中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
中英缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-18页 |
1.1 甲状旁腺(Parathyroid glands ,PTG) | 第10-15页 |
1.1.1 甲状旁腺细胞 | 第10-11页 |
1.1.2 甲状旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH) | 第11页 |
1.1.3 甲状旁腺功能减退症(Hypoparathyroidism,HPT) | 第11-15页 |
1.2 骨髓间充质干细胞( Bone mesenchymal stem cell, BMSCs) | 第15-18页 |
1.2.1 骨髓间充质干细胞的生物学特性 | 第15-16页 |
1.2.2 BMSCs的分化研究 | 第16-18页 |
第2章 材料与试剂 | 第18-32页 |
2.1 主要材料及试剂 | 第18-19页 |
2.2 仪器设备和产地 | 第19-20页 |
2.3 细胞的分离和培养 | 第20-24页 |
2.3.1 实验动物 | 第20页 |
2.3.2 细胞培养常用液体的配制 | 第20页 |
2.3.3 SD大鼠甲状旁腺细胞的分离与培养 | 第20-21页 |
2.3.4 SD大鼠的BMSCs的分离与培养 | 第21页 |
2.3.5 甲状旁腺细胞及BMSCs的传代 | 第21-22页 |
2.3.6 甲状旁腺细胞及BMSCs的冻存 | 第22页 |
2.3.7 甲状旁腺细胞及BMSCs的复苏 | 第22-23页 |
2.3.8 甲状旁腺细胞培养液的制备 | 第23页 |
2.3.9 BMSCs的鉴定 | 第23-24页 |
2.4 RT-PCR方法检测PTH、GCM2、CASR m RNA的表达 | 第24-26页 |
2.4.1 经甲状旁腺细胞培养液培养后的BMSCs总RNA的提取 | 第24页 |
2.4.2 提取的总RNA质量、浓度检测与标化 | 第24页 |
2.4.3 RNA的逆转录反应(RT) | 第24-25页 |
2.4.4. 半定量RT-PCR反应 | 第25-26页 |
2.5 Western blot技术检测PTH、GCM2、CASR蛋白的表达 | 第26-32页 |
2.5.1 常用液体配制 | 第26-28页 |
2.5.2 细胞总蛋白的提取 | 第28-29页 |
2.5.3 组织总蛋白浓度测定(BCA试剂盒) | 第29页 |
2.5.4 细胞蛋白样品的预处理 | 第29页 |
2.5.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAg E) | 第29-31页 |
2.5.6 Western Blot检测 | 第31-32页 |
第3章 结果 | 第32-36页 |
3.1 SD大鼠甲状旁腺细胞的分离及培养 | 第32页 |
3.2 SD大鼠BMSCs的分离及培养 | 第32-33页 |
3.3 流式细胞仪检测SD大鼠BMSCs的纯度 | 第33-34页 |
3.4 RT-PCR方法检测PTH、GCM2、CASR的表达 | 第34-35页 |
3.5 WB检测PTH、GCM2、CASR蛋白表达情况 | 第35-36页 |
第4章 讨论 | 第36-38页 |
4.1 骨髓间充质干细胞的分离培养 | 第36页 |
4.2 甲状旁腺细胞的表面标志物 | 第36-38页 |
第5章 结论 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
综述 甲状旁腺及甲状旁腺素的作用机制 | 第45-51页 |
参考文献 | 第51页 |