摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
前言 | 第9-10页 |
综述 | 第10-14页 |
第1章 材料与方法 | 第14-24页 |
1.1 材料 | 第14-15页 |
1.1.1 随机寡核苷酸文库及上下游引物 | 第14页 |
1.1.2 细胞株及菌株 | 第14页 |
1.1.3 试剂及工具酶 | 第14页 |
1.1.4 主要仪器 | 第14-15页 |
1.1.5 常用试剂配制 | 第15页 |
1.2 方法 | 第15-24页 |
1.2.1 膀胱癌T24的复苏、换液、传代及冻存 | 第15-16页 |
1.2.2 PCR扩增条件的优化 | 第16-17页 |
1.2.3 膀胱癌T24单细胞悬液的制备 | 第17-18页 |
1.2.4 直接不对称PCR法及超滤离心法制备初级筛选文库 | 第18页 |
1.2.5 次级文库的制备与筛选 | 第18-19页 |
1.2.6 正常人尿路上皮细胞的反筛 | 第19页 |
1.2.7 运用流式细胞技术检测不同筛选轮次ssDNA的亲和力 | 第19-20页 |
1.2.8 目的片段的回收及纯化 | 第20页 |
1.2.9 目的DNA的克隆与测序 | 第20-23页 |
1.2.10 适配子二级结构分析 | 第23-24页 |
第2章 实验结果 | 第24-40页 |
2.1 膀胱癌细胞的培养 | 第24页 |
2.2 PCR反应条件的优化 | 第24-26页 |
2.2.1 普通对称PCR反应条件优化结果 | 第24-26页 |
2.2.2 不对称PCR反应条件优化结果 | 第26页 |
2.3 运用流式细胞技术对不同筛选轮次ssDNA的亲和力检测结果 | 第26-28页 |
2.4 目的 DNA 的纯化及回收结果 | 第28-29页 |
2.5 重组质粒的转化结果 | 第29-30页 |
2.6 重组质粒的酶切鉴定 | 第30-32页 |
2.7 重组质粒的PCR反应鉴定 | 第32页 |
2.8 目的DNA片段的测序 | 第32-37页 |
2.9 适配子二级结构的预测 | 第37-40页 |
第3章 讨论 | 第40-44页 |
第4章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |