中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-25页 |
1.1 小麦纹枯病综述 | 第12-17页 |
1.1.1 小麦纹枯病症状 | 第12-13页 |
1.1.2 小麦纹枯病菌的种类 | 第13页 |
1.1.3 小麦纹枯病菌的生理生态 | 第13-14页 |
1.1.4 小麦纹枯病菌的生物学特性 | 第14页 |
1.1.5 小麦纹枯病发病规律和影响发病的因素 | 第14-16页 |
1.1.5.1 发病规律 | 第14-15页 |
1.1.5.2 影响发病因素 | 第15-16页 |
1.1.6 小麦纹枯病害的综合防治措施 | 第16-17页 |
1.2.碳水化合物活性酶综述 | 第17-18页 |
1.2.1 碳水化合物类活性酶的组成及其功能 | 第18页 |
1.3.病原微生物与寄主植物互作的研究 | 第18-23页 |
1.3.1 植物的免疫系统 | 第18-20页 |
1.3.2 PAMPs诱导的植物免疫反应(PTI) | 第20页 |
1.3.3 效应因子诱导的植物免疫反应(ETI) | 第20-23页 |
1.4 真菌分泌蛋白的研究进展 | 第23页 |
1.5 立题依据及研究的目的和意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 材料 | 第25-26页 |
2.1.1 所用小麦品种及纹枯病病原菌菌株 | 第25页 |
2.1.2 所用主要试剂 | 第25页 |
2.1.3 所用培养基 | 第25页 |
2.1.4 所用主要生化试剂盒 | 第25-26页 |
2.1.5 所用主要仪器设备 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-37页 |
2.2.1 小麦纹枯病病原菌的采集与分离培养 | 第26页 |
2.2.1.1 小麦纹枯病病原菌的采集 | 第26页 |
2.2.1.2 小麦纹枯病菌的分离培养 | 第26页 |
2.2.2 小麦纹枯病的接种及侵染过程 | 第26-27页 |
2.2.3 小麦纹枯病病原菌的形态学观察以及分子鉴定 | 第27-28页 |
2.2.3.1 小麦纹枯病病原菌的形态学观察 | 第27页 |
2.2.3.2 小麦纹枯病病原菌 5.8S rDNA-ITS区序列分析 | 第27-28页 |
2.2.4 小麦体内活性氧的染色检测 | 第28页 |
2.2.5 小麦体内Caspase3-like活性检测 | 第28页 |
2.2.6 禾谷丝核菌候选效应因子的PCR扩增 | 第28-30页 |
2.2.7 禾谷丝核菌基因组DNA的提取: | 第30页 |
2.2.8 禾谷丝核菌基因组RNA的提取: | 第30-31页 |
2.2.9 禾谷丝核菌候选效应因子cDNA第一链的合成 | 第31页 |
2.2.10 候选效应因子PCR扩增产物回收 | 第31-32页 |
2.2.11 候选效应因子cDNA片段的连接 | 第32页 |
2.2.12 候选效应因子cDNA片段的转化 | 第32页 |
2.2.13 候选效应因子cDNA片段的单克隆PCR检测 | 第32-33页 |
2.2.14 候选效应因子cDNA片段的序列测定与分析 | 第33页 |
2.2.15 阳性单克隆菌液质粒的提取 | 第33页 |
2.2.16 质粒以及原核表达载体的双酶切反应 | 第33页 |
2.2.17 目的基因与表达载体片段的连接及表达菌株的获得 | 第33-34页 |
2.2.18 候选效应因子融合蛋白的诱导表达 | 第34页 |
2.2.19 候选效应因子融合蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
2.2.20 SDS-PAGE蛋白质电泳胶的染色与脱色 | 第35页 |
2.2.21 包涵体的溶解和复性 | 第35页 |
2.2.22 复性蛋白的纯化回收 | 第35-36页 |
2.2.23 效应因子融合蛋白对离体小麦叶片的致病性鉴定 | 第36-37页 |
3 实验结果 | 第37-47页 |
3.1 小麦纹枯病病原菌的培养特征 | 第37页 |
3.2 温麦6受禾谷丝核菌WK207侵染后病情的动态发展变化 | 第37-38页 |
3.3 利用扫描电镜观察禾谷丝核菌WK207对温麦6的侵染过程 | 第38-40页 |
3.4 受侵染的温麦6中ROS变化 | 第40-41页 |
3.5 受侵染的温麦6中Caspase3-like的活性变化 | 第41页 |
3.6 小麦纹枯病菌总RNA的提取 | 第41-42页 |
3.7 禾谷丝核菌候选效应因子基因的PCR扩增 | 第42-43页 |
3.8 两株禾谷丝核菌候选效应因子的单克隆PCR检测 | 第43页 |
3.9 利用SMART数据库对候选效应因子预测的结果 | 第43-44页 |
3.10 候选效应因子原核表达载体的构建 | 第44页 |
3.11 不同诱导温度及时间对融合蛋白可溶性表达的影响 | 第44-45页 |
3.12 效应因子粗蛋白产物对Wen6叶片的致病性鉴定 | 第45-47页 |
4.讨论 | 第47-48页 |
5.全文总结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-60页 |
致谢 | 第60页 |