摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1 哈萨克羊简介 | 第13页 |
2 绵羊季节性发情的内分泌调节机制 | 第13-14页 |
3 季节性发情的两条调控通路 | 第14-18页 |
3.1 TH-DIO2/DIO3-Gn RH调控通路 | 第15-16页 |
3.2 Kisspeptin/GPR54调控系统 | 第16-18页 |
4 microRNA研究概述 | 第18-21页 |
4.1 miRNA的发现及加工成熟 | 第18-19页 |
4.2 miRNA的调控机理 | 第19-20页 |
4.3 miRNA的靶基因预测 | 第20-21页 |
5 miRNA在下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴中的研究 | 第21-22页 |
6 本研究目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 哈萨克羊下丘脑、垂体、卵巢组织差异表达miRNA的鉴定 | 第23-55页 |
1 材料与方法 | 第23-28页 |
1.1 材料 | 第23-24页 |
1.2 试验方法 | 第24-28页 |
2 结果与分析 | 第28-51页 |
2.1 发情鉴定结果 | 第28页 |
2.2 总RNA样品检测结果 | 第28-29页 |
2.3 不同季节发情绵羊下丘脑miRNA文库分析 | 第29-36页 |
2.4 不同季节发情绵羊垂体miRNA文库分析 | 第36-43页 |
2.5 不同季节发情绵羊卵巢miRNA文库分析 | 第43-51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
3.1 试验样本的选择 | 第51页 |
3.2 小RNA序列分析 | 第51-52页 |
3.3 下丘脑-垂体-性腺轴差异miRNA表达分析 | 第52-54页 |
3.4 差异表达miRNA靶基因的KEGG分析 | 第54页 |
4 小结 | 第54-55页 |
第三章 oar-miR-136、oar-miR-148a靶基因的初步鉴定 | 第55-68页 |
1 材料与方法 | 第55-61页 |
1.1 材料 | 第55-56页 |
1.2 试验方法 | 第56-61页 |
2 结果与分析 | 第61-65页 |
2.1 oar-miR-136 与oar-miR-148a的靶基因预测 | 第61-62页 |
2.2 野生型psiCHECK-2 载体构建与鉴定 | 第62-63页 |
2.4 突变型psiCHECK-2 载体构建与鉴定 | 第63-64页 |
2.5 Hela细胞培养转染 | 第64页 |
2.6 不同靶序列与miRNA作用验证结果 | 第64-65页 |
3 讨论 | 第65-67页 |
3.1 双荧光素酶报告基因检测系统的应用 | 第65-66页 |
3.2 miRNA靶基因的验证 | 第66-67页 |
3.3 miRNA靶向 5'UTR和CDS区 | 第67页 |
4 小结 | 第67-68页 |
第四章 miR-136 对GNAQ基因,miR-148a对PLCB1基因的表达调控 | 第68-79页 |
1 材料与方法 | 第68-73页 |
1.1 材料 | 第68-69页 |
1.2 试验方法 | 第69-73页 |
2 结果与分析 | 第73-77页 |
2.1 绵羊胎羊下丘脑神经细胞培养 | 第73-74页 |
2.2 下丘脑神经细胞的鉴定 | 第74页 |
2.3 绵羊卵巢颗粒细胞原代及传代培养 | 第74-75页 |
2.4 miR-136,miR-148a转染下丘脑神经细胞对发情相关基因的影响 | 第75-76页 |
2.5 miR-136,miR-148a转染卵巢颗粒细胞对发情相关基因的影响 | 第76-77页 |
3 讨论 | 第77-78页 |
3.1 转染下丘脑神经细胞后发情相关基因变化的检测 | 第77-78页 |
3.2 转染卵巢颗粒细胞后发情相关基因变化的检测 | 第78页 |
4 小结 | 第78-79页 |
结论与展望 | 第79-80页 |
1 全文结论 | 第79页 |
2 研究展望 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
附录 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
作者简介 | 第90-91页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第91页 |