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黄精多糖通过抑制TLR4保护心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
英文缩略词表第14-15页
前言第15-18页
一、黄精多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究第18-31页
    1.实验材料与仪器第18-20页
        1.1 实验动物第18页
        1.2 实验药物第18-19页
        1.3 主要试剂第19页
        1.4 主要仪器第19-20页
    2.实验方法第20-27页
        2.1 实验动物分组及给药第20页
        2.2 大鼠心肌缺血再灌注损伤模型复制第20页
        2.3 大鼠心肌组织病理学变化(H.E染色)第20-21页
        2.4 TUNEL法检测大鼠心肌组织细胞凋亡情况第21-22页
        2.5 ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-6 的含量第22页
        2.6 Western blot检测大鼠心肌组织蛋白表达情况第22-25页
            2.6.1 大鼠心肌组织蛋白提取第22-23页
            2.6.2 心肌组织核蛋白提取第23页
            2.6.3 BCA法测定蛋白浓度第23-24页
            2.6.4 Western blot第24-25页
        2.7 数据处理第25-26页
        实验流程图第26-27页
    3.实验结果第27-31页
        3.1 黄精多糖对改善缺血再灌注损伤心肌的功能第27页
        3.2 黄精多糖对I/R大鼠心肌组织病理形态学的影响第27-28页
        3.3 黄精多糖对I/R大鼠心肌细胞凋亡率的影响第28-29页
        3.4 黄精多糖对I/R大鼠血清TNF-α、IL-6 的影响第29页
        3.5 黄精多糖对I/R大鼠心肌组织TLR4、NF-κB、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响第29-31页
二、黄精多糖对缺氧复氧H 9 c 2 心肌细胞的保护作用研究第31-42页
    1.材料与仪器第31-32页
        1.1 试验药物第31页
        1.2 试验细胞株第31页
        1.3 主要试剂第31-32页
        1.4 主要仪器第32页
    2.方法第32-37页
        2.1 H9c2细胞培养第32页
        2.2 H9c2心肌细胞H/R损伤模型建立第32-33页
        2.3 黄精多糖对H/R损伤H9c2心肌细胞活力的影响第33页
        2.4 试验分组第33页
        2.5 H9c2心肌细胞形态学变化第33-34页
        2.6 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率第34-35页
            2.6.1 AnnexinV/PI双染法原理第34-35页
            2.6.2 Annexin V/PI双染法具体操作方法第35页
        2.7 ELISA法检测H9c2心肌细胞TNF-α、IL-6 和Caspase-3 的含量第35页
        2.8 Western blot检测凋亡蛋白的表达情况第35-36页
            2.8.1 细胞总蛋白提取第35-36页
            2.8.2 BCA法测定蛋白浓度第36页
            2.8.3 Western blot第36页
        2.9 统计学分析第36-37页
    3.结果第37-42页
        3.1 H9c2细胞的生长特点第37页
        3.2 黄精多糖对H/R诱导H9c2细胞活性的影响第37-38页
        3.3 黄精多糖对H/R诱 导H9c 2 心肌细胞凋亡形态学的影响第38-39页
        3.4 黄精多糖对H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率的影响第39-40页
        3.5 黄精多糖对H/R诱导H9c2细胞上清Caspase-3、IL-6 和TNF-α活性的影响第40-41页
        3.6 黄精多糖对H/R诱导H9c2细胞凋亡蛋白表达的影响第41-42页
三、黄精多糖介导T L R 4 信号通路对H 9 c 2 细胞凋亡的影响第42-52页
    1.材料与仪器第42-43页
        1.1 主要试剂第42页
        1.2 仪器第42-43页
    2.方法第43-48页
        2.1 H9c2细胞培养第43页
        2.2 H9c2心肌细胞H/R损伤模型建立第43页
        2.3 实验分组及处理第43页
        2.4 MTT法检测细胞存活率第43-44页
        2.5 流式细胞仪(AnnexinV/PI双染法)检测细胞凋亡率第44页
        2.6 RT-PCR检测心肌细胞TLR4、MyD88mRNA表达水平第44-46页
            2.6.1 细胞RNA提取第44页
            2.6.2 转录反应第44-45页
            2.6.3 荧光定量PCR反应第45页
            2.6.4 TLR4、β-actin引物序列第45-46页
        2.7 Western blot测定细胞蛋白表达水平第46-47页
            2.7.1 细胞总蛋白提取第46页
            2.7.2 细胞核蛋白的提取第46页
            2.7.3 BCA测定蛋白浓度第46页
            2.7.4 Western blot第46-47页
        2.8 统计学分析第47-48页
    3.结果第48-52页
        3.1 不同药物对H/R诱导H9c2细胞活性的影响第48页
        3.2 流式细胞仪检测各组细胞凋亡率情况第48-49页
        3.3 不同药物对H9c2细胞TLR4、MyD88mRNA的影响第49-50页
        3.4 Western blot检测H/R诱导H9c2细胞蛋白含量的影响第50-52页
讨论第52-58页
    1.心肌缺血再灌注损伤第52-54页
        1.1 心肌缺血再灌注与心律失常第53页
        1.2 心肌缺血再灌注与炎症反应第53-54页
        1.3 心肌缺血再灌注与细胞凋亡第54页
    2.黄精多糖的现代药理研究第54-58页
        2.1 黄精多糖对心肌缺血再灌注损伤炎症反应的作用第54-56页
        2.2 黄精多糖对心肌缺血再灌注细胞凋亡的作用第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-66页
综述 黄精多糖的药理作用研究进展第66-74页
    参考文献第71-74页
附录第74-75页
致谢第75页

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