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抗病基因三价表达载体构建及酿酒葡萄再生体系的建立

中文摘要第5-6页
英文摘要第6页
第一章 文献综述第9-29页
    引言第9页
    1.1 葡萄高效离体再生系统建立的研究进展第9-13页
        1.1.1 器官发生途径第9-10页
        1.1.2 体细胞胚发生途径第10-12页
        1.1.3 高效离体再生系统建立的影响因素第12-13页
    1.2 抗真菌蛋白在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展第13-23页
        1.2.1 几丁质酶在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展第14-18页
        1.2.2 β-1,3-葡聚糖酶基因在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展第18-21页
        1.2.3 萝卜抗真菌蛋白在植物抗真菌病害基因工程中的应用及研究进展第21-23页
    1.3 抗病基因双价或多价表达载体在植物抗真菌病害中的应用第23-27页
        1.3.1 构建多基因表达载体的策略第23-24页
        1.3.2 抗病基因的协同表达及在植物抗真菌病害中的应用第24-27页
    1.4 本研究的目的意义及技术路线第27-29页
第二章 材料与方法第29-44页
    2.1 梅尔诺再生体系的建立第29-30页
        2.1.1 供试材料第29页
        2.1.2 试验方法第29-30页
    2.2 几丁质酶、葡聚糖酶和萝卜抗真菌蛋白基因三价表达载体的构建第30-40页
        2.2.1 材料与试剂第30-31页
        2.2.2 方法第31-40页
    2.3 农杆菌工程菌株的构建第40-44页
        2.3.1 农杆菌感受态的制备第40页
        2.3.2 表达载体向农杆菌转化第40页
        2.3.3 农杆菌Ti质粒的微量提取第40-41页
        2.3.4 PCR鉴定从农杆菌中提取的 GC+R/ pC2、RC+G/ pC2质粒第41页
        2.3.5 DNA dot blotting 鉴定第41-44页
第三章 结果和分析第44-55页
    3.1 梅尔诺离体叶柄再生体系的建立第44-49页
        3.1.1 梅尔诺单芽增殖生根第44页
        3.1.2 不同细胞分裂素对叶柄愈伤组织诱导及不定芽再生的影响第44-46页
        3.1.3 不同暗培养时间对离体叶柄不定芽再生的影响第46页
        3.1.4 不同叶位的叶柄不定芽再生的能力第46-47页
        3.1.5 梅尔诺体胚萌发芽再生体系的建立第47-49页
    3.2 GC+R/ pCAMBIA1300、RC+G/ pCAMBIA1300植物表达表达载体的构建第49-53页
        3.2.1 目的片段的获得第49页
        3.2.2 三价植物表达载体GC+R/ pCAMBIA1300、RC+G/ pCAMBIA1300的鉴定第49-53页
    3.3 GC+R/ pCAMBIA1300 /EHA105、RC+G/ pCAMBIA1300/EHA105的鉴定结果第53-55页
        3.3.1 PCR鉴定第53-54页
        3.3.2 DNA dot blotting鉴定第54-55页
第四章 讨 论第55-58页
    4.1 植物生长调节剂(PGRs)对葡萄再生体系建立的影响第55页
    4.2 培养基和培养条件对葡萄再生体系建立的影响第55页
    4.3 关于植物多价表达载体的构建及应用第55-56页
    4.4 关于植物多价表达载体的构建策略的讨论第56-57页
    4.5 构建抗真菌蛋白基因的三价载体的意义第57-58页
第五章 结 论第58-59页
第六章 附 录第59-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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