| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要缩略语英文索引 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-18页 |
| 第二章 实验材料 | 第18-22页 |
| 1. 实验动物 | 第18页 |
| 2. 菌株和质粒 | 第18页 |
| 3. 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 4. 主要实验试剂及试剂盒 | 第19-22页 |
| 第三章 实验方法 | 第22-38页 |
| 1. TpDNA提取 | 第22页 |
| 2. tp0664全基因序列扩增 | 第22-23页 |
| 3. pET28a-Tp0664原核表达载体的构建与鉴定 | 第23-26页 |
| 4. Tp0664重组蛋白的表达与鉴定 | 第26-27页 |
| 5. 重组蛋白Tp0664的Western bloting鉴定 | 第27-28页 |
| 6. 重组蛋白Tp0664纯化以及浓度测定 | 第28-29页 |
| 7. 重组蛋白Tp0664免疫新西兰兔后检测抗体效价 | 第29-30页 |
| 8. 重组蛋白Tp0664去除内毒素后的内毒素浓度测定 | 第30-31页 |
| 9. THP-1 细胞培养 | 第31页 |
| 10. 重组蛋白Tp0664刺激实验 | 第31页 |
| 11. Western bloting检测蛋白表达以及激酶磷酸化水平 | 第31-32页 |
| 12. 瞬时转染与RNA干扰 | 第32-33页 |
| 13. DN-TLR2、DN-TLR6和DN-MyD88扩增与转染 | 第33-34页 |
| 14. RT-PCR检测IL-6 mRNA转录 | 第34-36页 |
| 15. ELISA检测IL-6 分泌 | 第36页 |
| 16. MAPKs和NF-κB抑制剂下调Tp0664诱导THP-1 细胞分泌IL-6 | 第36-37页 |
| 17. 免疫荧光检测p65核转位 | 第37页 |
| 18. 统计学分析 | 第37-38页 |
| 第四章 实验结果 | 第38-60页 |
| 1. tp0664基因的PCR扩增 | 第38页 |
| 2. pET28a-Tp0664原核表达载体的PCR鉴定 | 第38页 |
| 3. pET28a-Tp0664重组质粒的测序鉴定 | 第38-39页 |
| 4. pET28a-Tp0664重组质粒诱导表达条件的优化 | 第39-41页 |
| 5. His-tagged Tp0664蛋白的表达与纯化 | 第41-42页 |
| 6. 重组蛋白Tp0664的Western bloting鉴定 | 第42页 |
| 7. 重组蛋白Tp0664浓度测定 | 第42-43页 |
| 8. ELISA检测重组蛋白Tp0664免疫后的兔血清抗体效价 | 第43页 |
| 9. 重组蛋白Tp0664内毒素的测定 | 第43-44页 |
| 10. 重组蛋白Tp0664刺激THP-1 细胞后mRNA完整性鉴定 | 第44-45页 |
| 11. 重组蛋白Tp0664诱导THP-1 细胞表达IL-6 mRNA | 第45-47页 |
| 12. 重组蛋白Tp0664诱导THP-1 细胞分泌IL-6 | 第47页 |
| 13. Tp0664诱导THP-1 细胞活化ERK1/2、p38和NF-κB | 第47-49页 |
| 14. ERK1/2、p38和NF-κB特异性抑制剂抑制Tp0664诱导THP-1细胞分泌IL-6 | 第49-53页 |
| 15. ERK1/2、p38和NF-κB特异性抑制剂抑制Tp0664诱导其磷酸化 | 第53-54页 |
| 16. DN-MyD88阻断Tp0664诱导THP-1 细胞分泌IL-6 | 第54-55页 |
| 17. DN-TLR2阻断Tp0664诱导THP-1 细胞分泌IL-6 | 第55-56页 |
| 18. DN-TLR2抑制THP-1 细胞ERK1/2、p38和NF-κB磷酸化 | 第56-57页 |
| 19. NF-κB抑制剂BAY11-7082抑制THP-1 细胞p65核转位 | 第57-60页 |
| 第五章 讨论 | 第60-64页 |
| 第六章 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 文献综述 | 第72-80页 |
| 参考文献 | 第76-80页 |
| 硕士期间科研成果 | 第80-82页 |
| 资助项目 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
