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人巨细胞病毒UL70和UL35蛋白与宿主因子相互作用的研究

论文创新点第5-6页
目录第6-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-37页
    1.1 人巨细胞病毒概述第13-15页
    1.2 人巨细胞病毒基因及其表达调控第15-22页
        1.2.1 立即早期基因及表达调控第16-20页
        1.2.2 早期基因及表达调控第20-21页
        1.2.3 晚期基因及表达调控第21-22页
    1.3 人巨细胞病毒潜伏和裂解感染第22-30页
        1.3.1 人巨细胞病毒的潜伏与激活第22-25页
        1.3.2 人巨细胞病毒基因组复制第25-28页
        1.3.3 人巨细胞病毒与ND10结构第28-30页
    1.4 人巨细胞病毒与免疫应答第30-33页
        1.4.1 先天性免疫第31页
        1.4.2 获得性免疫第31-32页
        1.4.3 免疫逃逸第32-33页
    1.5 人巨细胞病毒相关疾病第33-35页
    1.6 人巨细胞病毒预防和治疗第35-37页
第二章 材料与方法第37-55页
    2.1 实验仪器和设备第37页
    2.2 实验试剂和材料第37-38页
        2.2.1 分子生物学第37-38页
        2.2.2 细胞实验相关第38页
        2.2.3 蛋白分析相关第38页
    2.3 常规分子克隆实验第38-41页
        2.3.1 化转感受态制备与使用第38-40页
        2.3.2 碱裂解法提取质粒第40页
        2.3.3 PCR和限制性内切酶第40-41页
        2.3.4 DNA的回收和纯化第41页
        2.3.5 抗生素的配制第41页
    2.4 酵母双杂交实验第41-43页
        2.4.1 试剂准备第41-42页
        2.4.2 酵母转化第42页
        2.4.3 酵母四缺筛选第42页
        2.4.4 X-gal显色实验第42-43页
    2.5 细胞相关实验第43-47页
        2.5.1 细胞传代培养第43-44页
        2.5.2 磷酸钙转染法第44页
        2.5.3 脂质体转染法第44-45页
        2.5.4 细胞收获方法第45页
        2.5.5 稳转细胞系筛选第45-46页
        2.5.6 细胞总RNA提取第46页
        2.5.7 细胞基因组DNA提取第46-47页
    2.6 蛋白质相关实验第47-51页
        2.6.1 PAGE电泳和Western blot第47-48页
        2.6.2 免疫共沉淀法第48页
        2.6.3 间接免疫荧光第48-49页
        2.6.4 核质分离实验第49页
        2.6.5 染色质免疫沉淀第49-51页
    2.7 病毒学相关实验第51-55页
        2.7.1 HCMV感染和扩增第51页
        2.7.2 HCMV滴度测定第51-52页
        2.7.3 HCMV BAC突变病毒第52-55页
第三章 HCMV复制蛋白UL70与宿主因子DNAJB6相互作用第55-69页
    3.1 研究背景第55-56页
    3.2 实验结果第56-67页
        3.2.1 UL70和DNAJB6在细胞中共定位第56-59页
        3.2.2 DNAJB6a的核定位信号对于UL70的入核运输非常重要第59-61页
        3.2.3 DNAJB6表达上调或下调影响UL70的核质分布第61-65页
        3.2.4 DNAJB6表达上调或下调影响HCMV基因表达和DNA复制第65-67页
    3.3 小结与讨论第67-69页
第四章 HCMV蛋白UL35与宿主因子IFI35相互作用第69-83页
    4.1 研究背景第69-70页
    4.2 实验结果第70-81页
        4.2.1 免疫共沉淀证实UL35与IFI35特异性相互作用第70页
        4.2.2 UL35和IFI35在细胞核内共定位第70-72页
        4.2.3 UL35结合于IFI35 C端的NID结构域第72-74页
        4.2.4 IFI35可以增强UL35依赖的MIEP转录活性第74-76页
        4.2.5 IFI35表达下调显著抑制HCMV基因mRNA的表达第76-78页
        4.2.6 IFI35表达上调提高HCMV蛋白表达第78-79页
        4.2.7 IFI35过表达可以促进HCMV复制第79-80页
        4.2.8 IFI35单独或者与UL35共同激活抗病毒基因启动子第80-81页
    4.3 小结与讨论第81-83页
第五章 研究总结与展望第83-84页
参考文献第84-97页
缩略词表第97-100页
攻博期间科研成果第100-101页
致谢第101-102页

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