| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 柿香气研究进展 | 第11-12页 |
| 2 类胡萝卜素裂解双加氧酶(CCDs)的研究进展 | 第12-14页 |
| 2.1 脱辅基类胡萝卜素 | 第12页 |
| 2.2 脱辅基类胡萝卜素的合成 | 第12页 |
| 2.3 CCDs的发现 | 第12-13页 |
| 2.4 CCDs的作用方式及定位 | 第13页 |
| 2.5 CCD1酶 | 第13-14页 |
| 3 RNA干扰在植物改良中的作用 | 第14-20页 |
| 3.1 RNA干扰的发现 | 第14页 |
| 3.2 RNA干扰的作用机制 | 第14-15页 |
| 3.3 RNA干扰在植物改良中的应用 | 第15-20页 |
| 3.3.1 改变植物结构 | 第16-17页 |
| 3.3.2 提高非生物胁迫耐受性 | 第17页 |
| 3.3.3 提高生物胁迫抗性 | 第17-18页 |
| 3.3.4 删除过敏源 | 第18页 |
| 3.3.5 次生代谢产物工程 | 第18页 |
| 3.3.6 调节花色和香味 | 第18-19页 |
| 3.3.7 延长水果保质期 | 第19页 |
| 3.3.8 发育无核果 | 第19-20页 |
| 4 番茄遗传转化 | 第20-22页 |
| 4.1 番茄的组织培养 | 第20-21页 |
| 4.2 番茄的转基因工程 | 第21-22页 |
| 4.3 Micro-Tom番茄 | 第22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 DkCCD1基因超表达载体和抑制表达载体的构建 | 第23-46页 |
| 1 材料与方法 | 第23-32页 |
| 1.1 材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 1.1.2 试剂与材料 | 第23页 |
| 1.1.3 主要试剂的配置 | 第23-24页 |
| 1.2 试验方法 | 第24-32页 |
| 1.2.1 超表达载体和RNAi表达载体的构建示意图 | 第24页 |
| 1.2.2 柿果肉总RNA提取 | 第24-25页 |
| 1.2.3 反转录cDNA第一链合成 | 第25页 |
| 1.2.4 目的基因(含酶切位点)的获取 | 第25-28页 |
| 1.2.5 酶切 | 第28-29页 |
| 1.2.6 去磷酸化处理 | 第29页 |
| 1.2.7 目的片段与表达载体的连接 | 第29页 |
| 1.2.8 连接产物转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| 1.2.9 重组质粒的菌液PCR验证 | 第30页 |
| 1.2.10 重组质粒的双酶切 | 第30-31页 |
| 1.2.11 重组质粒导入农杆菌EHA105及筛选鉴定 | 第31-32页 |
| 2 结果分析 | 第32-44页 |
| 2.1 柿果实DkCCD1基因的获取与序列分析 | 第32-39页 |
| 2.2 重组质粒PCR鉴定及酶切验证 | 第39-43页 |
| 2.2.1 DkCCD1超表达载体重组质粒PCR鉴定及酶切验证 | 第39-40页 |
| 2.2.2 DkCCD1 RNAi表达载体重组质粒PCR鉴定及酶切验证 | 第40-43页 |
| 2.3 重组质粒转化农杆菌PCR验证 | 第43-44页 |
| 3 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 Micro-Tom番茄的遗传转化 | 第46-56页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| 1.1 材料 | 第46-47页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第46页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 1.1.3 培养基的配制 | 第47页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第47页 |
| 1.2 试验方法 | 第47-51页 |
| 1.2.1 Micro-Tom番茄再生体系的建立 | 第47-48页 |
| 1.2.2 Micro-Tom番茄遗传转化体系选择压和抑菌剂浓度的确定 | 第48页 |
| 1.2.3 农杆菌侵染液的制备 | 第48页 |
| 1.2.4 Micro-Tom番茄的遗传转化 | 第48-49页 |
| 1.2.5 转基因植株的检测 | 第49-51页 |
| 2 结果分析 | 第51-55页 |
| 2.1 潮霉素选择压的确定 | 第51-52页 |
| 2.2 抑菌剂Tim浓度的确定 | 第52-53页 |
| 2.3 转基因植株的PCR检测 | 第53页 |
| 2.4 转基因植株的RT-PCR检测 | 第53-55页 |
| 3 小结与讨论 | 第55-56页 |
| 全文小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 实验图片(Micro-Tom番茄遗传转化体系) | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
