| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 (Abbreviation) | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 前言 | 第12页 |
| 1.2 柑橘黄龙病的生物学特性 | 第12-14页 |
| 1.2.1 柑橘黄龙病的分布及传播方式 | 第12-13页 |
| 1.2.2 HLB菌症状特点及寄主范围 | 第13-14页 |
| 1.3 HLB菌分子生物学研究 | 第14-18页 |
| 1.3.1 HLB菌分类地位及分子水平遗传多样性研究 | 第14-16页 |
| 1.3.2 HLB菌基因组特点及致病机理 | 第16-17页 |
| 1.3.3 黄龙病菌检测鉴定方法及综合防控策略 | 第17-18页 |
| 1.4 植物抗病反应机制 | 第18-19页 |
| 1.4.1 植物先天性免疫系统 | 第18页 |
| 1.4.2 植物病原细菌效应子引起的免疫反应信号通路 | 第18-19页 |
| 1.5 肽聚糖相关脂蛋白结构特征及功能 | 第19-21页 |
| 1.6 亚细胞定位的研究 | 第21页 |
| 1.7 本试验研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 HLB菌肽聚糖相关脂蛋白基因感染本氏烟草表型观察及亚细胞定位 | 第22-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-30页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要供试菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 基因突变体引物设计及片段扩增 | 第24-25页 |
| 2.1.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| 2.1.6 DNA片段的回收与纯化 | 第25-26页 |
| 2.1.7 Gateway技术BP反应及LR反应 | 第26-27页 |
| 2.1.8 热击转化TOP10感受态细胞 | 第27页 |
| 2.1.9 质粒的小量提取 | 第27-28页 |
| 2.1.10 根癌农杆菌GV3101感受态的制备 | 第28页 |
| 2.1.11 热击转化农杆菌GV3101菌株及阳性鉴定 | 第28-29页 |
| 2.1.12 根癌农杆菌诱导接种本氏烟草及瞬时表达 | 第29-30页 |
| 2.2 结果与分析 | 第30-41页 |
| 2.2.1 缺失突变体和定点突变体基因完整ORF扩增、克隆及测序分析 | 第30-31页 |
| 2.2.2 Gateway入门载体的构建及测序分析 | 第31-33页 |
| 2.2.3 表达载体的构建及序列分析 | 第33-35页 |
| 2.2.4 重组载体转化农杆菌阳性鉴定 | 第35-37页 |
| 2.2.5 阳性转化子感染烟草表型观察 | 第37-39页 |
| 2.2.6 重组表达载体基因在本氏烟草中定位分析 | 第39-41页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 HLB菌肽聚糖相关脂蛋白基因与红心柚互作分析 | 第42-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-46页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第42页 |
| 3.1.2 主要试剂、载体及仪器 | 第42页 |
| 3.1.3 DAB染色 | 第42-43页 |
| 3.1.4 苯胺蓝染色 | 第43页 |
| 3.1.5 植物总RNA提取 | 第43-44页 |
| 3.1.6 DNA消化 | 第44页 |
| 3.1.7 反转录合成cDNA | 第44-45页 |
| 3.1.8 qRT-PCR的扩增 | 第45-46页 |
| 3.2 结果与分析 | 第46-53页 |
| 3.2.1 胼胝体沉积 | 第46-48页 |
| 3.2.2 氧爆发观察 | 第48-50页 |
| 3.2.3 感染红心柚表型观察 | 第50-51页 |
| 3.2.4 红心柚防卫基因表达分析 | 第51-53页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 HLB菌肽聚糖相关脂蛋白基因在E.coil中定位分析 | 第55-66页 |
| 4.1 材料与方法 | 第55-60页 |
| 4.1.1 主要试剂、载体及仪器 | 第55页 |
| 4.1.2 基因突变体引物设计及扩增 | 第55-56页 |
| 4.1.3 目的基因和目的载体的处理 | 第56-57页 |
| 4.1.4 构建含有GFP的重组载体 | 第57-58页 |
| 4.1.5 缺失及定点突变体基因在E.coli中诱导表达及定位 | 第58页 |
| 4.1.6 SDS-PAGE检测 | 第58-59页 |
| 4.1.7 缺失及定点突变体目的基因融合蛋白在大肠杆菌中的定位 | 第59-60页 |
| 4.2 结果与分析 | 第60-65页 |
| 4.2.1 缺失及定点突变体基因原核定位载体的构建 | 第60-62页 |
| 4.2.2 缺失及定点突变体基因重组载体在E.coli中诱导表达 | 第62-63页 |
| 4.2.3 缺失及定点突变体基因重组载体在E.coli中定位 | 第63-65页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第65-66页 |
| 第五章 结论与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附录A：pDONR~(TM)/Zeo载体图谱 | 第77-78页 |
| 附录B：pSK103载体图谱 | 第78-79页 |
| 附录C：pET His6 GFP TEV LIC cloning vector (1GFP)载体图谱及信息 | 第79-80页 |
| 附录D：主要试剂及溶液的配置 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
