缩略词表 | 第8-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
前言 | 第17-30页 |
第一部分 不同注射部位及免疫佐剂CpG-ODN对DCs归巢的影响 | 第30-45页 |
1 材料 | 第30-31页 |
1.1 实验动物和细胞系 | 第30-31页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-34页 |
2.1 DCs的体外培养 | 第31-32页 |
2.2 CFSE标记DCs | 第32-33页 |
2.3 氩氦冷冻消融术 | 第33页 |
2.4 分组及DCs的给药方法 | 第33-34页 |
2.5 取材 | 第34页 |
2.6 FCM检测引流淋巴结中CFSE阳性细胞率 | 第34页 |
2.7 统计分析 | 第34页 |
3 结果 | 第34-39页 |
3.1 体外培养的DCs | 第34-35页 |
3.2 CFSE标记的DCs | 第35-36页 |
3.3 FCM检测引流淋巴结中CFSE阳性细胞率 | 第36-39页 |
4 讨论 | 第39-45页 |
第二部分 CpG-ODN的应用时机对氩氦冷冻消融术后体内负载DCs疫苗的影响 | 第45-64页 |
1 材料 | 第45-47页 |
1.1 实验动物和细胞系 | 第45-46页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第46-47页 |
2 实验方法 | 第47-53页 |
2.1 DCs的培养及表型检测 | 第47-48页 |
2.1.1 DCs的体外培养 | 第47-48页 |
2.1.2 DCs表型的检测 | 第48页 |
2.2 实验分组 | 第48页 |
2.3 氩氦冷冻消融术 | 第48页 |
2.4 DCs及CpG-ODN的给药方法 | 第48-49页 |
2.5 生存分析 | 第49页 |
2.6 BD CBA法检测血清中细胞因子 | 第49-51页 |
2.6.1 摘眼球采血 | 第49页 |
2.6.2 分离血清 | 第49页 |
2.6.3 BD CBA检测多种细胞因子的步骤 | 第49-51页 |
2.7 FCM检测小鼠全血T淋巴细胞亚群 | 第51页 |
2.7.1 实验步骤 | 第51页 |
2.7.2 结果分析 | 第51页 |
2.8 对抗肿瘤细胞二次攻击能力的检测 | 第51-53页 |
2.8.1 Lewis肺腺癌细胞系的复苏、培养及接种 | 第52页 |
2.8.2 瘤体大小的测量与计算 | 第52页 |
2.8.3 肺部转移瘤的比较 | 第52页 |
2.8.4 LDH法检测小鼠脾淋巴细胞对Lewis肺腺癌细胞的体外杀伤作用 | 第52-53页 |
2.8.4.1 取材 | 第52-53页 |
2.8.4.2 检测步骤 | 第53页 |
2.8.4.3 计算方法 | 第53页 |
2.9 统计分析 | 第53页 |
3 实验结果 | 第53-63页 |
3.1 体外培养的DCs及其表型检测 | 第53-54页 |
3.1.1 体外培养的DCs | 第53-54页 |
3.1.2 DCs的表型 | 第54页 |
3.2 Kaplan-Meier生存分析 | 第54-55页 |
3.3 血清多种细胞因子水平 | 第55-59页 |
3.4 血CD3~+CD4~+T与CD3~+CD8~+T细胞 | 第59-61页 |
3.5 二次接种的肿瘤体积的比较 | 第61页 |
3.6 肺部转移瘤的比较 | 第61-62页 |
3.7 脾淋巴细胞体外杀伤实验 | 第62-63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
第三部分 氩氦冷冻消融术联合体内负载的DCs对晚期非小细胞肺癌治疗效果的研究 | 第64-73页 |
1 材料 | 第64-65页 |
1.1 实验动物和细胞系 | 第64-65页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第65页 |
2 实验方法 | 第65-68页 |
2.1 晚期小鼠Lewis肺腺癌模型的制备 | 第65-66页 |
2.1.1 Lewis肺腺癌细胞复苏、培养及传代 | 第65页 |
2.1.2 Lewis肺腺癌细胞团的制备 | 第65-66页 |
2.1.3 细胞团的移植 | 第66页 |
2.1.4 鼠尾静脉注射Lewis肺腺癌细胞 | 第66页 |
2.2 DCs的体外培养 | 第66-67页 |
2.3 氩氦冷冻消融术 | 第67页 |
2.4 分组 | 第67页 |
2.5 生存分析 | 第67页 |
2.6 对侧病灶的动态变化 | 第67-68页 |
2.7 肺部转移瘤的比较 | 第68页 |
2.8 统计分析 | 第68页 |
3 结果 | 第68-71页 |
3.1 体外培养的DCs | 第68页 |
3.2 氩氦冷冻消融术 | 第68-69页 |
3.3 Kaplan-Meier生存分析 | 第69页 |
3.4 对侧病灶的动态变化 | 第69-70页 |
3.5 肺部转移瘤的比较 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
研究总结 | 第73-75页 |
附图 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-89页 |
综述 | 第89-99页 |
参考文献 | 第94-99页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |