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猪多能干细胞3i培养体系的建立

摘要第6-8页
abstract第8-10页
文献综述第14-29页
    第一章 多能性建立的方法和猪多能干细胞研究进展第14-20页
        1.1 多能性建立的方法第14-18页
            1.1.1 体细胞融合第14-15页
            1.1.2 体细胞核移植第15-16页
            1.1.3 诱导多能干细胞第16-17页
            1.1.4 重编程过程中表观遗传改变第17-18页
        1.2 猪多能干细胞研究进展第18-20页
            1.2.1 猪诱导多能干细胞第18-19页
            1.2.2 猪胚胎干细胞第19-20页
    第二章 多能干细胞培养体系的研究进展第20-29页
        2.1 多能状态的分类第20-22页
            2.1.1 激发态干细胞(primed)第20页
            2.1.2 初始态干细胞(Na?ve)第20-21页
            2.1.3 激发状态和初始状态的转换第21-22页
        2.2 维持多能状态的培养条件第22-27页
            2.2.1 细胞因子第23页
            2.2.2 小分子抑制剂第23-26页
            2.2.3 细胞培养基质第26-27页
        2.3 猪多能干细胞培养条件研究第27-29页
            2.3.1 猪ES细胞第27-28页
            2.3.2 猪iPS细胞第28-29页
试验研究第29-83页
    前言第29-31页
    第三章 猪DOX-iPS细胞系的建立与验证第31-46页
        3.1 材料和方法第31-39页
            3.1.1 试验材料第31-33页
            3.1.2 试验方法第33-39页
        3.2 结果第39-43页
            3.2.1 猪DOX-iPS细胞的建立第39页
            3.2.2 外源质粒插入检测第39-40页
            3.2.3 多能基因表达谱的检测第40页
            3.2.4 多能基因蛋白表达情况检测第40-41页
            3.2.5 核型检测第41-42页
            3.2.6 猪DOX-iPS细胞体外分化能力检测第42-43页
        3.3 讨论第43-44页
        3.4 小结第44-46页
    第四章 建立Dox调控的细胞重编程体系第46-52页
        4.1 材料和方法第46-47页
            4.1.1 试验材料第46页
            4.1.2 试验方法第46-47页
        4.2 结果第47-50页
            4.2.1 培养基中撤除Dox实验第47页
            4.2.2 鉴定DOX-iPSdiff细胞第47-48页
            4.2.3 诱导获得DOX-iPS2nd细胞第48-49页
            4.2.4 DOX-iPSdiff和DOX-iPS2nd细胞多能基因表达分析第49-50页
        4.3 讨论第50-51页
        4.4 小结第51-52页
    第五章 筛选和建立猪i PS的 2i培养条件第52-64页
        5.1 材料和方法第52-54页
            5.1.1 试验材料第52-53页
            5.1.2 试验方法第53-54页
        5.2 结果第54-62页
            5.2.1 LF2i培养基中关键因子的筛选第54-55页
            5.2.2 DOX-iPS细胞内源多能基因表达情况检测第55-56页
            5.2.3 DOX-iPS内源SOX2激活情况检测第56-57页
            5.2.4 利用无Dox 2i培养基培养DOX-iPS细胞第57-59页
            5.2.5 DOX-iPSdiff细胞再诱导重编程第59-60页
            5.2.6 在 2i和LF2i培养条件下对PEF细胞进行诱导重编程第60-62页
        5.3 讨论第62-63页
        5.4 小结第63-64页
    第六章 3i培养条件的建立第64-83页
        6.1 材料和方法第64-66页
            6.1.1 试验材料第64-65页
            6.1.2 试验方法第65-66页
        6.2 结果第66-81页
            6.2.1 不同细胞因子的筛选第66-68页
            6.2.2 撤除Dox后DOX-iPS细胞AP染色情况第68-69页
            6.2.3 细胞因子和PL撤除后DOX-iPS细胞的影响第69-70页
            6.2.4 无Dox的 2i+培养基中DOX-iPS细胞AP染色情况第70-71页
            6.2.5 小分子抑制剂的筛选第71-73页
            6.2.6 对MEK1/2 抑制剂浓度的筛选第73-75页
            6.2.7 3i培养基对DOX-iPS细胞的培养第75-77页
            6.2.8 培养在 3i条件中的猪DOX-iPS细胞OCT4激活情况检测第77-78页
            6.2.9 利用 3i培养基培养不同来源的猪多能干细胞第78-81页
        6.3 讨论第81-82页
        6.4 小结第82-83页
结论第83-84页
论文创新点及下一步研究方向第84-85页
参考文献第85-95页
附录第95-98页
缩略词第98-99页
致谢第99-100页
作者简介第100页

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