| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第11-19页 |
| 1 病原学 | 第11页 |
| 2 流行病学 | 第11-12页 |
| 3 临床症状及病理变化 | 第12页 |
| 4 诊断方法 | 第12-14页 |
| 4.1 血清学诊断方法 | 第13页 |
| 4.2 分子生物学诊断 | 第13-14页 |
| 5 毒力因子 | 第14-16页 |
| 5.1 鞭毛蛋白 | 第15页 |
| 5.2 唾液酸酶 | 第15页 |
| 5.3 细胞毒素 | 第15-16页 |
| 5.4 其他毒力因子 | 第16页 |
| 6 主要防治措施 | 第16-18页 |
| 6.1 改变牛的饲养方式 | 第16-17页 |
| 6.2 治理饲养环境 | 第17页 |
| 6.3 提高养殖户防病意识 | 第17-18页 |
| 6.4 提高基层防疫人员素质 | 第18页 |
| 7 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 材料与方法 | 第19-35页 |
| 1 材料 | 第19-27页 |
| 1.1 菌株 | 第19页 |
| 1.2 实验动物 | 第19页 |
| 1.3 酶与试剂 | 第19页 |
| 1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 1.5 培养基及主要溶液 | 第20-27页 |
| 2 方法 | 第27-35页 |
| 2.1 病料采集 | 第27页 |
| 2.2 细菌分离 | 第27页 |
| 2.3 细菌溶血性检查 | 第27页 |
| 2.4 细菌的纯化 | 第27页 |
| 2.5 生化试验 | 第27-28页 |
| 2.6 动物试验 | 第28页 |
| 2.7 分子生物学鉴定 | 第28-29页 |
| 2.8 边株气肿疽梭菌cctA基因的纯化回收 | 第29-30页 |
| 2.9 目的基因的连接 | 第30页 |
| 2.10 连接产物的转化 | 第30-31页 |
| 2.11 重组质粒pMD 19-T-cctA的提取 | 第31页 |
| 2.12 重组质粒pMD 19-T-cctA的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.13 cctA基因克隆产物的生物信息学分析 | 第32页 |
| 2.14 延边株气肿疽梭菌cctA基因目的片段及pGEX-4T-1载体的纯化回收 | 第32页 |
| 2.15 延边株气肿疽梭菌cctA基因与表达载体pGEX-4T-1连接、转化及筛选 | 第32-33页 |
| 2.16 原核表达质粒的鉴定 | 第33页 |
| 2.17 重组表达质粒的诱导表达 | 第33页 |
| 2.18 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第33-34页 |
| 2.19 表达产物的Western blot分析 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-45页 |
| 1 镜检结果 | 第35页 |
| 2 菌落形态和培养特性 | 第35页 |
| 3 生化试验 | 第35-38页 |
| 3.1 硫化氢试验 | 第36页 |
| 3.2 过氧化氢酶试验(触媒试验) | 第36-37页 |
| 3.3 吲哚试验 | 第37页 |
| 3.4 明胶液化试验 | 第37-38页 |
| 3.5 硝酸盐还原试验 | 第38页 |
| 4 动物试验结果 | 第38-39页 |
| 5 PCR检测结果 | 第39页 |
| 6 重组克隆质粒的序列分析结果 | 第39-40页 |
| 7 延边株气肿疽梭菌cctA蛋白的生物信息学分析 | 第40-42页 |
| 7.1 cctA蛋白的理化性质分析 | 第40页 |
| 7.2 cctA蛋白信号肽、跨膜区及表达后的可溶性预测 | 第40页 |
| 7.3 cctA蛋白的二级结构预测 | 第40-41页 |
| 7.4 cctA蛋白的三级结构分子模型 | 第41页 |
| 7.5 蛋白的B细胞抗原表位预测 | 第41-42页 |
| 8 重组表达质粒的鉴定 | 第42页 |
| 9 原核表达产物的SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
| 10 表达产物的Western blot分析 | 第43-45页 |
| 讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 谢辞 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 附录 (攻读学位期间发表论文目录) | 第54页 |
