| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一部分 综述 | 第13-39页 |
| 第一章 抗菌肽与其抗肿瘤作用机理研究进展 | 第13-22页 |
| 1.1 抗菌肽的分类 | 第13-15页 |
| 1.1.1 根据来源分类 | 第13页 |
| 1.1.2 根据结构分类 | 第13-15页 |
| 1.2 抗菌肽应用及其作用机制 | 第15-22页 |
| 1.2.1 抗菌活性及其机制 | 第15-16页 |
| 1.2.2 抗病毒活性及其相关机制 | 第16页 |
| 1.2.3 抗肿瘤细胞活性及其机制 | 第16-20页 |
| 1.2.3.1 破坏细胞膜 | 第17-18页 |
| 1.2.3.2 影响线粒体,诱导细胞凋亡 | 第18页 |
| 1.2.3.3 对细胞核的影响 | 第18-19页 |
| 1.2.3.4 破坏细胞骨架 | 第19页 |
| 1.2.3.5 免疫作用 | 第19页 |
| 1.2.3.6 其它作用机制 | 第19-20页 |
| 1.2.4 抗菌肽的应用前景 | 第20-22页 |
| 第二章 抗菌肽的修饰改造与活性 | 第22-26页 |
| 2.1 抗菌肽的结构改造 | 第22-23页 |
| 2.2 抗菌肽的修饰改造 | 第23-26页 |
| 2.2.1 α-酰胺化修饰 | 第23-24页 |
| 2.2.2 糖基化修饰 | 第24页 |
| 2.2.3 D-,β-氨基酸取代 | 第24-25页 |
| 2.2.4 脂酰化修饰 | 第25-26页 |
| 第三章 蛋白质的豆蔻酰化修饰研究进展 | 第26-32页 |
| 3.1 蛋白质的豆蔻酰化修饰 | 第26-27页 |
| 3.2 豆蔻酰化与肿瘤 | 第27-28页 |
| 3.3 豆蔻酰化与细胞凋亡 | 第28-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第二部分 实验研究 | 第39-85页 |
| 第四章 抗菌肽CM4对白血病细胞K562作用分析 | 第39-50页 |
| 4.1 实验材料 | 第40页 |
| 4.1.1 抗菌肽及细胞株 | 第40页 |
| 4.1.2 实验试剂与仪器 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 抗菌肽CM4和Melittin对白血病细胞K562抑制增殖MTT实验 | 第40页 |
| 4.2.2 流式细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
| 4.2.3 FITC-CM4和FITC-melittin与PI共定位 | 第41页 |
| 4.2.4 细胞内Ca~(2+)浓度检测 | 第41页 |
| 4.2.5 细胞骨架观察 | 第41-42页 |
| 4.2.6 统计分析 | 第42-43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-48页 |
| 4.3.1 抗菌肽CM4和Melittin对白血病细胞的毒性 | 第43-44页 |
| 4.3.2 CM4和melittin对K562细胞的坏死与凋亡分析 | 第44-45页 |
| 4.3.3 CM4和melittin在K562细胞内的定位 | 第45页 |
| 4.3.4 CM4和melittin对K562细胞膜通透性及胞内Ca~(2+)的影响 | 第45-47页 |
| 4.3.5 CM4和melittin对K562细胞骨架的影响 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 豆蔻酰基对CM4作用白血病细胞的毒性及选择性结合的影响 | 第50-61页 |
| 5.1 实验材料 | 第51页 |
| 5.1.1 抗菌肽及细胞株 | 第51页 |
| 5.1.2 实验试剂与仪器 | 第51页 |
| 5.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 5.2.1 MTT实验 | 第51页 |
| 5.2.2 溶血性实验 | 第51-52页 |
| 5.2.3 荧光标记的流式细胞分析 | 第52页 |
| 5.2.4 统计分析 | 第52-53页 |
| 5.3 结果与分析 | 第53-59页 |
| 5.3.1 豆蔻酰基对CM4杀伤白血病细胞的影响 | 第53-54页 |
| 5.3.2 豆蔻酰基对CM4作用三种正常哺乳动物细胞的毒性 | 第54-55页 |
| 5.3.3 联合作用分析 | 第55-56页 |
| 5.3.4 豆蔻酰基对CM4溶血性的影响 | 第56-57页 |
| 5.3.5 豆蔻酰基对CM4结合细胞能力的影响 | 第57-59页 |
| 5.4 讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 Myr-CM4对白血病细胞的作用机理探讨 | 第61-78页 |
| 6.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 6.1.1 抗菌肽及细胞株 | 第61页 |
| 6.1.2 实验试剂与仪器 | 第61-62页 |
| 6.2 实验方法 | 第62-67页 |
| 6.2.1 显微镜观察 | 第62页 |
| 6.2.2 LDH释放实验 | 第62-63页 |
| 6.2.3 Annexin V-FITC/PI双染的流式细胞检测 | 第63页 |
| 6.2.4 Hoechst与PI染色与荧光显微镜观察 | 第63页 |
| 6.2.5 DNA Ladder实验 | 第63-64页 |
| 6.2.6 FITC-Myr-CM4和Rh123的激光共聚焦定位检测 | 第64页 |
| 6.2.7 ROS活性氧检测 | 第64-65页 |
| 6.2.8 线粒体电动势JC-1检测 | 第65页 |
| 6.2.9 Western Blot检测 | 第65-66页 |
| 6.2.10 统计与分析 | 第66-67页 |
| 6.3 结果与分析 | 第67-75页 |
| 6.3.1 Myr-CM4对白血病细胞膜通透性的影响 | 第67-69页 |
| 6.3.2 Myr-CM4对K562/ADR和Jurkat细胞的Hoechst/PI染色荧光显微镜观察 | 第69-70页 |
| 6.3.3 Myr-CM4对K562/ADR和Jurkat细胞的凋亡分析 | 第70-71页 |
| 6.3.4 Myr-CM4对Jurkat细胞内ROS的影响 | 第71-72页 |
| 6.3.5 FITC-Myr-CM4与Jurkat细胞激光共聚焦共定位 | 第72-73页 |
| 6.3.6 Myr-CM4诱导Jurkat细胞线粒体电动势变化 | 第73-74页 |
| 6.3.7 Myr-CM4诱导Jurkat细胞凋亡相关蛋白检测 | 第74-75页 |
| 6.4 讨论 | 第75-78页 |
| 第七章 豆蔻酰基对抗菌肽Lactoferricin的活性影响 | 第78-85页 |
| 7.1 实验材料 | 第78-79页 |
| 7.1.1 抗菌肽及细胞株 | 第78页 |
| 7.1.2 实验试剂与仪器 | 第78-79页 |
| 7.2 实验方法 | 第79-81页 |
| 7.2.1 MTT实验 | 第79页 |
| 7.2.2 溶血性实验 | 第79页 |
| 7.2.3 Annexin V-FITC/PI双染的流式细胞分析 | 第79-81页 |
| 7.3 结果与分析 | 第81-84页 |
| 7.3.1 抗菌肽Lfcin B和Myr-Lfcin B对白血病细胞的毒性分析 | 第81-82页 |
| 7.3.2 抗菌肽Lfcin B和Myr-Lfcin B对红细胞溶血性的影响 | 第82-83页 |
| 7.3.3 抗菌肽Lfcin B和Myr-Lfcin B对K562和Jurkat细胞凋亡与坏死分析 | 第83-84页 |
| 7.4 讨论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 全文总结 | 第91-92页 |
| 附录 硕士在读期间的研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
