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氩氦冷冻消融术联合体内负载树突状细胞疫苗治疗非小细胞肺癌的研究

缩略词表第8-9页
中文摘要第9-13页
英文摘要第13-16页
前言第17-30页
第一部分 不同注射部位及免疫佐剂CpG-ODN对DCs归巢的影响第30-45页
    1 材料第30-31页
        1.1 实验动物和细胞系第30-31页
        1.2 主要试剂和仪器第31页
    2 实验方法第31-34页
        2.1 DCs的体外培养第31-32页
        2.2 CFSE标记DCs第32-33页
        2.3 氩氦冷冻消融术第33页
        2.4 分组及DCs的给药方法第33-34页
        2.5 取材第34页
        2.6 FCM检测引流淋巴结中CFSE阳性细胞率第34页
        2.7 统计分析第34页
    3 结果第34-39页
        3.1 体外培养的DCs第34-35页
        3.2 CFSE标记的DCs第35-36页
        3.3 FCM检测引流淋巴结中CFSE阳性细胞率第36-39页
    4 讨论第39-45页
第二部分 CpG-ODN的应用时机对氩氦冷冻消融术后体内负载DCs疫苗的影响第45-64页
    1 材料第45-47页
        1.1 实验动物和细胞系第45-46页
        1.2 主要试剂和仪器第46-47页
    2 实验方法第47-53页
        2.1 DCs的培养及表型检测第47-48页
            2.1.1 DCs的体外培养第47-48页
            2.1.2 DCs表型的检测第48页
        2.2 实验分组第48页
        2.3 氩氦冷冻消融术第48页
        2.4 DCs及CpG-ODN的给药方法第48-49页
        2.5 生存分析第49页
        2.6 BD CBA法检测血清中细胞因子第49-51页
            2.6.1 摘眼球采血第49页
            2.6.2 分离血清第49页
            2.6.3 BD CBA检测多种细胞因子的步骤第49-51页
        2.7 FCM检测小鼠全血T淋巴细胞亚群第51页
            2.7.1 实验步骤第51页
            2.7.2 结果分析第51页
        2.8 对抗肿瘤细胞二次攻击能力的检测第51-53页
            2.8.1 Lewis肺腺癌细胞系的复苏、培养及接种第52页
            2.8.2 瘤体大小的测量与计算第52页
            2.8.3 肺部转移瘤的比较第52页
            2.8.4 LDH法检测小鼠脾淋巴细胞对Lewis肺腺癌细胞的体外杀伤作用第52-53页
                2.8.4.1 取材第52-53页
                2.8.4.2 检测步骤第53页
                2.8.4.3 计算方法第53页
        2.9 统计分析第53页
    3 实验结果第53-63页
        3.1 体外培养的DCs及其表型检测第53-54页
            3.1.1 体外培养的DCs第53-54页
            3.1.2 DCs的表型第54页
        3.2 Kaplan-Meier生存分析第54-55页
        3.3 血清多种细胞因子水平第55-59页
        3.4 血CD3~+CD4~+T与CD3~+CD8~+T细胞第59-61页
        3.5 二次接种的肿瘤体积的比较第61页
        3.6 肺部转移瘤的比较第61-62页
        3.7 脾淋巴细胞体外杀伤实验第62-63页
    4 讨论第63-64页
第三部分 氩氦冷冻消融术联合体内负载的DCs对晚期非小细胞肺癌治疗效果的研究第64-73页
    1 材料第64-65页
        1.1 实验动物和细胞系第64-65页
        1.2 主要试剂和仪器第65页
    2 实验方法第65-68页
        2.1 晚期小鼠Lewis肺腺癌模型的制备第65-66页
            2.1.1 Lewis肺腺癌细胞复苏、培养及传代第65页
            2.1.2 Lewis肺腺癌细胞团的制备第65-66页
            2.1.3 细胞团的移植第66页
            2.1.4 鼠尾静脉注射Lewis肺腺癌细胞第66页
        2.2 DCs的体外培养第66-67页
        2.3 氩氦冷冻消融术第67页
        2.4 分组第67页
        2.5 生存分析第67页
        2.6 对侧病灶的动态变化第67-68页
        2.7 肺部转移瘤的比较第68页
        2.8 统计分析第68页
    3 结果第68-71页
        3.1 体外培养的DCs第68页
        3.2 氩氦冷冻消融术第68-69页
        3.3 Kaplan-Meier生存分析第69页
        3.4 对侧病灶的动态变化第69-70页
        3.5 肺部转移瘤的比较第70-71页
    4 讨论第71-73页
研究总结第73-75页
附图第75-77页
参考文献第77-89页
综述第89-99页
    参考文献第94-99页
攻读学位期间发表论文情况第99-100页
致谢第100页

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