| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 结直肠癌概况 | 第9页 |
| 1.2 肿瘤耐药 | 第9-10页 |
| 1.3 Micro RNAs | 第10-12页 |
| 1.3.1 miRNA与肿瘤 | 第11页 |
| 1.3.2 miRNA与肿瘤耐药 | 第11-12页 |
| 1.3.3 miRNA在肿瘤诊疗中的应用 | 第12页 |
| 1.4 miR1395p与肿瘤研究进展 | 第12-14页 |
| 1.4.1 miR1395p与肿瘤增殖 | 第12-13页 |
| 1.4.2 miR1395p与肿瘤细胞周期 | 第13页 |
| 1.4.3 miR1395p与肿瘤细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.4.4 miR1395p与肿瘤迁移及侵袭 | 第13-14页 |
| 1.4.5 miR1395p与肿瘤耐药 | 第14页 |
| 1.5 本课题研究的意义 | 第14页 |
| 1.6 本课题研究的内容 | 第14-16页 |
| 第二章 miR1395p对结直肠癌细胞耐受 5-FU的影响 | 第16-28页 |
| 2.1 引言 | 第16页 |
| 2.2 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.2.1 结直肠癌组织 | 第16页 |
| 2.2.2 实验细胞株 | 第16-17页 |
| 2.2.3 主要实验材料 | 第17页 |
| 2.2.4 主要实验仪器 | 第17-18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.3.1 结直肠癌组织收集及病理信息处理 | 第18页 |
| 2.3.2 细胞培养及传代 | 第18页 |
| 2.3.3 细胞冻存及复苏 | 第18-19页 |
| 2.3.4 耐药细胞的诱导 | 第19页 |
| 2.3.5 TRIzol法提取组织或细胞中的RNA | 第19页 |
| 2.3.6 将RNA逆转录成cDNA | 第19-20页 |
| 2.3.7 探针法qPCR检测miR1395p的表达 | 第20页 |
| 2.3.8 慢病毒载体包装 | 第20-21页 |
| 2.3.9 慢病毒感染 | 第21页 |
| 2.3.10 CCK-8 检测药敏 | 第21页 |
| 2.3.11 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第21-22页 |
| 2.3.12 数据统计分析 | 第22页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第22-26页 |
| 2.4.1 诱导 5-FU耐药结直肠癌细胞 | 第22-23页 |
| 2.4.2 构建miR1395p过表达结直肠癌细胞株 | 第23页 |
| 2.4.3 -FU化疗后的结直肠癌组织或细胞中miR1395p的表达 | 第23-24页 |
| 2.4.4 miR1395p对结直肠癌细胞耐受 5-FU的影响 | 第24-26页 |
| 2.4.5 miR1395p对 5-FU诱导的结直肠癌细胞凋亡的影响 | 第26页 |
| 2.5 本章小结 | 第26-28页 |
| 第三章 miR1395p影响结直肠癌细胞对 5-FU耐受性的机制研究 | 第28-41页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 实验材料 | 第28-30页 |
| 3.2.1 实验细胞株 | 第28页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.2.3 引物及si RN A序列 | 第29-30页 |
| 3.2.4 主要实验仪器 | 第30页 |
| 3.3 实验方法 | 第30-35页 |
| 3.3.1 Western Blot相关试剂的配置 | 第30-31页 |
| 3.3.2 质粒转化感受态大肠杆菌 | 第31页 |
| 3.3.3 大肠杆菌挑克隆实验 | 第31页 |
| 3.3.4 质粒抽提 | 第31-32页 |
| 3.3.5 荧光素酶报告基因实验 | 第32页 |
| 3.3.6 细胞转染实验 | 第32页 |
| 3.3.7 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 3.3.8 CCK-8 实验 | 第33页 |
| 3.3.9 蛋白提取与浓度测定 | 第33-34页 |
| 3.3.10 免疫印迹 | 第34-35页 |
| 3.3.11 数据统计分析 | 第35页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第35-40页 |
| 3.4.1 miR1395p靶向NOTCH-1 的 3’UTR抑制其表达 | 第35-36页 |
| 3.4.2 miR1395p通过NOTCH-1 影响结直肠癌细胞对 5-FU的耐受性 | 第36-37页 |
| 3.4.3 miR1395p抑制NOTCH-1 下游分子MRP-1 和BCL-2 的表达 | 第37-39页 |
| 3.4.4 miR1395p/NOTCH-1 通路逆转结直肠癌细胞对 5-FU的耐药 | 第39-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-42页 |
| 主要结论 | 第41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |
