| 中文摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 苹果酸脱氢酶（MDH） | 第12-17页 |
| 1.1.1 苹果酸脱氢酶（MDH）类型、结构与功能 | 第12-14页 |
| 1.1.2 细胞质苹果酸脱氢酶（cyMDH）的功能研究 | 第14-15页 |
| 1.1.3 质体苹果酸脱氢酶（pdMDH）的功能 | 第15-16页 |
| 1.1.4 线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH)的功能研究 | 第16-17页 |
| 1.1.5 过氧化酶体苹果酸脱氢酶（PMDH）的功能研究 | 第17页 |
| 1.2 激素与非生物胁迫抗性 | 第17-20页 |
| 1.2.1 水杨酸与非生物胁迫 | 第17-19页 |
| 1.2.2 脱落酸与非生物胁迫 | 第19-20页 |
| 1.3 氧化还原平衡、活性氧与抗逆性 | 第20-23页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 植物材料的培养及处理 | 第25页 |
| 2.1.3 菌株及载体 | 第25页 |
| 2.1.4 酶、试剂盒、生化试剂、培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第26-27页 |
| 2.1.6 PCR引物 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-41页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取与检测 | 第28-29页 |
| 2.2.2 植物基因组DNA的提取与纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.3 基因克隆 | 第30页 |
| 2.2.4 目的片段回收 | 第30-31页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31-32页 |
| 2.2.6 质粒DNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.7 质粒DNA的酶切 | 第33页 |
| 2.2.8 MdcyMDH基因正义表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.2.9 根癌农杆菌(LBA4404)感受态细胞的制备和转化 | 第34-35页 |
| 2.2.10 植物材料的栽培、转化及转基因植株分析 | 第35页 |
| 2.2.11 细胞质苹果酸脱氢酶活性分析 | 第35-36页 |
| 2.2.12 叶绿体和线粒体的分离和纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.13 苹果酸依赖的呼吸速率检测 | 第37页 |
| 2.2.14 苹果酸的含量提取和测定 | 第37页 |
| 2.2.15 光合作用和叶绿素的测定 | 第37-38页 |
| 2.2.16 叶绿素荧光的测定 | 第38页 |
| 2.2.17 H_2O_2提取和计算 | 第38-39页 |
| 2.2.18 氧化还原对的提取并计算 | 第39页 |
| 2.2.19 叶片激素的提取和测定 | 第39-40页 |
| 2.2.20 数字基因表达谱分析（Digital Gene Expression Profiling，DGE） | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| 3.1 苹果MdcyMDH基因序列和表达分析 | 第41-47页 |
| 3.1.1 苹果MdcyMDH基因家族序列分析 | 第41-43页 |
| 3.1.2 cyMDHs进化树分析 | 第43-44页 |
| 3.1.3 苹果cyMDHs二级结构和三级结构 | 第44页 |
| 3.1.4 苹果cyMDHs基因时空表达特性 | 第44-45页 |
| 3.1.5 苹果cyMDHs基因对冷和盐胁迫诱导的表达响应 | 第45-46页 |
| 3.1.6 MdcyMDH过量表达苹果株系的获得与鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2 MdcyMDH基因的转基因功能的鉴定 | 第47-51页 |
| 3.2.1 MdcyMDH基因过量表达促进苹果组培苗生长 | 第47-48页 |
| 3.2.2 MdcyMDH基因过量表达提高了转基因组培苗的光合能力 | 第48-49页 |
| 3.2.3 MdcyMDH基因过量表达促进转基因叶片叶绿素含量 | 第49-50页 |
| 3.2.4 MdcyMDH基因过量表达提高了转基因苹果组培苗的冷和盐抗性 | 第50-51页 |
| 3.3 MdcyMDH基因调节盐和冷抗性的机制研究 | 第51-63页 |
| 3.3.1 MdcyMDH过量表达诱导的表达谱变化 | 第51-53页 |
| 3.3.2 MdcyMDH基因过量表达改变了线粒体和叶绿体的代谢 | 第53-59页 |
| 3.3.3 MdcyMDH基因过量表达提高了细胞还原力并改变了ROS水平 | 第59-61页 |
| 3.3.4 MdcyMDH过量表达提高了SA含量 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 4.1 在非生物胁迫条件下cyMDH主要催化苹果酸的合成 | 第63页 |
| 4.2 MdcyMDH通过提高细胞还原力来增强对冷和盐抗性 | 第63-64页 |
| 4.3 MdcyMDH基因通过调节氧化还原来增加冷和盐胁迫的抗性 | 第64-65页 |
| 4.4 MdcyMDH通过提高SA和氧化还原物质互作来提高冷和盐胁迫抗性 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第83页 |
