| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-18页 |
| 第二章 实验材料与仪器 | 第18-22页 |
| 2.1 细胞株 | 第18页 |
| 2.2 动物 | 第18页 |
| 2.3 试剂 | 第18-19页 |
| 2.4 溶液配制 | 第19-20页 |
| 2.5 仪器 | 第20-22页 |
| 第三章 实验方法 | 第22-29页 |
| 3.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 3.1.1 J774A.1 细胞冻存 | 第22页 |
| 3.1.2 J774A.1 细胞复苏 | 第22页 |
| 3.1.3 J774A.1 细胞培养 | 第22页 |
| 3.1.4 pMac细胞提取 | 第22-23页 |
| 3.1.5 BMDM细胞提取 | 第23页 |
| 3.2 LPS刺激时间优化 | 第23-25页 |
| 3.2.1 细胞准备 | 第23页 |
| 3.2.2 LPS刺激 | 第23页 |
| 3.2.3 蛋白提取 | 第23-24页 |
| 3.2.4 蛋白免疫检测 | 第24-25页 |
| 3.3 LPS刺激浓度优化 | 第25页 |
| 3.3.1 细胞准备 | 第25页 |
| 3.3.2 LPS刺激 | 第25页 |
| 3.3.3 蛋白提取 | 第25页 |
| 3.3.4 蛋白免疫检测 | 第25页 |
| 3.3.5 统计分析 | 第25页 |
| 3.4 NIK SIRNA干扰J774A.1 对NIK、MEKK3蛋白表达影响 | 第25-26页 |
| 3.4.1 细胞准备 | 第25-26页 |
| 3.4.2 电穿孔转染 | 第26页 |
| 3.4.3 LPS刺激 | 第26页 |
| 3.4.4 蛋白提取及western-blot检测 | 第26页 |
| 3.5 NIK SIRNA干扰对PMAC细胞因子IL-1Β、IL-6、TNFΑ 分泌影响 | 第26-28页 |
| 3.5.1 细胞准备 | 第26-27页 |
| 3.5.2 电穿孔转染 | 第27页 |
| 3.5.3 LPS刺激 | 第27页 |
| 3.5.4 培养液收集 | 第27页 |
| 3.5.5 ELISA检测细胞因子IL-1β、IL-6、TNFα | 第27页 |
| 3.5.6 统计分析 | 第27-28页 |
| 3.6 NIK SIRNA干扰BMDM细胞TNFΑ 分泌的影响 | 第28-29页 |
| 3.6.1 细胞准备 | 第28页 |
| 3.6.2 电穿孔转染 | 第28页 |
| 3.6.3 LPS刺激 | 第28页 |
| 3.6.4 培养液收集 | 第28页 |
| 3.6.5 ELISA检测细胞因子TNFα | 第28页 |
| 3.6.6 统计分析 | 第28-29页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第29-45页 |
| 4.1 J774A.1 细胞培养结果 | 第29-30页 |
| 4.2 LPS刺激时间优化结果 | 第30-31页 |
| 4.3 LPS刺激浓度优化结果 | 第31页 |
| 4.4 NIK SIRNA干扰对NIK、MEKK3蛋白表达影响 | 第31-34页 |
| 4.5 NIK SIRNA干扰对PMAC细胞因子IL-1Β、IL-6、TNFΑ 分泌影响 | 第34-36页 |
| 4.6 NIK SIRNA干扰BMDM细胞TNFΑ 分泌的影响 | 第36-38页 |
| 4.7 讨论 | 第38-43页 |
| 4.8 结论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
