摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第11-17页 |
1.1 软骨内骨化 | 第11-13页 |
1.1.1 软骨内骨化过程简介 | 第11-12页 |
1.1.2 软骨细胞肥大化过程的调控 | 第12-13页 |
1.1.3 软骨细胞肥大化异常引发的相关疾病 | 第13页 |
1.2 MicroRNAs与软骨发育 | 第13-16页 |
1.2.1 MicroRNAs简介 | 第13-14页 |
1.2.2 MiRNAs与软骨发育调控 | 第14-15页 |
1.2.3 MiR-27b与软骨分化 | 第15-16页 |
1.3 PPAR-γ 与软骨分化 | 第16-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-31页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 实验仪器和设备 | 第17-18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
2.1.4 实验动物 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-31页 |
2.2.1 大鼠膝关节软骨组织学染色 | 第20-21页 |
2.2.2 原位杂交 | 第21-22页 |
2.2.3 软骨细胞分离培养 | 第22页 |
2.2.4 RT-PCR及RT-qPCR | 第22-27页 |
2.2.5 双荧光素酶报告基因实验 | 第27-29页 |
2.2.6 细胞转染 | 第29页 |
2.2.7 Western blot | 第29-30页 |
2.2.8 统计学分析 | 第30-31页 |
第3章 实验结果 | 第31-38页 |
3.1 大乳鼠膝关节软骨相关基因及miR-27b表达情况 | 第31-33页 |
3.1.1 大乳鼠膝关节软骨形态学特点 | 第31页 |
3.1.2 大乳鼠膝关节软骨组织相关基因表达情况 | 第31-32页 |
3.1.3 大乳鼠膝关节软骨组织miR-27b表达及分布情况 | 第32-33页 |
3.2 MiR-27b靶点预测 | 第33-34页 |
3.2.1 MiR-27b靶点生物信息学预测 | 第33页 |
3.2.2 双荧光素酶报告基因实验 | 第33-34页 |
3.3 Mi R-27b过表达干预实验 | 第34-38页 |
3.3.1 Mimics最佳转染浓度筛选 | 第34-35页 |
3.3.2 上调miR-27b后软骨细胞转分化现象 | 第35-36页 |
3.3.3 上调miR-27b对肥大化软骨细胞相关基因表达的影响 | 第36-37页 |
3.3.4 上调miR-27b对肥大化软骨细胞相关蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
第4章 讨论 | 第38-43页 |
第5章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
作者简介和科研成果 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |