中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
英文缩略词表 | 第14-15页 |
前言 | 第15-18页 |
一、黄精多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究 | 第18-31页 |
1.实验材料与仪器 | 第18-20页 |
1.1 实验动物 | 第18页 |
1.2 实验药物 | 第18-19页 |
1.3 主要试剂 | 第19页 |
1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
2.实验方法 | 第20-27页 |
2.1 实验动物分组及给药 | 第20页 |
2.2 大鼠心肌缺血再灌注损伤模型复制 | 第20页 |
2.3 大鼠心肌组织病理学变化(H.E染色) | 第20-21页 |
2.4 TUNEL法检测大鼠心肌组织细胞凋亡情况 | 第21-22页 |
2.5 ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-6 的含量 | 第22页 |
2.6 Western blot检测大鼠心肌组织蛋白表达情况 | 第22-25页 |
2.6.1 大鼠心肌组织蛋白提取 | 第22-23页 |
2.6.2 心肌组织核蛋白提取 | 第23页 |
2.6.3 BCA法测定蛋白浓度 | 第23-24页 |
2.6.4 Western blot | 第24-25页 |
2.7 数据处理 | 第25-26页 |
实验流程图 | 第26-27页 |
3.实验结果 | 第27-31页 |
3.1 黄精多糖对改善缺血再灌注损伤心肌的功能 | 第27页 |
3.2 黄精多糖对I/R大鼠心肌组织病理形态学的影响 | 第27-28页 |
3.3 黄精多糖对I/R大鼠心肌细胞凋亡率的影响 | 第28-29页 |
3.4 黄精多糖对I/R大鼠血清TNF-α、IL-6 的影响 | 第29页 |
3.5 黄精多糖对I/R大鼠心肌组织TLR4、NF-κB、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响 | 第29-31页 |
二、黄精多糖对缺氧复氧H 9 c 2 心肌细胞的保护作用研究 | 第31-42页 |
1.材料与仪器 | 第31-32页 |
1.1 试验药物 | 第31页 |
1.2 试验细胞株 | 第31页 |
1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
1.4 主要仪器 | 第32页 |
2.方法 | 第32-37页 |
2.1 H9c2细胞培养 | 第32页 |
2.2 H9c2心肌细胞H/R损伤模型建立 | 第32-33页 |
2.3 黄精多糖对H/R损伤H9c2心肌细胞活力的影响 | 第33页 |
2.4 试验分组 | 第33页 |
2.5 H9c2心肌细胞形态学变化 | 第33-34页 |
2.6 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率 | 第34-35页 |
2.6.1 AnnexinV/PI双染法原理 | 第34-35页 |
2.6.2 Annexin V/PI双染法具体操作方法 | 第35页 |
2.7 ELISA法检测H9c2心肌细胞TNF-α、IL-6 和Caspase-3 的含量 | 第35页 |
2.8 Western blot检测凋亡蛋白的表达情况 | 第35-36页 |
2.8.1 细胞总蛋白提取 | 第35-36页 |
2.8.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第36页 |
2.8.3 Western blot | 第36页 |
2.9 统计学分析 | 第36-37页 |
3.结果 | 第37-42页 |
3.1 H9c2细胞的生长特点 | 第37页 |
3.2 黄精多糖对H/R诱导H9c2细胞活性的影响 | 第37-38页 |
3.3 黄精多糖对H/R诱 导H9c 2 心肌细胞凋亡形态学的影响 | 第38-39页 |
3.4 黄精多糖对H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率的影响 | 第39-40页 |
3.5 黄精多糖对H/R诱导H9c2细胞上清Caspase-3、IL-6 和TNF-α活性的影响 | 第40-41页 |
3.6 黄精多糖对H/R诱导H9c2细胞凋亡蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
三、黄精多糖介导T L R 4 信号通路对H 9 c 2 细胞凋亡的影响 | 第42-52页 |
1.材料与仪器 | 第42-43页 |
1.1 主要试剂 | 第42页 |
1.2 仪器 | 第42-43页 |
2.方法 | 第43-48页 |
2.1 H9c2细胞培养 | 第43页 |
2.2 H9c2心肌细胞H/R损伤模型建立 | 第43页 |
2.3 实验分组及处理 | 第43页 |
2.4 MTT法检测细胞存活率 | 第43-44页 |
2.5 流式细胞仪(AnnexinV/PI双染法)检测细胞凋亡率 | 第44页 |
2.6 RT-PCR检测心肌细胞TLR4、MyD88mRNA表达水平 | 第44-46页 |
2.6.1 细胞RNA提取 | 第44页 |
2.6.2 转录反应 | 第44-45页 |
2.6.3 荧光定量PCR反应 | 第45页 |
2.6.4 TLR4、β-actin引物序列 | 第45-46页 |
2.7 Western blot测定细胞蛋白表达水平 | 第46-47页 |
2.7.1 细胞总蛋白提取 | 第46页 |
2.7.2 细胞核蛋白的提取 | 第46页 |
2.7.3 BCA测定蛋白浓度 | 第46页 |
2.7.4 Western blot | 第46-47页 |
2.8 统计学分析 | 第47-48页 |
3.结果 | 第48-52页 |
3.1 不同药物对H/R诱导H9c2细胞活性的影响 | 第48页 |
3.2 流式细胞仪检测各组细胞凋亡率情况 | 第48-49页 |
3.3 不同药物对H9c2细胞TLR4、MyD88mRNA的影响 | 第49-50页 |
3.4 Western blot检测H/R诱导H9c2细胞蛋白含量的影响 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-58页 |
1.心肌缺血再灌注损伤 | 第52-54页 |
1.1 心肌缺血再灌注与心律失常 | 第53页 |
1.2 心肌缺血再灌注与炎症反应 | 第53-54页 |
1.3 心肌缺血再灌注与细胞凋亡 | 第54页 |
2.黄精多糖的现代药理研究 | 第54-58页 |
2.1 黄精多糖对心肌缺血再灌注损伤炎症反应的作用 | 第54-56页 |
2.2 黄精多糖对心肌缺血再灌注细胞凋亡的作用 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
综述 黄精多糖的药理作用研究进展 | 第66-74页 |
参考文献 | 第71-74页 |
附录 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |