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拟南芥盐胁迫下线粒体超氧阴离子产生机制的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词第11-12页
1 前言第12-22页
    1.1 植物ROS研究进展第12-18页
        1.1.1 植物细胞ROS的产生第12-15页
        1.1.2 植物细胞ROS的清除第15页
        1.1.3 ROS的检测第15-17页
        1.1.4 植物细胞ROS信号转导研究进展第17-18页
    1.2 植物盐胁迫应答机制研究进展第18-19页
        1.2.1 盐胁迫下线粒体中ROS应答第18页
        1.2.2 盐胁迫对线粒体电子传递链(ETC)的影响第18-19页
    1.3 Ca~(2+)信号在胁迫应答中的功能研究进展第19-21页
        1.3.1 ROS信号与钙信号的关系第19-20页
        1.3.2 线粒体中钙信号的测定第20-21页
    1.4 立题意义和依据第21-22页
2 材料与方法第22-32页
    2.1 实验材料第22页
    2.2 实验试剂第22页
    2.3 实验设备第22-23页
    2.4 实验溶液和培养基第23-24页
        2.4.1 常用溶液第23页
        2.4.2 常用培养基第23-24页
    2.5 实验方法第24-32页
        2.5.1 拟南芥种植方法第24页
        2.5.2 拟南芥的杂交实验第24-25页
        2.5.3 拟南芥基因组DNA的提取第25页
        2.5.4 农杆菌介导的拟南芥重组质粒转化第25-26页
        2.5.5 拟南芥RNA提取 (Trizol法)第26页
        2.5.6 cDNA的获得第26-27页
        2.5.7 荧光定量PCR反应第27-28页
        2.5.8 拟南芥T-DNA插入纯合体鉴定第28-29页
        2.5.9 拟南芥叶肉细胞原生质体的分离第29页
        2.5.10 线粒体定位第29-30页
        2.5.11 DAB染色第30-32页
3 结果与分析第32-48页
    3.1 不同亚细胞定位的cpYFP转基因植株的构建与检测第32-36页
        3.1.1 胞质定位cpYFP第32-33页
        3.1.2 叶绿体定位cpYFP第33页
        3.1.3 线粒体定位cpYFP第33-35页
        3.1.4 ROS的清除第35-36页
    3.2 NaCl诱导线粒体O_2~(.-)产生第36-40页
        3.2.1 不同试剂对根尖线粒体O_2~(.-)的影响第36-37页
        3.2.2 外源NaCl刺激下根尖细胞线粒体O_2~(.-)动态变化第37-38页
        3.2.3 外源NaCl刺激下叶肉细胞线粒体ROS动态变化第38-40页
    3.3 NaCl诱导线粒体O_2~(.-)产生机制分析第40-42页
    3.4 ETC抑制剂处理后盐胁迫下氧化还原有关基因的表达第42-44页
    3.5 NaCl处理前后WT和突变体的荧光变化第44-45页
    3.6 Ca~(2+)信号在NaCl处理诱导线粒体O_2~(.-)产生中的作用第45-48页
        3.6.1 EGTA孵育后NaCl诱导MCP根尖线粒体O_2~(.-)荧光变化第45-46页
        3.6.2 NaCl处理诱导线粒体Ca~(2+)产生第46-47页
        3.6.3 Antimycin A孵育后NaCl诱导根尖线粒体Ca~(2+)产生第47-48页
4 讨论第48-50页
    4.1 线粒体中ROS的产生第48页
    4.2 线粒体功能和盐胁迫应答第48-49页
    4.3 Ca~(2+)信号在NaCl处理诱导线粒体O_2~(.-)产生中的作用分析第49-50页
5 结论第50-52页
参考文献第52-59页
致谢第59-60页
附件第60页

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