| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-11页 |
| 材料与方法 | 第11-19页 |
| 1 实验试剂 | 第11-12页 |
| 2 实验仪器 | 第12-13页 |
| 3 实验方法 | 第13-18页 |
| 3.1 hTRPV3质粒的转化与提取 | 第13-15页 |
| 3.2 细胞培养与hTRPV3质粒瞬时转染 | 第15页 |
| 3.3 FlexStation 3 多功能酶标仪测定细胞内钙荧光信号 | 第15-16页 |
| 3.4 全细胞膜片钳记录测定TRPV通道电流 | 第16-17页 |
| 3.5 天麻有效成分的提取 | 第17页 |
| 3.6 天麻提取物的HPD100大孔吸附树脂分离 | 第17页 |
| 3.7 天麻 20%、50% 乙醇洗脱物的硅胶柱分离 | 第17页 |
| 3.8 天麻 70% 乙醇洗脱物的ODS柱分离 | 第17-18页 |
| 3.9 天麻分离物的HPLC制备高效液相分离 | 第18页 |
| 4 统计学处理 | 第18-19页 |
| 结果 | 第19-34页 |
| 1 钙荧光高通量筛选TRPV3通道调节剂方法的建立与优化 | 第19-25页 |
| 1.1 优化高通量筛选时的细胞密度 | 第19-20页 |
| 1.2 优化高通量筛选时的Cal-520 钙荧光染料浓度 | 第20-22页 |
| 1.3 优化高通量筛选时的Cal-520 钙荧光染料孵育时间 | 第22-23页 |
| 1.4 优化高通量筛选时的加样顺序 | 第23-25页 |
| 1.5 应用钌红对优化的筛选方法进行评价 | 第25页 |
| 2 运用FlexStation 3 方法筛选发现新的天然TRPV3离子通道抑制剂-甲基莲心碱 | 第25-27页 |
| 3 全细胞膜片钳确认甲基莲心碱对TRPV3离子通道的抑制作用 | 第27-28页 |
| 4 全细胞膜片钳测试甲基莲心碱对TRPV亚家族的选择性 | 第28-29页 |
| 5 靶向TRP通道天麻有效活性成分的提取、分离与筛选 | 第29-34页 |
| 5.1 天麻分离获得化合物的结构鉴定 | 第29-31页 |
| 5.2 天麻HPD100大孔吸附树脂洗脱物以及天麻素的活性评价 | 第31-34页 |
| 讨论 | 第34-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 综述 | 第42-58页 |
| 综述参考文献 | 第52-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58-59页 |
| 缩略词表 | 第59-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
