1.1 组织标本 | 第18-19页 |
1.1.2 细胞株 | 第19页 |
1.1.3 主要试剂与主要仪器 | 第19-21页 |
1.2 实验内容 | 第21-28页 |
1.2.1 主要试剂的配制 | 第21-23页 |
1.2.2 细胞培养 | 第23-24页 |
1.2.3 免疫组化法检测TROP2蛋白表达 | 第24页 |
1.2.4 RT-qPCR分别检测肺腺癌组织和细胞系中TROP2的表达 | 第24-26页 |
1.2.5 Western Blot检测肺腺癌细胞系中TROP2蛋白的表达 | 第26-28页 |
1.3 统计学处理 | 第28页 |
1.4 结果 | 第28-32页 |
1.4.1 TROP2基因mRNA在肺腺癌组织中的表达情况 | 第28页 |
1.4.2 RT-qPCR检测肺腺癌细胞系中TROP2 mRNA表达及定量分析 | 第28-29页 |
1.4.3 Western Blot检测肺腺癌细胞系中TROP2蛋白表达量 | 第29页 |
1.4.4 免疫组织化学检测TROP2蛋白在肺腺癌组织中的表达情况 | 第29-32页 |
1.5 讨论 | 第32-34页 |
1.6 结论 | 第34-35页 |
第二章 TROP2基因过表达质粒和TROP2-shRNA质粒构建及肺腺癌细胞株的筛选 | 第35-71页 |
2.1 实验材料 | 第35-37页 |
2.1.1 细胞株及培养条件 | 第35页 |
2.1.2 主要试剂与主要仪器 | 第35-37页 |
2.2 实验内容 | 第37-56页 |
2.2.1 常用试剂的配制 | 第37-38页 |
2.2.2 构建干扰TROP2基因的shRNA质粒载体 | 第38-50页 |
2.2.3 TROP2过表达质粒的构建 | 第50-56页 |
2.2.4 统计学分析 | 第56页 |
2.3 结果 | 第56-67页 |
2.3.1 TROP2干扰质粒shRNA-TROP2构建结果 | 第56-61页 |
2.3.2 PGEM-T-Easy-TROP2构建结果 | 第61-67页 |
2.4 讨论 | 第67-70页 |
2.5 结论 | 第70-71页 |
第三章 TROP2对肺腺癌体外生物学特性的影响 | 第71-89页 |
3.1 实验材料 | 第71-72页 |
3.1.1 细胞培养 | 第71页 |
3.1.2 主要试剂与主要仪器 | 第71-72页 |
3.2 实验内容 | 第72-76页 |
3.2.1 路线图 | 第72页 |
3.2.2 实验分组 | 第72-73页 |
3.2.3 细胞培养,细胞冻存、复苏、传代等详细步骤均见第一章 | 第73页 |
3.2.4 TROP2低表达对肺腺癌PC-9 细胞生物学特性的影响 | 第73-75页 |
3.2.5 高表达TROP2对肺腺癌A549细胞生物学特性的影响 | 第75-76页 |
3.3 统计学处理 | 第76页 |
3.4 结果 | 第76-86页 |
3.4.1 稳定转染后肺腺癌细胞PC-9 通过RT-qPCR及Western Blot检测TROP2的mRNA及TROP2蛋白表达 | 第76-77页 |
3.4.2 CCK-8 比色法检测PC-9、A549细胞的增殖 | 第77-79页 |
3.4.3 细胞迁移实验结果 | 第79-82页 |
3.4.4 细胞侵袭实验结果 | 第82-83页 |
3.4.5 细胞凋亡实验结果 | 第83-86页 |
3.5 讨论 | 第86-88页 |
3.6 结论 | 第88-89页 |
第四章 全文总结 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-95页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第95-96页 |
综述 | 第96-113页 |
参考文献 | 第109-113页 |