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大鼠骨髓间充质干细胞向甲状旁腺细胞定向分化的体外研究

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
中英缩略词表第9-10页
第1章 引言第10-18页
    1.1 甲状旁腺(Parathyroid glands ,PTG)第10-15页
        1.1.1 甲状旁腺细胞第10-11页
        1.1.2 甲状旁腺激素(Parathyroid hormone,PTH)第11页
        1.1.3 甲状旁腺功能减退症(Hypoparathyroidism,HPT)第11-15页
    1.2 骨髓间充质干细胞( Bone mesenchymal stem cell, BMSCs)第15-18页
        1.2.1 骨髓间充质干细胞的生物学特性第15-16页
        1.2.2 BMSCs的分化研究第16-18页
第2章 材料与试剂第18-32页
    2.1 主要材料及试剂第18-19页
    2.2 仪器设备和产地第19-20页
    2.3 细胞的分离和培养第20-24页
        2.3.1 实验动物第20页
        2.3.2 细胞培养常用液体的配制第20页
        2.3.3 SD大鼠甲状旁腺细胞的分离与培养第20-21页
        2.3.4 SD大鼠的BMSCs的分离与培养第21页
        2.3.5 甲状旁腺细胞及BMSCs的传代第21-22页
        2.3.6 甲状旁腺细胞及BMSCs的冻存第22页
        2.3.7 甲状旁腺细胞及BMSCs的复苏第22-23页
        2.3.8 甲状旁腺细胞培养液的制备第23页
        2.3.9 BMSCs的鉴定第23-24页
    2.4 RT-PCR方法检测PTH、GCM2、CASR m RNA的表达第24-26页
        2.4.1 经甲状旁腺细胞培养液培养后的BMSCs总RNA的提取第24页
        2.4.2 提取的总RNA质量、浓度检测与标化第24页
        2.4.3 RNA的逆转录反应(RT)第24-25页
        2.4.4. 半定量RT-PCR反应第25-26页
    2.5 Western blot技术检测PTH、GCM2、CASR蛋白的表达第26-32页
        2.5.1 常用液体配制第26-28页
        2.5.2 细胞总蛋白的提取第28-29页
        2.5.3 组织总蛋白浓度测定(BCA试剂盒)第29页
        2.5.4 细胞蛋白样品的预处理第29页
        2.5.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAg E)第29-31页
        2.5.6 Western Blot检测第31-32页
第3章 结果第32-36页
    3.1 SD大鼠甲状旁腺细胞的分离及培养第32页
    3.2 SD大鼠BMSCs的分离及培养第32-33页
    3.3 流式细胞仪检测SD大鼠BMSCs的纯度第33-34页
    3.4 RT-PCR方法检测PTH、GCM2、CASR的表达第34-35页
    3.5 WB检测PTH、GCM2、CASR蛋白表达情况第35-36页
第4章 讨论第36-38页
    4.1 骨髓间充质干细胞的分离培养第36页
    4.2 甲状旁腺细胞的表面标志物第36-38页
第5章 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-45页
综述 甲状旁腺及甲状旁腺素的作用机制第45-51页
    参考文献第51页

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