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HIV-1 env蛋白的制备活性鉴定与快速检测方法的建立

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 前言第13-40页
    1.1 人类缺陷免疫病毒第13-23页
        1.1.1 生物学诊断第13-16页
            1.1.1.1 形态结构第13-14页
            1.1.1.2 基因结构及编码蛋白的功能第14-15页
            1.1.1.3 培养特性第15页
            1.1.1.4 抵抗力第15-16页
        1.1.2 病毒性与免疫性第16-17页
            1.1.2.1 传染源和传播途径第16页
            1.1.2.2 致病机制第16-17页
            1.1.2.3 免疫性第17页
        1.1.3 HIV/AIDS 流行概况第17-19页
        1.1.4 病毒学研究进展第19-20页
        1.1.5 HIV/AIDS 感染诊断第20-22页
            1.1.5.1 HIV 感染的诊断第20-21页
            1.1.5.2 我国使用WB 确认HIV 感染的判定标准和判定结果的基本原则第21-22页
        1.1.6 艾滋病治疗的进展第22-23页
    1.2 快速翻译系统(Rapid Translation System)第23-27页
        1.2.1 PCR 技术原理第24-25页
        1.2.2 线形模板生成原理第25-27页
    1.3 pET 原核表达系统第27-31页
        1.3.1 pET 原核表达系统的介绍第27-28页
        1.3.2 用于表达的宿主菌第28-29页
        1.3.3 pET32a 图谱第29-30页
        1.3.4 氨苄青霉素的使用第30页
        1.3.5 IPTG 的诱导第30-31页
    1.4 量子点概念、制备及研究第31-36页
        1.4.1 量子点的概念第31页
        1.4.2 量子点的制备第31-33页
        1.4.3 量子点的应用第33-36页
            1.4.3.1 用于细胞和分子生物学研究第33-34页
            1.4.3.2 用于肿瘤等疾病的检测和诊断第34页
            1.4.3.3 用于药物研究和含量测定第34-36页
    参考文献第36-40页
第二章 HIV-ⅠENV蛋白的RTS系统表达、纯化及生物学活性的鉴定第40-55页
    2.1 引言第40-41页
    2.2 实验部分第41-51页
        2.2.1 PCR 引物第41页
        2.2.2 材料与试剂第41-45页
        2.2.3 方法第45-51页
            2.2.3.1 含HIV-1 env 基因菌体的培养第45页
            2.2.3.2 含HIV-1 env 基因质粒的提取第45-46页
            2.2.3.3 从质粒中扩增出HIV-1 env 基因第46-47页
            2.2.3.4 PCR 产物的凝胶回收第47-48页
            2.2.3.5 感受态细胞的制备( CaC12 法)第48页
            2.2.3.6 HIV-1 env 基因克隆入T 载体第48-49页
            2.2.3.7 第一轮PCR 产物电泳结果第49-50页
            2.2.3.8 第二轮PCR 扩增与序列分析第50页
            2.2.3.9 RTS 系统高效表达蛋白与纯化第50页
            2.2.3.10 Western Blotting 分析第50-51页
    2.3 结果第51-53页
        2.3.1 T 载体测序结果与基因库结果比较第51-52页
        2.3.2 第一轮PCR 及第二轮PCR 产物电泳结果第52页
        2.3.3 蛋白纯化结果及Western Blot 结果第52-53页
    2.4 讨论第53-54页
    参考文献第54-55页
第三章 利用PET系统表达部分HIV-1 ENV蛋白第55-64页
    3.1 引言第55页
    3.2 实验部分第55-59页
        3.2.1 实验材料第55-57页
            3.2.1.1 PCR 引物第55-56页
            3.2.1.2 试剂第56-57页
        3.2.2 方法第57-59页
            3.2.2.1 双酶切反应第57页
            3.2.2.2 DNA 片段和pET-32a 载体的连接第57-58页
            3.2.2.3 转化反应第58-59页
            3.2.2.4 菌体的诱导第59页
    3.3 结果第59-61页
        3.3.1 测序结果第59-60页
        3.3.2 SDS-PAGE 结果第60-61页
    3.4 讨论第61-63页
    参考文献第63-64页
第四章 量子点标记的荧光免疫检测HIV抗体方法的建立第64-71页
    4.1 引言第64页
    4.2 实验部分第64-66页
        4.2.1 试剂和仪器第64-65页
        4.2.2 凝集免疫检测方法的建立第65-66页
            4.2.2.1 量子点的合成与表征第65页
            4.2.2.2 CdTe 量子点标记纯化后的env 蛋白第65页
            4.2.2.3 凝集免疫检测方法的建立第65-66页
    4.3 结果第66-67页
        4.3.1 建立CdTe 量子点标记的凝集免疫检测方法第66-67页
    4.4 讨论第67-68页
    4.5 结论第68-69页
    参考文献第69-71页
致谢第71-72页
攻读学位期间发表的学术论文第72页

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