| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-22页 |
| 1.1 植酸酶及其分类 | 第11-13页 |
| 1.2 植酸酶来源 | 第13-14页 |
| 1.2.1 植物源植酸酶 | 第13页 |
| 1.2.2 动物源植酸酶 | 第13页 |
| 1.2.3 微生物源植酸酶 | 第13-14页 |
| 1.3 提高植酸酶产率的策略 | 第14-15页 |
| 1.3.1 菌种的诱变 | 第14页 |
| 1.3.2 基因工程菌 | 第14-15页 |
| 1.3.3 原生质体融合技术 | 第15页 |
| 1.4 植酸酶分离纯化技术 | 第15-17页 |
| 1.4.1 预处理和浓缩 | 第15-17页 |
| 1.4.2 层析纯化 | 第17页 |
| 1.4.3 植酸酶的固定化 | 第17页 |
| 1.5 植酸酶的国内外市场状况及其应用研究 | 第17-20页 |
| 1.5.1 植酸酶的国内外市场状况 | 第17-18页 |
| 1.5.2 饲料工业中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5.3 食品工业中的应用 | 第19页 |
| 1.5.4 作为土壤改良剂 | 第19页 |
| 1.5.5 促进植物生长中的应用 | 第19-20页 |
| 1.5.6 其他应用领域 | 第20页 |
| 1.6 前景与展望 | 第20页 |
| 1.7 本文的研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 2 青藏高原土壤产植酸酶微生物的分离筛选及鉴定 | 第22-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-25页 |
| 2.1.1 土壤样品的采集 | 第22-23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第23页 |
| 2.1.4 菌种的分离与筛选 | 第23-24页 |
| 2.1.5 磷标准曲线的制备 | 第24页 |
| 2.1.6 植酸酶酶活的测定 | 第24页 |
| 2.1.7 产植酸酶微生物的DNA提取 | 第24页 |
| 2.1.8 16S rRNA基因序列及 18S rRNA基因序列的PCR扩增与测序 | 第24-25页 |
| 2.2 实验结果 | 第25-31页 |
| 2.2.1 磷标准曲线的绘制 | 第25-26页 |
| 2.2.2 产植酸酶菌株的筛选 | 第26-27页 |
| 2.2.3 产植酸酶菌株的分子鉴定 | 第27-31页 |
| 3 植酸酶的纯化及其酶学性质研究 | 第31-42页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-33页 |
| 3.1.1 试剂 | 第31页 |
| 3.1.2 供试饲料原料 | 第31页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.4 产植酸酶微生物的生长曲线及酶活的测定 | 第32页 |
| 3.1.5 植酸酶的初步纯化 | 第32页 |
| 3.1.6 植酸酶酶学性质研究 | 第32-33页 |
| 3.1.7 无机磷含量的测定 | 第33页 |
| 3.1.8 饲料原料中总磷含量的测定 | 第33页 |
| 3.1.9 植酸磷降解率的测定 | 第33页 |
| 3.2 实验结果 | 第33-42页 |
| 3.2.1 菌株的生长及产酶曲线 | 第33-34页 |
| 3.2.2 植酸酶粗提液的硫酸铵分级沉淀 | 第34-37页 |
| 3.2.3 植酸酶的最适pH及稳定性 | 第37页 |
| 3.2.4 植酸酶的最适温度及热稳定性 | 第37-38页 |
| 3.2.5 金属离子对植酸酶酶活的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.6 胰蛋白酶和胃蛋白酶对植酸酶酶活的影响 | 第39页 |
| 3.2.7 样品原料中磷含量分析 | 第39-40页 |
| 3.2.8 原料中植酸磷降解效率分析 | 第40-42页 |
| 4 菌株Penicillium glabrum的复合诱变 | 第42-48页 |
| 4.1 材料与方法 | 第42-43页 |
| 4.1.1 诱变菌株 | 第42页 |
| 4.1.2 培养基 | 第42页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 4.1.4 诱变方法 | 第42-43页 |
| 4.2 实验结果 | 第43-48页 |
| 4.2.1 P. glabrum的紫外诱变 | 第43页 |
| 4.2.2 P. glabrum的EMS诱变 | 第43-44页 |
| 4.2.3 P. glabrum E1的产酶稳定性 | 第44-45页 |
| 4.2.4 P. glabrum E1的生长曲线及液态发酵特征 | 第45-48页 |
| 5 菌株Penicillium glabrum E1产植酸酶发酵工艺优化 | 第48-58页 |
| 5.1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 5.1.1 菌株 | 第48页 |
| 5.1.2 培养基 | 第48页 |
| 5.1.3 培养基实验方法 | 第48-50页 |
| 5.2 实验结果 | 第50-58页 |
| 5.2.1 单因素实验 | 第50-51页 |
| 5.2.2 Plackett-Burman试验优化 | 第51-53页 |
| 5.2.3 Box-Behnken试验优化 | 第53-55页 |
| 5.2.4 响应面优化及分析 | 第55-58页 |
| 6 讨论与结论 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 攻读学位期间的研究成果与参与项目 | 第73页 |
