摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
引言 | 第11-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-19页 |
第1章 Lp-PLA_2研究概述 | 第12-15页 |
1.1 Lp-PLA_2概述 | 第12-13页 |
1.2 Lp-PLA_2与动脉粥样硬化 | 第13-15页 |
第2章 VEGF研究概述 | 第15-19页 |
2.1 VEGF概述 | 第15页 |
2.2 VEGF与动脉粥样硬化 | 第15-17页 |
2.3 VEGF相关的信号通路 | 第17-19页 |
2.3.1 低氧诱导因子(HIF-1)促进VEGF的表达 | 第17-18页 |
2.3.2 mTOR通路促进VEGF的表达 | 第18-19页 |
第二篇 研究内容 | 第19-54页 |
第1章 Lp-PLA_2促进VEGF的表达 | 第19-31页 |
1.1 材料 | 第19-20页 |
1.1.1 实验动物及采样 | 第19页 |
1.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
1.2 方法 | 第20-24页 |
1.2.1 外周血单核细胞及血浆的分离 | 第20页 |
1.2.2 Elisa检测VEGF浓度及炎症因子 | 第20-21页 |
1.2.3 Lp-PLA_2活性测定试剂盒检测血浆中的Lp-PLA_2酶活 | 第21页 |
1.2.4 荧光定量PCR检测猪单核细胞及主动脉中VEGF和Lp-PLA_2的表达 | 第21-23页 |
1.2.5 Western Blot检测猪胸主动脉中Lp-PLA_2和VEGF蛋白水平 | 第23-24页 |
1.3 结果 | 第24-30页 |
1.3.1 小鼠、兔和猪中Lp-PLA_2与VEGF表达的相关性 | 第24-25页 |
1.3.2 Lp-PLA_2转基因猪中Lp-PLA_2与VEGF表达的相关性 | 第25-28页 |
1.3.3 在hFat-1 转基因猪中Lp-PLA_2和VEGF以及炎症因子的表达 | 第28-30页 |
1.4 讨论 | 第30页 |
1.5 小结 | 第30-31页 |
第2章 Lp-PLA_2通过HIF1α 及mTORC1信号通路调节VEGF | 第31-47页 |
2.1 材料 | 第31-32页 |
2.1.1 细胞 | 第31页 |
2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
2.2 方法 | 第32-34页 |
2.2.1 细胞培养及处理 | 第32页 |
2.2.2 过表达Lp-PLA_2 HUVEC细胞系的构建 | 第32-33页 |
2.2.3 Elisa检测细胞上清VEGF浓度 | 第33页 |
2.2.4 荧光定量PCR检测 | 第33页 |
2.2.5 Western blot检测 | 第33页 |
2.2.6 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第33-34页 |
2.2.7 双荧光素酶报告基因检测 | 第34页 |
2.2.8 统计学分析方法 | 第34页 |
2.3 结果 | 第34-45页 |
2.3.1 HUVECs中过表达Lp-PLA_2后VEGF及其相关基因的变化 | 第34-36页 |
2.3.2 过表达Lp-PLA_2的HUVEC细胞系的构建 | 第36-38页 |
2.3.3 Lp-PLA_2增强HUVECs中HIF-1α 的表达从而激活VEGF信号通路 | 第38-41页 |
2.3.4 mTORC1信号参与Lp-PLA_2引起的VEGF激活 | 第41-45页 |
2.4 讨论 | 第45-46页 |
2.5 小结 | 第46-47页 |
第3章 Lp-PLA_2促进HUVECs的细胞迁移和血管生成 | 第47-54页 |
3.1 材料 | 第47页 |
3.1.1 实验动物 | 第47页 |
3.1.2 主要试剂 | 第47页 |
3.2 方法 | 第47-48页 |
3.2.1 迁移实验 | 第47页 |
3.2.2 体外血管生成测定 | 第47-48页 |
3.2.3 体内血管生成测定 | 第48页 |
3.3 结果 | 第48-52页 |
3.3.1 Lp-PLA_2对内皮细胞迁移的影响 | 第48-50页 |
3.3.2 Lp-PLA_2对内皮细胞体内和体外血管生成的影响 | 第50-52页 |
3.4 讨论 | 第52-53页 |
3.5 小结 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
导师简介 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及其他成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |