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运用SELEX技术在体外进行膀胱癌T24细胞适配子筛选方法的建立

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
前言第9-10页
综述第10-14页
第1章 材料与方法第14-24页
    1.1 材料第14-15页
        1.1.1 随机寡核苷酸文库及上下游引物第14页
        1.1.2 细胞株及菌株第14页
        1.1.3 试剂及工具酶第14页
        1.1.4 主要仪器第14-15页
        1.1.5 常用试剂配制第15页
    1.2 方法第15-24页
        1.2.1 膀胱癌T24的复苏、换液、传代及冻存第15-16页
        1.2.2 PCR扩增条件的优化第16-17页
        1.2.3 膀胱癌T24单细胞悬液的制备第17-18页
        1.2.4 直接不对称PCR法及超滤离心法制备初级筛选文库第18页
        1.2.5 次级文库的制备与筛选第18-19页
        1.2.6 正常人尿路上皮细胞的反筛第19页
        1.2.7 运用流式细胞技术检测不同筛选轮次ssDNA的亲和力第19-20页
        1.2.8 目的片段的回收及纯化第20页
        1.2.9 目的DNA的克隆与测序第20-23页
        1.2.10 适配子二级结构分析第23-24页
第2章 实验结果第24-40页
    2.1 膀胱癌细胞的培养第24页
    2.2 PCR反应条件的优化第24-26页
        2.2.1 普通对称PCR反应条件优化结果第24-26页
        2.2.2 不对称PCR反应条件优化结果第26页
    2.3 运用流式细胞技术对不同筛选轮次ssDNA的亲和力检测结果第26-28页
    2.4 目的 DNA 的纯化及回收结果第28-29页
    2.5 重组质粒的转化结果第29-30页
    2.6 重组质粒的酶切鉴定第30-32页
    2.7 重组质粒的PCR反应鉴定第32页
    2.8 目的DNA片段的测序第32-37页
    2.9 适配子二级结构的预测第37-40页
第3章 讨论第40-44页
第4章 结论第44-45页
参考文献第45-47页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第47-48页
致谢第48-49页

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