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致病杆菌(Xenorhabdus ehlersii)XeGroEL蛋白对大蜡螟免疫反应影响的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 文献综述第16-31页
   ·昆虫病原线虫-共生菌复合体第16-19页
     ·昆虫病原线虫第16-17页
     ·昆虫病原线虫-共生菌的生活史第17页
     ·昆虫病原线虫-细菌的共生关系第17-18页
     ·共生菌第18-19页
   ·昆虫免疫第19-24页
     ·体液免疫第21-23页
     ·细胞免疫第23-24页
   ·昆虫病原线虫-共生菌复合体与昆虫免疫系统的相互作用第24-26页
     ·昆虫病原线虫与昆虫免疫第24-25页
     ·共生菌与昆虫免疫第25-26页
   ·共生菌产生的毒素因子第26-29页
     ·发光杆菌产生的毒素因子第26-27页
     ·致病杆菌产生的毒素因子第27-29页
   ·研究背景和意义第29页
   ·实验设计和技术路线第29-31页
第二章 致病杆菌(Xenorhabdus ehlersii)毒性蛋白的纯化与鉴定第31-41页
   ·材料和方法第31-35页
     ·供试菌株及昆虫第31页
     ·主要试剂和仪器第31页
     ·共生菌胞内蛋白制备第31-32页
     ·不同菌株胞内蛋白的 Native-PAGE 及注射活性筛选第32页
     ·高活性菌株胞内蛋白的制备与纯化第32-33页
     ·活性蛋白对大蜡螟幼虫的毒性测定第33页
     ·纯化的毒性蛋白的质谱鉴定第33-35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·高注射活性胞内蛋白菌株的筛选第35-36页
     ·X.ehlersii 毒性蛋白的分离纯化第36-37页
     ·活性蛋白对大蜡螟幼虫的毒性第37-38页
     ·毒性蛋白的质谱鉴定第38-39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
第三章 XeGroEL 蛋白对大蜡螟血细胞、酶活性及中肠组织的影响第41-50页
   ·材料和方法第41-43页
     ·供试昆虫第41页
     ·主要试剂和仪器第41页
     ·XeGroEL 对大蜡螟血细胞数量的影响第41-42页
     ·XeGroEL 对大蜡螟血细胞包被作用的影响第42页
     ·XeGroEL 蛋白对大蜡螟血细胞吞噬作用的影响第42页
     ·XeGroEL 对大蜡螟血淋巴中多酚氧化酶(PO)的影响第42-43页
     ·XeGroEL 对大蜡螟谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的影响第43页
     ·XeGroEL 对大蜡螟中肠组织的影响第43页
   ·结果和分析第43-48页
     ·XeGroEL 对大蜡螟血细胞数量的影响第43-44页
     ·XeGroEL 蛋白对血细胞包被作用的影响第44-45页
     ·XeGroEL 蛋白对大蜡螟血细胞吞噬作用的影响第45-46页
     ·XeGroEL 对大蜡螟血淋巴中 PO 活性的影响第46页
     ·XeGroEL 对大蜡螟 GST 活性的影响第46-47页
     ·XeGroEL 对大蜡螟中肠组织的影响第47-48页
   ·讨论第48-49页
   ·小结第49-50页
第四章 XeGroEL 基因的克隆、表达及生物信息学分析第50-68页
   ·材料和方法第50-55页
     ·菌株和质粒第50页
     ·主要试剂和仪器第50页
     ·XeGroEL 基因的克隆第50-51页
     ·XeGroEL 原核表达载体的构建第51-53页
     ·XeGroEL 重组蛋白的诱导表达第53页
     ·XeGroEL 重组蛋白的纯化第53页
     ·XeGroEL 重组蛋白多克隆抗体的制备及特异性检测第53-55页
     ·XeGroEL 的生物信息学分析第55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·XeGroEL 基因的克隆第55-56页
     ·XeGroEL 原核表达载体的构建第56-57页
     ·XeGroEL 重组蛋白的诱导表达与纯化第57-59页
     ·XeGroEL 重组蛋白多克隆抗体制备和 Western Blotting 分析第59-61页
     ·XeGroEL 的生物信息学分析第61-66页
   ·讨论第66-67页
   ·小结第67-68页
第五章 XeGroEL 对大蜡螟蛋白质组和基因转录本的影响第68-87页
   ·材料和方法第68-77页
     ·供试昆虫第68页
     ·主要试剂和仪器第68页
     ·大蜡螟血淋巴蛋白的差异双向电泳分析第68-69页
     ·大蜡螟的总 RNA 的提取第69-70页
     ·第一链 cDNA 合成第70页
     ·免疫相关基因的荧光实时定量 PCR 分析第70-73页
     ·PGRP-LB 基因全长的克隆及功能分析第73-75页
     ·XeGroEL 蛋白在大蜡螟血淋巴中的互作蛋白研究第75-77页
   ·结果和分析第77-84页
     ·XeGroEL 免疫压力下大蜡螟血淋巴蛋白质组的变化第77-79页
     ·大蜡螟幼虫总 RNA 的提取第79-80页
     ·XeGroEL 蛋白免疫下大蜡螟相关基因的转录本变化第80-81页
     ·PGRP-LB 基因全长的克隆和序列分析第81-84页
     ·XeGroEL 在大蜡螟血淋巴中的互作蛋白第84页
   ·讨论第84-86页
   ·小结第86-87页
第六章 全文结论第87-88页
参考文献第88-102页
附录第102-106页
致谢第106-107页
作者简历第107页

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