中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
引言 | 第9页 |
1.1 葡萄高效离体再生系统建立的研究进展 | 第9-13页 |
1.1.1 器官发生途径 | 第9-10页 |
1.1.2 体细胞胚发生途径 | 第10-12页 |
1.1.3 高效离体再生系统建立的影响因素 | 第12-13页 |
1.2 抗真菌蛋白在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展 | 第13-23页 |
1.2.1 几丁质酶在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展 | 第14-18页 |
1.2.2 β-1,3-葡聚糖酶基因在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展 | 第18-21页 |
1.2.3 萝卜抗真菌蛋白在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展 | 第21-23页 |
1.3 抗病基因双价或多价表达载体在植物抗真菌病害中的应用 | 第23-27页 |
1.3.1 构建多基因表达载体的策略 | 第23-24页 |
1.3.2 抗病基因的协同表达及在植物抗真菌病害中的应用 | 第24-27页 |
1.4 本研究的目的意义及技术路线 | 第27-29页 |
第二章 材料与方法 | 第29-44页 |
2.1 梅尔诺再生体系的建立 | 第29-30页 |
2.1.1 供试材料 | 第29页 |
2.1.2 试验方法 | 第29-30页 |
2.2 几丁质酶、葡聚糖酶和萝卜抗真菌蛋白基因三价表达载体的构建 | 第30-40页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第30-31页 |
2.2.2 方法 | 第31-40页 |
2.3 农杆菌工程菌株的构建 | 第40-44页 |
2.3.1 农杆菌感受态的制备 | 第40页 |
2.3.2 表达载体向农杆菌转化 | 第40页 |
2.3.3 农杆菌Ti质粒的微量提取 | 第40-41页 |
2.3.4 PCR鉴定从农杆菌中提取的 GC+R/ pC2、RC+G/ pC2质粒 | 第41页 |
2.3.5 DNA dot blotting 鉴定 | 第41-44页 |
第三章 结果和分析 | 第44-55页 |
3.1 梅尔诺离体叶柄再生体系的建立 | 第44-49页 |
3.1.1 梅尔诺单芽增殖生根 | 第44页 |
3.1.2 不同细胞分裂素对叶柄愈伤组织诱导及不定芽再生的影响 | 第44-46页 |
3.1.3 不同暗培养时间对离体叶柄不定芽再生的影响 | 第46页 |
3.1.4 不同叶位的叶柄不定芽再生的能力 | 第46-47页 |
3.1.5 梅尔诺体胚萌发芽再生体系的建立 | 第47-49页 |
3.2 GC+R/ pCAMBIA1300、RC+G/ pCAMBIA1300植物表达表达载体的构建 | 第49-53页 |
3.2.1 目的片段的获得 | 第49页 |
3.2.2 三价植物表达载体GC+R/ pCAMBIA1300、RC+G/ pCAMBIA1300的鉴定 | 第49-53页 |
3.3 GC+R/ pCAMBIA1300 /EHA105、RC+G/ pCAMBIA1300/EHA105的鉴定结果 | 第53-55页 |
3.3.1 PCR鉴定 | 第53-54页 |
3.3.2 DNA dot blotting鉴定 | 第54-55页 |
第四章 讨 论 | 第55-58页 |
4.1 植物生长调节剂(PGRs)对葡萄再生体系建立的影响 | 第55页 |
4.2 培养基和培养条件对葡萄再生体系建立的影响 | 第55页 |
4.3 关于植物多价表达载体的构建及应用 | 第55-56页 |
4.4 关于植物多价表达载体的构建策略的讨论 | 第56-57页 |
4.5 构建抗真菌蛋白基因的三价载体的意义 | 第57-58页 |
第五章 结 论 | 第58-59页 |
第六章 附 录 | 第59-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |