中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1. 骨骼肌分化发育过程 | 第9-12页 |
1.1 骨骼肌结构概述 | 第9-10页 |
1.2 骨骼肌发育调控 | 第10-12页 |
2. 氯通道研究进展 | 第12-17页 |
2.1 氯离子通道概述 | 第12-13页 |
2.2 电压门控的氯离子通道(CIC家族) | 第13-14页 |
2.3 cAMP激活的囊状纤维化介导的氯离子通道(CFTR) | 第14页 |
2.4 容积调节的氯离子通道(VRAC) | 第14-15页 |
2.5 钙离子激活的氯离子通道(CaCC) | 第15-17页 |
2.5.1 CaCC对可兴奋组织的作用 | 第15-16页 |
2.5.2 CaCC对非可兴奋性组织的作用 | 第16页 |
2.5.3 TMEM16A/16B结构及功能的研究 | 第16-17页 |
3. TMEM16A与骨骼肌发育 | 第17-19页 |
第二章 钙离子依赖性的氯离子通道—TMEM16A在小鼠骨骼肌发育中的表达 | 第19-42页 |
1. 实验材料 | 第19-20页 |
1.1 主要仪器 | 第19-20页 |
1.2 实验动物 | 第20页 |
2. 实验方法 | 第20-29页 |
2.1 小鼠基因型鉴定 | 第20-21页 |
2.2 C2C12细胞培养及诱导分化 | 第21页 |
2.3 C2C12细胞蛋白提取 | 第21-22页 |
2.4 蛋白质免疫印迹实验(Western Blot) | 第22-23页 |
2.5 C2C12细胞及小鼠组织总RNA提取 | 第23-24页 |
2.6 实时荧光定量PCR检测相应基因的表达 | 第24-26页 |
2.6.1 反转录反应 | 第24-25页 |
2.6.2 Real Time PCR反应 | 第25-26页 |
2.7 小鼠骨骼肌细胞原代培养 | 第26-27页 |
2.8 细胞免疫荧光 | 第27-28页 |
2.9 肌肉组织冰冻切片 | 第28页 |
2.10 统计学分析 | 第28-29页 |
3. 实验结果 | 第29-39页 |
3.1 C2C12细胞肌分化过程涉及TMEM16A/16B表达量变化 | 第29-30页 |
3.2 小鼠骨骼肌不同发育阶段TMEM16A/16B的表达 | 第30-35页 |
3.2.1 TMEM16A/16B的RNA表达水平在小鼠发育过程中呈明显波动 | 第30-31页 |
3.2.2 胚胎期TMEM16A蛋白高表达出生后表达量逐渐降低 | 第31-32页 |
3.2.3 免疫荧光结果显示TMEM16A在小鼠不同发育阶段具有不同的分布 | 第32-33页 |
3.2.4 TMEM16A/16B在小鼠快慢肌中存在表达差异 | 第33-35页 |
3.3 TMEM16A全身性敲除小鼠的表型分析 | 第35-39页 |
3.3.1 TMEM16A全身性敲除小鼠的基因型鉴定 | 第35-36页 |
3.3.2 TMEM16A全身性敲除小鼠蛋白及RNA表达分析 | 第36-37页 |
3.3.3 TMEM16A全身性敲除小鼠细胞培养表现出分化异常 | 第37-39页 |
4. 讨论 | 第39-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |