摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-32页 |
2.1 材料 | 第13-18页 |
2.1.1 模式动物的选取 | 第13页 |
2.1.2 试剂及实验相关耗材 | 第13-15页 |
2.1.3 试剂配制 | 第15-17页 |
2.1.4 实验仪器 | 第17-18页 |
2.2 实验流程与方法 | 第18-32页 |
2.2.1 壁虎组织的取材 | 第18页 |
2.2.2 总RNA的提取 | 第18-19页 |
2.2.3 cDNA末端快速扩增(RACE)实验 | 第19-21页 |
2.2.4 PCR产物的回收及连接 | 第21页 |
2.2.5 连接产物的转化 | 第21-22页 |
2.2.6 重组子筛选(蓝白斑试验) | 第22页 |
2.2.7 质粒抽提 | 第22-23页 |
2.2.8 克隆鉴定和序列测定 | 第23页 |
2.2.9 逆转录反应 | 第23页 |
2.2.10 snail基因序列拼接 | 第23-24页 |
2.2.11 snail基因全长的获得 | 第24-25页 |
2.2.12 Real-time PCR | 第25-26页 |
2.2.13 Western blot分析 | 第26-27页 |
2.2.14 组织免疫荧光 | 第27页 |
2.2.15 snail基因慢病毒包装 | 第27-29页 |
2.2.16 snail基因慢病毒稳转细胞株的构建 | 第29页 |
2.2.17 细胞免疫组化 | 第29-30页 |
2.2.18 细胞增殖检测 | 第30页 |
2.2.19 细胞迁移实验—Transwell及划痕实验 | 第30-31页 |
2.2.20 细胞凋亡的诱导 | 第31页 |
2.2.21 Pull-Down实验 | 第31-32页 |
第三章 结果 | 第32-49页 |
3.1 多疣壁虎snail家族基因的克隆和序列分析 | 第32-39页 |
3.1.1 多疣壁虎snail家族基因的PCR凝胶电泳 | 第32-33页 |
3.1.2 多疣壁虎snail基因全长序列 | 第33-35页 |
3.1.3 多疣壁虎snail基因的同源性 | 第35-36页 |
3.1.4 多疣壁虎snail基因系统进化树分析 | 第36-39页 |
3.2 多疣壁虎snail基因在组织中的表达定位 | 第39-41页 |
3.2.1 snail基因在多疣壁虎组织中的实时分析 | 第39-40页 |
3.2.2 snail基因在多疣壁虎断尾脊髓切片中的免疫组化定位 | 第40-41页 |
3.3 snail基因的过表达促进神经元的存活 | 第41-44页 |
3.3.1 SHSY5Y细胞过表达snail基因后表形变化 | 第41-42页 |
3.3.2 snail抑制凋亡相关通路 | 第42-44页 |
3.4 snail基因的过表达对星形胶质细胞增殖迁移的影响 | 第44-45页 |
3.4.1 snail基因的过表达对多疣壁虎星形胶质细胞增殖迁移能力的影响 | 第44-45页 |
3.4.2 snail基因促进星形胶质细胞迁移的下游机制 | 第45页 |
3.5 snail基因的过表达对EMT相关因子的影响 | 第45-46页 |
3.6 snail上游信号分子机制 | 第46-49页 |
第四章 讨论 | 第49-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
英文缩写词表 | 第53-55页 |
综述 | 第55-65页 |
综述参考文献 | 第61-65页 |
致谢 | 第65页 |