摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 细胞凋亡、线粒体及泛素化系统概述 | 第11-26页 |
1.1 细胞凋亡与线粒体 | 第11-15页 |
1.1.1 细胞凋亡概述 | 第11页 |
1.1.2 细胞凋亡与疾病 | 第11-12页 |
1.1.3 细胞凋亡信号通路 | 第12-15页 |
1.2 线粒体与BCL2蛋白家族 | 第15-21页 |
1.2.1 线粒体结构 | 第15-17页 |
1.2.2 线粒体的动态变化 | 第17-18页 |
1.2.3 线粒体膜通透及BCL2家族 | 第18-20页 |
1.2.4 MCL1结构与功能 | 第20-21页 |
1.3 泛素修饰及TRIM家族蛋白 | 第21-24页 |
1.3.1 泛素修饰简介 | 第21-22页 |
1.3.3 TRIM家族蛋白概述 | 第22-23页 |
1.3.4 TRIM11功能及研究进展 | 第23-24页 |
1.4 论文选题依据及研究内容 | 第24-26页 |
1.4.1 选题依据 | 第24-25页 |
1.4.2 研究内容 | 第25-26页 |
2 TRIM11能够促进细胞凋亡 | 第26-37页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 仪器与试剂 | 第26-29页 |
2.2.1 仪器 | 第26-27页 |
2.2.2 试剂 | 第27页 |
2.2.3 试剂配制 | 第27-29页 |
2.2.4 菌种、细胞以及质粒 | 第29页 |
2.3 实验方法 | 第29-32页 |
2.3.1 细胞培养与转染 | 第29-30页 |
2.3.3 Western Blotting | 第30-31页 |
2.3.4 MTT检测细胞增殖 | 第31页 |
2.3.5 流式细胞术 | 第31-32页 |
2.4 结果与分析 | 第32-36页 |
2.4.1 TRIM11过表达对肿瘤细胞增殖能力的影响 | 第32-33页 |
2.4.2 TRIM11过表达对肿瘤细胞的细胞周期的影响 | 第33-34页 |
2.4.3 TRIM11过表达对肿瘤细胞的细胞凋亡的影响 | 第34-36页 |
2.5 讨论 | 第36页 |
2.6 小结 | 第36-37页 |
3 TRIM11与MCL1相互作用鉴定 | 第37-48页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 仪器与试剂 | 第37-38页 |
3.2.1 仪器 | 第37页 |
3.2.2 试剂 | 第37页 |
3.2.3 试剂配制 | 第37-38页 |
3.3 实验方法 | 第38-42页 |
3.3.1 细胞核质分离实验 | 第38页 |
3.3.2 MCL1表达质粒构建 | 第38-40页 |
3.3.3 免疫共沉淀 | 第40-41页 |
3.3.4 免疫荧光染色 | 第41-42页 |
3.3.5 Western Blotting | 第42页 |
3.4 结果与分析 | 第42-46页 |
3.4.1 TRIM11的核质分布 | 第42-43页 |
3.4.2 Humanin与BCL2家族蛋白序列比对 | 第43-44页 |
3.4.3 免疫共沉淀确定TRIM11与MCL1相互作用 | 第44-45页 |
3.4.4 免疫荧光染色鉴定TRIM11与MCL1在细胞中定位 | 第45-46页 |
3.5 讨论 | 第46-47页 |
3.6 小结 | 第47-48页 |
4 TRIM11对MCL1蛋白水平的影响 | 第48-56页 |
4.1 引言 | 第48页 |
4.2 仪器与试剂 | 第48页 |
4.2.1 仪器 | 第48页 |
4.2.2 试剂 | 第48页 |
4.3 实验方法 | 第48页 |
4.3.1 Western Blotting | 第48页 |
4.3.2 细胞增殖能力检测 | 第48页 |
4.4 结果与分析 | 第48-53页 |
4.4.1 TRIM11的泛素化能力在调控细胞增殖和凋亡中的作用 | 第49-50页 |
4.4.2 TRIM11对MCL1蛋白水平的影响 | 第50-51页 |
4.4.3 TRIM11对MCL1半衰期的影响 | 第51-53页 |
4.4.4 TRIM11对MCL1泛素化水平的影响 | 第53页 |
4.5 讨论 | 第53-54页 |
4.6 小结 | 第54-56页 |
5 TRIM11对线粒体功能的影响 | 第56-61页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 仪器与试剂 | 第56页 |
5.2.1 仪器 | 第56页 |
5.2.2 试剂 | 第56页 |
5.3 实验方法 | 第56页 |
5.3.1 JC-1检测线粒体膜电位 | 第56页 |
5.3.2 线粒体分离与提取 | 第56页 |
5.3.3 Western Blotting | 第56页 |
5.4 结果与分析 | 第56-59页 |
5.4.1 JC-1探针检测TRIM11对细胞线粒体膜电位的影响 | 第56-58页 |
5.4.2 线粒体分离纯化和蛋白检测 | 第58-59页 |
5.5 讨论 | 第59-60页 |
5.6 小结 | 第60-61页 |
6 结论与展望 | 第61-63页 |
6.1 结论 | 第61页 |
6.2 创新点 | 第61-62页 |
6.3 展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |