摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第13-40页 |
1.1 人类缺陷免疫病毒 | 第13-23页 |
1.1.1 生物学诊断 | 第13-16页 |
1.1.1.1 形态结构 | 第13-14页 |
1.1.1.2 基因结构及编码蛋白的功能 | 第14-15页 |
1.1.1.3 培养特性 | 第15页 |
1.1.1.4 抵抗力 | 第15-16页 |
1.1.2 病毒性与免疫性 | 第16-17页 |
1.1.2.1 传染源和传播途径 | 第16页 |
1.1.2.2 致病机制 | 第16-17页 |
1.1.2.3 免疫性 | 第17页 |
1.1.3 HIV/AIDS 流行概况 | 第17-19页 |
1.1.4 病毒学研究进展 | 第19-20页 |
1.1.5 HIV/AIDS 感染诊断 | 第20-22页 |
1.1.5.1 HIV 感染的诊断 | 第20-21页 |
1.1.5.2 我国使用WB 确认HIV 感染的判定标准和判定结果的基本原则 | 第21-22页 |
1.1.6 艾滋病治疗的进展 | 第22-23页 |
1.2 快速翻译系统(Rapid Translation System) | 第23-27页 |
1.2.1 PCR 技术原理 | 第24-25页 |
1.2.2 线形模板生成原理 | 第25-27页 |
1.3 pET 原核表达系统 | 第27-31页 |
1.3.1 pET 原核表达系统的介绍 | 第27-28页 |
1.3.2 用于表达的宿主菌 | 第28-29页 |
1.3.3 pET32a 图谱 | 第29-30页 |
1.3.4 氨苄青霉素的使用 | 第30页 |
1.3.5 IPTG 的诱导 | 第30-31页 |
1.4 量子点概念、制备及研究 | 第31-36页 |
1.4.1 量子点的概念 | 第31页 |
1.4.2 量子点的制备 | 第31-33页 |
1.4.3 量子点的应用 | 第33-36页 |
1.4.3.1 用于细胞和分子生物学研究 | 第33-34页 |
1.4.3.2 用于肿瘤等疾病的检测和诊断 | 第34页 |
1.4.3.3 用于药物研究和含量测定 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
第二章 HIV-ⅠENV蛋白的RTS系统表达、纯化及生物学活性的鉴定 | 第40-55页 |
2.1 引言 | 第40-41页 |
2.2 实验部分 | 第41-51页 |
2.2.1 PCR 引物 | 第41页 |
2.2.2 材料与试剂 | 第41-45页 |
2.2.3 方法 | 第45-51页 |
2.2.3.1 含HIV-1 env 基因菌体的培养 | 第45页 |
2.2.3.2 含HIV-1 env 基因质粒的提取 | 第45-46页 |
2.2.3.3 从质粒中扩增出HIV-1 env 基因 | 第46-47页 |
2.2.3.4 PCR 产物的凝胶回收 | 第47-48页 |
2.2.3.5 感受态细胞的制备( CaC12 法) | 第48页 |
2.2.3.6 HIV-1 env 基因克隆入T 载体 | 第48-49页 |
2.2.3.7 第一轮PCR 产物电泳结果 | 第49-50页 |
2.2.3.8 第二轮PCR 扩增与序列分析 | 第50页 |
2.2.3.9 RTS 系统高效表达蛋白与纯化 | 第50页 |
2.2.3.10 Western Blotting 分析 | 第50-51页 |
2.3 结果 | 第51-53页 |
2.3.1 T 载体测序结果与基因库结果比较 | 第51-52页 |
2.3.2 第一轮PCR 及第二轮PCR 产物电泳结果 | 第52页 |
2.3.3 蛋白纯化结果及Western Blot 结果 | 第52-53页 |
2.4 讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-55页 |
第三章 利用PET系统表达部分HIV-1 ENV蛋白 | 第55-64页 |
3.1 引言 | 第55页 |
3.2 实验部分 | 第55-59页 |
3.2.1 实验材料 | 第55-57页 |
3.2.1.1 PCR 引物 | 第55-56页 |
3.2.1.2 试剂 | 第56-57页 |
3.2.2 方法 | 第57-59页 |
3.2.2.1 双酶切反应 | 第57页 |
3.2.2.2 DNA 片段和pET-32a 载体的连接 | 第57-58页 |
3.2.2.3 转化反应 | 第58-59页 |
3.2.2.4 菌体的诱导 | 第59页 |
3.3 结果 | 第59-61页 |
3.3.1 测序结果 | 第59-60页 |
3.3.2 SDS-PAGE 结果 | 第60-61页 |
3.4 讨论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
第四章 量子点标记的荧光免疫检测HIV抗体方法的建立 | 第64-71页 |
4.1 引言 | 第64页 |
4.2 实验部分 | 第64-66页 |
4.2.1 试剂和仪器 | 第64-65页 |
4.2.2 凝集免疫检测方法的建立 | 第65-66页 |
4.2.2.1 量子点的合成与表征 | 第65页 |
4.2.2.2 CdTe 量子点标记纯化后的env 蛋白 | 第65页 |
4.2.2.3 凝集免疫检测方法的建立 | 第65-66页 |
4.3 结果 | 第66-67页 |
4.3.1 建立CdTe 量子点标记的凝集免疫检测方法 | 第66-67页 |
4.4 讨论 | 第67-68页 |
4.5 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第72页 |