论文创新点 | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第13-37页 |
1.1 人巨细胞病毒概述 | 第13-15页 |
1.2 人巨细胞病毒基因及其表达调控 | 第15-22页 |
1.2.1 立即早期基因及表达调控 | 第16-20页 |
1.2.2 早期基因及表达调控 | 第20-21页 |
1.2.3 晚期基因及表达调控 | 第21-22页 |
1.3 人巨细胞病毒潜伏和裂解感染 | 第22-30页 |
1.3.1 人巨细胞病毒的潜伏与激活 | 第22-25页 |
1.3.2 人巨细胞病毒基因组复制 | 第25-28页 |
1.3.3 人巨细胞病毒与ND10结构 | 第28-30页 |
1.4 人巨细胞病毒与免疫应答 | 第30-33页 |
1.4.1 先天性免疫 | 第31页 |
1.4.2 获得性免疫 | 第31-32页 |
1.4.3 免疫逃逸 | 第32-33页 |
1.5 人巨细胞病毒相关疾病 | 第33-35页 |
1.6 人巨细胞病毒预防和治疗 | 第35-37页 |
第二章 材料与方法 | 第37-55页 |
2.1 实验仪器和设备 | 第37页 |
2.2 实验试剂和材料 | 第37-38页 |
2.2.1 分子生物学 | 第37-38页 |
2.2.2 细胞实验相关 | 第38页 |
2.2.3 蛋白分析相关 | 第38页 |
2.3 常规分子克隆实验 | 第38-41页 |
2.3.1 化转感受态制备与使用 | 第38-40页 |
2.3.2 碱裂解法提取质粒 | 第40页 |
2.3.3 PCR和限制性内切酶 | 第40-41页 |
2.3.4 DNA的回收和纯化 | 第41页 |
2.3.5 抗生素的配制 | 第41页 |
2.4 酵母双杂交实验 | 第41-43页 |
2.4.1 试剂准备 | 第41-42页 |
2.4.2 酵母转化 | 第42页 |
2.4.3 酵母四缺筛选 | 第42页 |
2.4.4 X-gal显色实验 | 第42-43页 |
2.5 细胞相关实验 | 第43-47页 |
2.5.1 细胞传代培养 | 第43-44页 |
2.5.2 磷酸钙转染法 | 第44页 |
2.5.3 脂质体转染法 | 第44-45页 |
2.5.4 细胞收获方法 | 第45页 |
2.5.5 稳转细胞系筛选 | 第45-46页 |
2.5.6 细胞总RNA提取 | 第46页 |
2.5.7 细胞基因组DNA提取 | 第46-47页 |
2.6 蛋白质相关实验 | 第47-51页 |
2.6.1 PAGE电泳和Western blot | 第47-48页 |
2.6.2 免疫共沉淀法 | 第48页 |
2.6.3 间接免疫荧光 | 第48-49页 |
2.6.4 核质分离实验 | 第49页 |
2.6.5 染色质免疫沉淀 | 第49-51页 |
2.7 病毒学相关实验 | 第51-55页 |
2.7.1 HCMV感染和扩增 | 第51页 |
2.7.2 HCMV滴度测定 | 第51-52页 |
2.7.3 HCMV BAC突变病毒 | 第52-55页 |
第三章 HCMV复制蛋白UL70与宿主因子DNAJB6相互作用 | 第55-69页 |
3.1 研究背景 | 第55-56页 |
3.2 实验结果 | 第56-67页 |
3.2.1 UL70和DNAJB6在细胞中共定位 | 第56-59页 |
3.2.2 DNAJB6a的核定位信号对于UL70的入核运输非常重要 | 第59-61页 |
3.2.3 DNAJB6表达上调或下调影响UL70的核质分布 | 第61-65页 |
3.2.4 DNAJB6表达上调或下调影响HCMV基因表达和DNA复制 | 第65-67页 |
3.3 小结与讨论 | 第67-69页 |
第四章 HCMV蛋白UL35与宿主因子IFI35相互作用 | 第69-83页 |
4.1 研究背景 | 第69-70页 |
4.2 实验结果 | 第70-81页 |
4.2.1 免疫共沉淀证实UL35与IFI35特异性相互作用 | 第70页 |
4.2.2 UL35和IFI35在细胞核内共定位 | 第70-72页 |
4.2.3 UL35结合于IFI35 C端的NID结构域 | 第72-74页 |
4.2.4 IFI35可以增强UL35依赖的MIEP转录活性 | 第74-76页 |
4.2.5 IFI35表达下调显著抑制HCMV基因mRNA的表达 | 第76-78页 |
4.2.6 IFI35表达上调提高HCMV蛋白表达 | 第78-79页 |
4.2.7 IFI35过表达可以促进HCMV复制 | 第79-80页 |
4.2.8 IFI35单独或者与UL35共同激活抗病毒基因启动子 | 第80-81页 |
4.3 小结与讨论 | 第81-83页 |
第五章 研究总结与展望 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-97页 |
缩略词表 | 第97-100页 |
攻博期间科研成果 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |