| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 课题来源 | 第7页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第7-8页 |
| 1.3 国内外在该方向的研究现状及分析 | 第8-14页 |
| 1.3.1 生物农药 | 第8页 |
| 1.3.2 球毛壳菌 | 第8-10页 |
| 1.3.3 β-1,3-葡聚糖及β-1,3-葡聚糖酶 | 第10-11页 |
| 1.3.4 毕赤酵母 | 第11-14页 |
| 1.4 技术路线图 | 第14页 |
| 1.5 研究内容 | 第14-15页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第15-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 菌株及载体 | 第15页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 实验药品 | 第15-16页 |
| 2.1.4 实验培养基 | 第16-17页 |
| 2.1.5 实验引物 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-37页 |
| 2.2.1 球毛壳菌的葡聚糖酶基因的获得 | 第17-21页 |
| 2.2.2 重组表达质粒 pPIC9K-cgglu 的构建 | 第21-29页 |
| 2.2.3 毕赤酵母的电转化及其转化子的筛选 | 第29-33页 |
| 2.2.4 GS115-pPIC9K-cgglu 转化子的诱导表达 | 第33页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE 蛋白电泳检测 | 第33-35页 |
| 2.2.6 重组蛋白 CGGLU 的酶学特性研究 | 第35-36页 |
| 2.2.7 重组蛋白 CGGLU 抑菌作用初步研究 | 第36-37页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第37-53页 |
| 3.1 球毛壳菌的葡聚糖酶基因的获得 | 第37-41页 |
| 3.1.1 β-1,3-葡聚糖酶基因的基本信息 | 第37-39页 |
| 3.1.2 β-1,3-葡聚糖酶基因的获得 | 第39-41页 |
| 3.2 重组表达质粒 pPIC9K-cgglu 的构建 | 第41-43页 |
| 3.2.1 pPIC9K 的获得及双酶切 | 第41页 |
| 3.2.2 双酶切法及 PCR 法检测重组质粒 pPIC9K-cgglu | 第41-43页 |
| 3.3 毕赤酵母的电转化及其转化子的筛选 | 第43-46页 |
| 3.3.1 线性化及电转化 | 第43-44页 |
| 3.3.2 转化子的 MD 及 MM 平板筛选 | 第44-45页 |
| 3.3.3 转化子的 PCR 法检测 | 第45-46页 |
| 3.4 GS115-pPIC9K-cgglu 的诱导表达及 SDS-PAGE 分析 | 第46-48页 |
| 3.5 重组蛋白 CGGLU 的酶学性质研究 | 第48-50页 |
| 3.5.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第48-49页 |
| 3.5.2 重组蛋白 CGGLU 的最适温度 | 第49页 |
| 3.5.3 重组蛋白 CGGLU 的不同诱导时间下的酶活力 | 第49-50页 |
| 3.6 重组蛋白 CGGLU 抑菌作用初步研究 | 第50-51页 |
| 3.7 本章小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
